摘要：背景:由干细胞分化而来的胰岛样细胞存在数量少、胰岛素分泌量少以及能否达到临床移植要求等问题。目的:观察不同细胞因子组合对人脐血干细胞体外向胰岛样细胞诱导分化的影响。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-05/09在辽宁省血液中心输血医学研究所细胞研究中心完成。材料:脐血来源于足月分娩的健康产妇,由沈阳市德济医院提供。方法:密度梯度离心法体外分离人脐血单个核细胞,诱导1组首先以低糖DMEM培养液进行培养,添加20μg/L碱性成纤维细胞生长因子和20μg/L表皮生长因子,培养成巢蛋白阳性细胞后改为高糖DMEM培养液,添加2%B27和10mmol/L尼可酰胺。诱导2组直接以高糖DMEM培养液进行培养,添加20mmol/L尼可酰胺、20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L肝细胞生长因子、2%B27及0.1mmol/Lβ-巯基乙醇。对照组只添加与诱导组相同的培养液,不加入任何细胞因子。主要观察指标:诱导分化后对贴壁细胞进行形态学观察、胰岛素抗体的细胞免疫荧光染色及双硫腙染色鉴定。结果:体外培养的人脐血干细胞通过细胞因子组合诱导后,可见散在的胰岛样细胞或成群的胰岛样细胞群,呈Insulin阳性反应。诱导1组细胞散在或成群分布,诱导2组则多为散在分布的胰岛样细胞,且细胞相对较小,几乎没有胰岛细胞团。双硫腙染色后诱导1组有少部分较大的胰岛样细胞呈阴性,诱导2组细胞均呈棕红色阳性表达,未诱导的对照组细胞呈阴性。结论:人脐血干细胞通过不同细胞因子组合诱导后具有向胰岛样细胞分化的潜能,但诱导1组中部分细胞可能是非胰岛素细胞,而诱导2组胰岛样细胞均一性较差,可能与胰岛细胞种类较多、大小不一有关。

摘要：目的:了解我国各采供血机构单采血小板献血者招募和保留的影响因素,为采供血机构制定切实有效的单采血小板献血者招募和保留策略提供参考建议。方法:采用问卷调查的形式,设计涵盖招募单采血小板献血者的部门、招募的方式、预约制或计划采集单采血小板、单采血小板献血者纪念品、单采血小板献血者交通补助、单采血小板献血者餐饮标准、单采血小板献血者回访、是否分析过单采血小板献血者流失的原因、单采血小板采集方式、不同设备采集量、单采血小板献血者宣传活动共计8项调研内容。由执业比对工作组秘书处发放至全国63家采供血机构(28家血液中心和35家中心血站),对反馈信息和数据进行汇总分析。结果:共收回43份反馈意见,其中血液中心16家,中心血站27份。通过调查了解到目前我国部分血液中心和中心血站在单采血小板献血者招募和保留工作的招募部门、特色的宣传活动、招募方式、采集计划、献血纪念品、交通补助、血小板采集方式、定期回访、分析献血者流失原因、献血点位布局等方面差异无统计学意义(P>0.05)。但在预约采集(P<0.05)以及单采与全血餐饮标准(P<0.01)上差异有统计学意义。结论:血液中心或中心血站可以根据本单位单采血小板献血人群的特点并结合临床血小板需求合理的制定采集计划避免献血者过度集中或不足;给予单采血小板献血者适宜的餐饮,提供更为温馨、人性化的服务以吸引献血者持续参与无偿献血。

摘要：目的探讨1例A3表型个体的血清学特性和分子机制。方法选取2022年5月12日就诊于中国医科大学附属第四医院的1名27岁汉族女性作为研究对象。使用标准血清学方法检测其ABO血型,通过PCR扩增产物直接测序法鉴定ABO基因及第6~7外显子的单链序列,并使用生物信息学软件对变异位点进行分析。结果检测结果提示该个体为A3表型,其第6、7外显子存在c.261delG、c.467C>T和c.745C>T杂合变异。单链测序结果提示样本存在ABO*A3.07和ABO*O.01.01等位基因,其中ABO*A3.07等位基因在ABO*A1.02等位基因的背景下存在c.745C>T(p.R249W)变异。生物信息学分析预测c.745C>T(p.R249W)为可能有害变异,自由能变化(ΔΔG)值预测其可能影响蛋白稳定性。蛋白模拟模型提示p.R249W可造成α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶局部氢键网格的改变。结论α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因的c.745C>T(p.R249W)变异可能造成酶蛋白结构和功能的失稳,进而导致A抗原表达减弱。

摘要：目的分析1例RHAG基因变异导致血清学弱D表型的分子机制。方法对1例血清学弱D表型标本进行RHD、RHCE和RHAG基因的全编码区直接测序,并对变异位点采用生物信息学软件进行预测分析。结果该标本血清学检测结果为弱D和正常Rh Ccee表型。直接测序结果显示RHD和RHCE基因序列正常,RHAG基因检测到1个纯合子变异c.572G>A(p.R191Q)。PolyPhen2、PROVEAN和Mutation Taster算法分别预测c.572G>A变异对蛋白结构“可能有害”、“有害”和“有影响”。突变后的蛋白质稳定性自由能变化(△△G)值预测其可能影响蛋白的稳定性。三维蛋白模拟模型提示p.R191Q可造成RhAG蛋白空间结构的改变。结论由RHAG基因p.R191Q纯合子变异导致血清学弱D表达,但不影响RhCE抗原的表达。

摘要：目的研究1例A_(m)亚型的血清学特性和分子遗传机制。方法对1例ABO血型血清学方法鉴定正反定型不一致的标本,进行ABO基因的完整编码区和包括内含子1转录因子结合位点进行分段直接测序,对第6~7外显子的PCR产物进行克隆和测序,并对变异位点采用生物信息学软件进行预测分析。结果该标本血清学检测为A_(m)表型,在第6、7外显子存在261delG、467C/T和912C/A杂合,在内含子1中未发现碱基缺失和改变。进一步的TA克隆和测序显示该标本存在ABO*O.01.01等位基因和ABO*A1.02等位基因背景下c.912 C>A(p.S304R)变异的新等位基因。该新等位基因序列已被GenBank数据库收录,登录号为JX489776。PolyPhen2和PROVEAN算法分别预测c.912C>A变异“可能有害”和“有害”。自由能变化(ΔΔG)值预测其可能影响蛋白的稳定性。蛋白模拟模型提示p.S304R可造成α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶局部氢键网格的改变。结论α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因的c.912 C>A(p.S304R)变异可能造成酶蛋白结构和功能的失稳,进而导致A抗原表达减弱。