摘要：目的建立高氧急性肺损伤（HALI）大鼠模型，寻找一种更简便、价格更低、性能更稳定的高氧模型建立方法。方法自行设计一种可控性的高氧动物饲养箱。将100只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和HALI组，每组再按高氧暴露时间随机分为0、24、48、72和96h5个亚组，每个亚组10只。正常对照组直接在空气中饲养；HALI组置于高氧箱中饲养，箱内氧浓度≥体积分数90％，温度维持在25～27℃，湿度保持在50％～70％，CO2浓度〈0．5％，每日持续给氧23．5h。分别在各时间点取大鼠动脉血进行血气分析，并计算氧合指数（OI）及呼吸指数（RI）。处死大鼠取右肺组织行苏木素一伊红（HE）染色，光镜下观察肺组织病理改变并进行病理学评分；取左肺测量湿／干质量（W／D）比值。结果随着高氧暴露时间的延长，大鼠肺组织病理学损伤程度逐渐加重，肺泡结构逐渐紊乱，肺泡壁断裂破坏，肺泡间隔逐渐增宽、水肿、炎性细胞浸润，部分大鼠可见少量红细胞渗出，在48～72h达高峰。HALI组随着高氧暴露时间（0、24、48、72、96h）的延长，OI（mmHg，1mmHg=0．133kPa）逐渐降低（446．67±29．93、306．19±37．23、269．70±29．00、253．81±43．40、245．58±35．25），RI（0．25±0．04、0．31±0．06、0．38±0．06、0．46±0．07、0．44±0．03）、肺组织病理学评分（分：0．00±0．00、0．90±0．74、2．90±1．20、4．70±1．57、4．80±1．23）和肺W／D比值（3．84±0．61、4．14±0．46、4．56±0．34、5．32±0．27、5．18±0．25）呈进行性升高，72h内各指标与前一时间点比较差异均有统计学意义（均P〈0．05），而96h与72h比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）；24h开始，上述各指标与正常对照组比较差异有统计学意义，并持续至96h[OI（mmHg）：24h为306．19±37．23比435．65±25．34，96h为245．58±35．25比465．42±24．75；RI：24h为0．31±0．06比0．24±0．04，96h为0．44±0．03比0．24±0．06；肺组织病理学评分（分）：24h为0．90±0．74比0．00±0．00，96h为4．80±1．23比0．00±0．00；肺W／D比值：24h为4．14±0．46比3．79±0．44，96h为5．18±0．25比4．12±0．91；均P〈0．05]。结论自行设计的高氧箱操作简便、性能稳定，在持续给予高浓度氧（≥90％）24h后即可成功复制HALI模型，并于48～72h损伤达高峰。

摘要：目的根据贵州省手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)分离株的VP1结构蛋白序列研制多肽疫苗并研究其对小鼠的免疫保护作用。方法 2013年3月1日至2015年12月31日从贵州省手足口病患儿的咽拭子样本中分离到17株EV71毒株,其VP1氨基酸序列一致(共297个氨基酸),据此设计并合成多肽片段(除最后一段为27个氨基酸外,其余均为20个氨基酸);用感染EV71的手足口病病愈患儿的阳性血清,通过间接ELISA法筛选出免疫原性较好的多肽片段,制成多肽疫苗;用多肽疫苗免疫ICR健康雌鼠,并设未免疫的对照(Con);将雌鼠的子代小鼠随机分为注射和不注射EV71病毒颗粒的2个亚组;注射病毒2 d后处死所有小鼠,分别取小鼠的骨骼肌、小肠和脑组织,通过RT-PCR检测病毒感染情况,同时HE染色后在显微镜下观察病理改变。结果共设计并合成19段含交叉序列的多肽片段,从中筛选出3段免疫原性较好的(P2:VSRALTHALPAPTGQNTQVS;P4:ALQAAEIGASSNASDESMIE;P8:YANWDIDITGYAQMRRKVEL),制成多肽疫苗并免疫雌鼠,取雌鼠的子代小鼠进行后续试验。RT-PCR结果显示,各感染病毒亚组的骨骼肌、小肠和脑组织中均能检测到EV71病毒,而未感染病毒亚组均检测不到;病理结果显示,未接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠在感染EV71病毒后,骨骼肌、小肠和脑组织均出现明显的炎性改变;接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织的炎性改变明显减轻,3种多肽疫苗对EV71所致炎症的改善作用无明显差异;接种多肽疫苗母鼠的未注射病毒亚组子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织中均未检测到EV71病毒,也未观察到明显的炎性改变。结论本研究成功制备VP1抗原表位多肽疫苗并在动物实验中证实了其有效性和安全性,可为今后相关疫苗的研制提供方法学借鉴。

摘要：重症患者在血液净化血管通路的建立与应用中存在其自身特点,为指导这一特殊人群的血液净化临床工作,中国重症血液净化协作组组织专家制定了重症患者血液净化血管通路建立与应用中国专家共识。协作组通过组织专家系统查阅文献资料并结合专家临床经验,列出重症患者血液净化过程中的血管通路问题,设计专家函询表,应用德尔菲专家函询法和专家会议法对各个条目进行修改、完善,最终在六个方面47个条目达成共识,为临床医护人员实施重症血液净化提供有价值的参考。

