摘要：本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃(3s)精子活率最高,为48.77%,20℃(80s)精子活率最低,为30.02%,两者差异极显著(P<0.01)。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率(P<0.05),80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30%。

摘要：根据不同季节的太阳高度角随地理纬度变化的原理,确定牛舍塑料暖棚面与地面的最佳夹角,使冬季大寒(最冷)这天正午时分,太阳辐射的入射角与塑料棚面垂直,以其充分利用太阳的辐射热能,提高牛舍内的温度。设计建造地处北纬43°地区(通辽市科尔沁区余粮堡镇吴金宝村)的日光暖棚牛舍,通过测定温热环境和舍内空气质量表明,在大寒当天舍外气温-20～-8℃下,牛舍内的温度平均5.25℃,有害气体浓度均低于中华人民共和国国家标准,达到了防寒抗灾目的。

摘要：为建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)3种基因型的多重RT-PCR方法,根据GenBank上发表的BPIV3 3种基因型病毒株的HN基因序列设计特异性引物,优化反应体系建立多重RT-PCR方法。结果显示,方法可同时扩增出BPIV3A型150bp、B型253bp和C型342bp的特异性片段,与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、牛支原体、牛布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、牛源多杀性巴氏杆菌A型和B型均无交叉反应,A、B、C基因型BPIV3最低阳性质粒检测量分别为0.89×104、0.92×104和1.53×104拷贝/μL。本试验建立的多重RT-PCR检测方法操作方便、特异性强,应用于临床样本的检测,可快速检测BPIV3 3种基因型。

摘要：本研究以通辽市农业科学研究院育成的10个矮秆Lm型标记雌性系和9个矮秆恢复系,采用NCII交配设计配制90个矮秆蓖麻杂交组合,对F1组合及亲本的籽粒大小、品质性状进行了相关、通径及回归分析.结果表明,籽仁含油率与籽粒容重、籽粒百粒重、籽仁百粒重、籽粒出仁率呈显著或极显著正相关;籽粒出仁率、籽粒含油率、籽仁含油率与硬脂酸、油酸呈极显著正相关,与亚油酸、亚麻酸呈显著或极显著负相关;蓖麻油酸的相对含量与棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、花生一烯酸、山嵛酸的相对含量呈极显著负相关;蓖麻籽粒性状、品质性状对籽粒含油率的直接贡献大小依次为:籽粒出仁率>籽粒百粒重>籽粒三轴(长度、宽度、厚度)乘积>籽粒体积>籽粒厚>籽粒容重>籽粒长>籽粒宽>籽仁百粒重;通过回归分析,得出籽粒宽、籽粒三轴乘积、籽粒百粒重、籽粒出仁率4个性状与籽粒含油率的回归方程,为蓖麻品质育种提供理论依据.

摘要：为获得中国西门塔尔牛解偶联蛋白(Uncoupling proteins,UCPs)ucp1、ucp2、ucp3基因的组织表达谱,揭示该基因与能量代谢的关系,探索调控肉牛脂肪沉积的关键基因表达规律,筛选影响肉牛肥育性状的候选基因。以20头中国西门塔尔牛为试验材料,提取其15种组织(肝脏、淋巴、肋间肉、肩肉、脾脏、肾脏、背最长肌、肺、心脏、肠脂、网脂、睾丸、小肠、胰脏、背膘)总RNA,设计合成ucp1、ucp2、ucp3基因的引物,以牛β-actin基因为内参,利用实时荧光定量PCR技术,检测ucp1、ucp2、ucp3基因的mRNA在以上各组织中的表达。结果表明,ucp1、ucp2、ucp3基因在睾丸、小肠、心脏、胰腺等组织、器官中均有不同程度的表达,ucp1在背膘中高表达,胰脏、小肠、睾丸、网脂、肠脂、心脏中度表达,在其他组织中低表达;ucp2在睾丸中高表达,肺脏、肝脏、背膘中度表达,在其他组织中低表达;ucp3在背最长肌、肋间肉、肩肉中高表达,肺脏中度表达,在其他组织中低表达。经相关分析表明:眼肉中ucp3基因的表达量与肌内脂肪和背膘厚关系不大,而与眼肌面积呈正相关(r=0.788)。结论:中国西门塔尔牛ucp1、ucp2、ucp3基因的表达,具有组织特异性;ucp1、ucp2、ucp3在不同组织的表达差异,可能与其在不同组织中的功能有关;ucp3基因可作为与胴体性状相关的候选基因。

