摘要：目的针对常规生化检测项目，制定自动审核规则，借助实验室信息管理系统实现检验结果的自动审核。方法依据美国临床和实验室标准协会（CLSI）AUTO－10A及医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189：2012）的指导意见，在室内质控在控的基础上，实验室设计自动审核逻辑，设置六大审核规则，包括室内质控规则、样本状态判断规则、逻辑紊乱规则、值域及多次结果比较（ΔCheck）规则（包括危急值、警示值、参考区间）、关联矛盾规则、异常模式规则，并将审核逻辑和规则搭建在实验室信息系统中。对2016年10月至2017年4月本中心实验室常规生化检测项目，分别按项目、条码统计自动审核通过情况，并与临床诊断信息及人工审核情况进行比较。结果按项目统计自动审核通过率超过65%，按条码统计通过率为45%左右，与临床诊断符合率92%，经过规则的进一步完善，与人工审核相比较，通过一致率从97.48%提高到100%，不通过一致率从82.98%提高到85.21%。结论（1）设置的自动审核逻辑和规则可以实现半数常规生化检验结果的自动审核，且与人工审核判断通过有较高的一致率；（2）新增加的规则必须经过一定周期的验证，方可正式应用；（3）自动审核可以实现检验后步骤的自动化，缩短报告审核时间，提高工作效率。（中华检验医学杂志，2018, 41：547－553）

摘要：目的:探讨建立新生儿败血症的分子生物学诊断方法。方法:分析16S rRNA核苷酸序列,设计引物及探针,选取临床常见菌株进行PCR扩增及检测;对疑为败血症的317例新生患儿分别行PCR和血培养检测。结果:PCR检测阳性率明显高于血培养(P<0.05)。以血培养为参照,PCR检测的敏感性高,特异性好。结论:建立了新生儿败血症的分子生物学诊断方法,满足临床快速、准确的要求,具有较大的推广及应用价值。

摘要：随着乳饮料行业快速发展,掺杂使假现象层出不穷,对核桃乳真实成分的准确鉴定变的尤为重要。核桃乳属深加工食品,DNA破坏严重,DNA提取是开展核桃乳DNA条形码鉴定的首要环节。为优化核桃乳DNA提取方法,并基于psbA-trnH基因DNA条形码建立核桃乳的掺假造假鉴定方法。以10种不同品牌的核桃乳为样品,采用3种方法(静置抽提、异丙醇沉淀、抽真空冻干)进行预处理,再用2种CTAB裂解沉淀方法和3种试剂盒方法(康为新型植物基因组DNA提取试剂盒、爱思进植物基因组DNA提取试剂盒和天根深加工食品DNA提取试剂盒)提取核桃乳DNA,并在此基础上创新尝试了CTAB与爱思进试剂盒结合方法。以提取的市售核桃乳DNA为模板,利用自行设计的特异性基因psbA-trnH-wal鉴定样品中是否含有核桃成分,确定造假情况;选择常见植物候选基因psbA-trnH鉴定样品中是否含有其他成分,确定掺假情况。结果表明,抽真空冻干预处理方法优于其他2种预处理方式。CTAB与爱思进试剂盒结合方法能提取到纯度好、得率高、扩增能力强的核桃乳DNA,是最佳的核桃乳DNA提取方法。扩增及比对结果显示,1款核桃乳样品中含有花生,属于掺假产品。抽真空冻干预处理、CTAB与爱思进试剂盒结合为优化后的核桃乳DNA提取方法,psbA-trnH-wal基因和psbA-trnH基因结合能够对核桃乳及其掺假造假品进行快速准确的鉴定。

摘要：目的建立高效的焦磷酸测序鉴定临床常见病原菌的方法。方法在细菌16S rRNA的V1及V3可变区两端保守序列设计PCR扩增通用引物及焦磷酸测序引物,PCR扩增后焦磷酸测序测定V1及V3可变区序列,测序结果与数据库比对判断细菌种属。结果在4 h内完成96株细菌的鉴定,所有菌株鉴定结果与常规鉴定结果一致。结论焦磷酸测序技术可以用于临床分离菌株的鉴定,且具有费用相对低廉、高通量、鉴定能力强等优点。