摘要：目的探讨慢性HBV携带者、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)及急性乙型肝炎(acute hepatitis B,AHB)这3种不同HBV感染状态下患者外周血中CD4^+ CD25^+调节性T细胞(T regulatory cells,Tregs)T细胞受体(T cell receptor,TCR)β链各家族互补决定区3(complementarity-determining region 3,CDR3)谱系漂移特征。方法采集3例正常人、5例慢性HBV携带者、12例CHB及5例AHB患者外周抗凝静脉血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC);磁珠分选法分选CD4^+ CD25^+Tregs,提取总RNA,逆转录合成c DNA;根据TCRβ链24个可变区基因(TRBV)家族设计相应的上游引物,并在β链恒定区(BC)设计1条共用的FAM荧光标记下游引物及对照引物。PCR扩增出24个包含完整CDR3区的TRBV家族的PCR产物,电泳鉴定目的片段;PCR产物送上海基康用毛细管电泳法进行基因扫描;用Peak Scanner Software v1.0软件分析TRBV家族CDR3谱系特征。结果不同HBV感染状态下24个TRBV家族CDR3谱系图均呈现一个或者多个形态不一、数量不等的单峰、寡峰、偏峰谱型,其中一些家族表达极低或缺失,在1.5%琼脂糖凝胶电泳图上多数家族于预测范围大小处呈现1条模糊条带,部分家族出现清晰条带或无条带;对不同HBV感染者间各TRBV家族CDR3谱系偏移率进行比较发现:慢性HBV携带者中BV7谱系偏移率明显高于CHB及AHB患者(P均<0.05),CHB患者中BV15谱系偏移率明显高于慢性HBV携带者及AHB患者(P均<0.05),AHB患者中BV23谱系偏移率明显高于CHB及慢性HBV携带者(P均<0.05)。CHB患者外周血CD4^+ CD25^+Tregs TRBV家族CDR3克隆增生总体异常率与HBV DNA载量呈正相关关系(r=0.576 5,P=0.049 8)。结论部分优势利用的TRBV家族可能在感染HBV后免疫耐受以及清除病毒中发挥重要作用。

摘要：目的 :调查NICU患儿母亲照护相关需求现况并分析其影响因素。方法 :采用自行设计的一般资料调查表及中文版新生儿重症监护室患儿家长需求量表(NICU-FNI),对遵义市某三级甲等医院110名NICU患儿母亲进行调查。结果:患儿母亲需求总分(107.30±8.03)分,处于中等水平。多元逐步回归分析结果显示,受孕方式、是否定期产检,患儿入院日龄、疾病诊断、是否下病危是影响患儿母亲需求的主要因素(P<0.05)。结论 :NICU患儿母亲需求总体处于中等水平,但具体的需求随着母亲孕产期情况和患儿出生后的病情发生改变,因此,护士应客观评估患儿母亲需求,给予其个性化的护理,提高患儿母亲对患儿疾病治疗的支持,完善以患儿家庭为中心的护理服务模式。

摘要：目的探讨"微课"在重症监护病房(ICU)教学查房中的应用。方法选取2017年9月—2018年8月在我院ICU进行住院医师规范化培训的医师60名作为研究对象。将其随机分为两组,即传统教学查房组(对照组,n=30)和微课教学查房组(实验组,n=30),在查房结束后采用自行设计的学习能力问卷调查表进行调查,从而评估两组规培医师的学习能力。结果通过对60名规培医师查房后能力评价问卷反馈调查,实验组规培医师自主学习的能力、语言沟通和表达能力、问题分析和解决能力、临床思维能力、PPT制作能力、文献检索能力、专业知识的理解能力、理论联系实际的能力均优于对照组;组间比较,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论微课教学法应用于ICU教学查房中,能培养与锻炼规培医师分析与处理问题的综合能力,并能激发规培医师的学习能动性,进而提高教学查房的效果,可以弥补传统教学查房的不足,值得在今后的教学工作中完善并推广。

摘要：目的调查阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者疾病相关知识认知情况和健康教育需求情况。方法选取90例OSAHS患者为研究对象,采用OSAHS知识问卷(AKT)调查患者疾病相关知识认知情况,采用自行设计的OSAHS患者健康教育需求内容调查表调查患者对健康教育内容的需求情况。结果 90例患者AKT均分为(5.27±3.16)分,其中得分≥12分者5例(5.56%),得分<12分者85例(94.44%)。OSAHS疾病相关知识中,"什么是OSAHS"、"OSAHS的3种症状"、"CPAP治疗可能存在的问题"、"CPAP治疗时漏气可能发生的部位"、"医院CPAP治疗时患者怎样配合"回答正确率较低,依次为11.11%、35.56%、33.33%、27.78%、37.78%。对"治疗相关知识"、"自我管理知识"需求较高,分别为92.22%和94.44%。结论 OSAHS患者对疾病相关知识认知普遍较低,应加强健康教育,提高OSAHS患者对疾病的自我管理能力。