摘要：为了探索牛乳腺炎无乳链球菌磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,Pgk)基因编码蛋白的抗原性,根据GenBank公布的牛源无乳链球菌Pgk基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR扩增出Pgk蛋白抗原优势区的编码序列,并对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及抗原性鉴定。结果显示克隆的Pgk基因序列含有984 bp,编码328个氨基酸残基。临床分离株与GenBank上公布的B群无乳链球菌菌株Pgk基因(AE009948)核苷酸序列同源性为99.09%,氨基酸序列同源性为99.69%。将扩增的Pgk基因片段克隆至原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体Pgk-pET30a(+),再将筛选的阳性重组质粒转化至BL21工程菌,经IPTG诱导获得部分可溶性表达Pgk重组蛋白。经Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在90%以上的蛋白,经Western blot分析结果表明,重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步探索其对奶牛的免疫原性研究奠定了良好的实验基础。

摘要：根据GenBank上公布的金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus enterotoxin A,SEA)基因的全序列,设计一对特异性引物扩增内蒙古分离株的SEA基因序列。经基因克隆和序列测定,表明扩增的基因片段长度为582 bp,与标准菌株ATCC13565的SEA基因片段序列相似性为100%,与GenBank上公布的金黄色葡萄球菌菌株(EF520720.1)SEA基因相似性达到99.14%。本研究结果为进一步研究建立牛乳中SEA分子检测技术奠定了实验基础。

摘要：肌肉生长抑制素(myostatin)基因是影响骨骼肌生长和发育重要的候选基因。实验以2头双肌皮埃蒙特牛和30头蒙古牛基因组DNA为模板,针对牛myostatin基因设计了3对引物并扩增了3个外显子和部分5'调控区。对PCR扩增片段克隆、测序结果显示,2头皮埃蒙特牛均在编码序列938处发生G到A突变,使编码氨基酸由半胱氨酸变为酪氨酸,符合前人检测结果。首次在蒙古牛中发现在6个不同位点存在单核苷酸突变,其中3个无义突变,3个突变引起了编码氨基酸变化,反映了牛myostatin基因在进化过程中具有较高的突变性。

摘要：通过对采集到的青岛市某发病羊场羊口疮病料(强毒)在山羊成纤维细胞上连续传90代(弱毒)后,分别进行病毒基因组提取,并对提取到的基因组分别命名为ORFV-QD和ORFV-RD。根据GenBank上发表的ORFV全基因组序列设计并合成3对特异性引物,分别扩增ORFV-QD和ORFV-RD的B2L基因、F1L基因和VIR基因片段,并将扩增得到的基因组片段分别克隆到pMD-19T载体上,转化到DH5α感受态细胞中,对重组质粒进行鉴定后送至测序公司进行测序,用DNASTAR软件对测序结果进行拼接及3组基因之间核苷酸同源性比较分析,将测序结果与NCBI上已公布的13组ORFV全基因组相应基因核苷酸序列进行同源性比对分析、构建系统进化树及氨基酸序列比对分析。结果表明,3组基因与参考序列的B2L基因、F1L基因和VIR基因核苷酸同源性分别为92.1%~98.4%、96.1%~99.1%和94.6%~100%。将2株病毒基因组与参考序列进行氨基酸序列比较分析,结果显示2株病毒基因组之间并没有较为明显的差异。