摘要：目的旨在建立一种快速及高通量的CYP2C19药物代谢酶相关基因多态性的检测方法，为个体化治疗提供用药参考。方法抽取96例人外周血DNA，应用带有生物素标记的扩增引物，经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板，于PyroMarkID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序，且以Sanger测序法测序结果为对照，观察分析准确性。结果运用焦磷酸测序可以成功检测CYP2C19相关基因型；单个sNP住点检测经与Sanger测序方法比较，符合率为100％。同时，通过设计焦磷酸测序引物，两个PCR产物可合并于一管中进行焦磷酸测序，与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比，能有效降低检测成本，节省检测时间。结论该方法可准确、高通量、快速检测药物代谢酶相关基因多态性，该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值，也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测。

摘要：目的了解接种新型冠状病毒(新冠病毒)灭活疫苗后血清抗体水平,为评价新冠病毒灭活疫苗免疫原性提供依据。方法采用单组目标值试验设计,整群抽取2020年10—12月在杭州市西湖区接种新冠病毒灭活疫苗的18~59岁居民为研究对象。采集接种前,接种1剂次后14 d、28 d和接种2剂次后28 d的血样,应用磁微粒化学发光法检测新冠病毒IgG和IgM抗体,分析抗体阳转率和抗体浓度变化情况。结果纳入研究对象310人,接种1剂次后14 d、28 d和接种2剂次后28 d分别调查133人、97人和254人,新冠病毒IgG抗体阳转率分别为6.02%、28.87%和98.43%,抗体浓度[M(Q_(R))]分别为1.76(3.25)、5.69(9.95)和52.05(47.60)AU/mL,抗体浓度差异有统计学意义(P0.05)。接种后新冠病毒IgG和IgM抗体浓度均高于接种前(P<0.05)。18~<40岁组新冠病毒IgG抗体浓度高于40~59岁组(P<0.05)。结论18~59岁人群全程接种新冠病毒灭活疫苗后28 d呈现较好的免疫原性;部分受种者在接种1剂次后14 d、28 d可检出新冠病毒IgM抗体阳性。

摘要：目的:建立一种快速、廉价、特异性高、准确检测强直性脊柱炎(AS)患者人类白细胞抗原B27(HLA-B27)的方法。方法:选择人类白细胞抗原B27蛋白基因组保守区域设计上游引物,下游引物,优化PCR反应体系。对450例AS疑似标本和50例健康体检标本同时采用流式细胞技术(FCM)检测对照其结果进行方法学评价。结果:(1)成功的构建了PCR反应体系。(2)450例AS疑似标本聚合酶链反应(PCR)法检出HLA-B27阳性247例,阳性率54.89%,流式细胞技术检出HLA-B27阳性250例,阳性率55.56%,50例健康体检标本HLA-B27两种检测方法均为阴性。两者复合率达98%以上,对20例阳性标本进行多次PCR实验,重复性一致,未见批间和批内差异。(3)初步临床应用证实该方法结果准确、灵敏度高。结论:采用聚合酶链反应检测HLA-B27的方法灵敏度高、特异性强、操作简便、廉价、快速,更适合临床检验诊断的要求。

摘要：个体基因组信息得益于大数据的积累,其应用不再局限于科学研究,正在经历逐步走向日常医疗实践的过程中。对疾病关联基因组信息的系统整理、归档及合理应用配置是未来精准医学的重要基础。血红蛋白病在我国南方发病率高,其分子病理学基础有明显的种族特异性。为助力我国南方血红蛋白病的临床诊断和遗传筛查的应用,本项目团队建立了中国人群血红蛋白病变异谱及表型谱 LOVD 基因变异数据管理系统,并通过设计全面整合和高效分析的在线辅助精确诊断及风险评估系统,展示了基于云端标准化的特定血红蛋白病变异注释库和诊断知识库辅助医生快速做出综合、全面的诊断和遗传咨询的操作。通过数据整合和人工智能技术的结合提高疾病临床决策效率的方法和经验,可为其他疾病的临床和预防应用起示范作用。