摘要：目的制备白藜芦醇纳米粒并考察其对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠认知功能的影响。方法采用界面聚合法制备白藜芦醇纳米粒(resveratrol nanoparticles,Res-NPs)。以搅拌时间、氰基丙烯酸正丁酯用量、投药量为考察因素,以粒径、多分散性指数(polydispersity index,PDI)、包封率、载药量为指标,采用CRITIC法计算权重系数,结合星点设计-效应面法优化其处方和工艺。以pH=7.4的磷酸缓冲液为释放介质考察其体外释放性能。给予大鼠腹腔注射D-半乳糖(150 mg·kg-1·d-1)联合灌胃AlCl3(10 mg·kg-1·d-1)建立AD模型,并将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、白藜芦醇溶液(resveratrol solution,Res-sol)组(30 mg·kg-1·d-1)和Res-NPs组(30 mg·kg-1·d-1)。给药结束后,Morris水迷宫试验检测认知功能,ELSA检测大鼠海马中特征性病理β淀粉样蛋白1-42(beta amyloid protein 1-42,Aβ1-42)的表达。结果优选的搅拌时间为3.94 h,氰基丙烯酸正丁酯用量为42μL,投药量为44 mg。其粒径、PDI、包封率和载药量分别为(203.5±1.674) nm、0.064±0.002、(83.79±0.301)%和(14.19±0.117)%。72 h内白藜芦醇的累积释放量为80.24%。与模型组比较,白藜芦醇各组AD大鼠认知功能均提高(P<0.05),Aβ1-42表达量减少(P<0.05),且Res-NPs组较Res-sol组大鼠认知功能提高(P<0.05),Aβ1-42表达量减少(P<0.05)。结论由星点设计-效应面法得到的处方工艺可行,制得的Res-NPs质量可靠,具有较好的缓释作用,可减少AD大鼠海马Aβ1-42表达,改善认知功能。

摘要：目的构建一个猫STR基因座复合扩增体系并对其技术性能进行测试,评估其应用价值。方法整理和分析猫STR基因座文献数据资料,筛选可用于猫个体识别和亲缘关系鉴定的STR基因座和性别鉴定位点,设计荧光标记引物,构建复合扩增体系。对构建的复合扩增体系进行灵敏度、准确性、均衡性、稳定性、种属特异性、组织同一性和混合样本等验证,并对145例猫无关个体进行群体遗传学调查。结果成功筛选到16个猫常染色体STR基因座和1个Y染色体性别决定区,并构建了包含上述基因座的复合扩增体系。DNA模板量低至0.25 ng时仍可得到完整分型,检测其他常见动物样本时未见特异性扩增峰。群体遗传学调查结果显示,16个猫STR基因座累积个体识别率为1-3.57×10^(-20),累积非父排除率为1-6.35×10^(-5),累积匹配概率为3.61×10^(-20)。结论本研究构建的猫STR基因座复合扩增体系灵敏度高、种属特异性好、分型结果准确,能够为司法鉴定领域中涉及猫的种属鉴定、个体识别及亲缘关系鉴定等案件提供有效的解决方法。

摘要：目的:构建SUZ12基因过表达和敲减的恶性外周神经鞘瘤(MPNST)稳定细胞株并探讨其意义。方法:PCR合成SUZ12基因全长并设计合成SUZ12基因的3对特异性sgRNA干扰靶点序列(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3),构建重组表达质粒,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒并用荧光法测定其滴度。确定慢病毒感染的最适MOI以及嘌呤霉素筛选的最适剂量,转染ST88-14细胞,构建过表达及敲减的MPNST稳定细胞株。荧光显微镜观察稳定株绿色荧光蛋白的表达情况,RT-qPCR在mRNA水平进行验证,MTT法检测SUZ12过表达和敲减组增殖活性的改变。结果:LV-SUZ12和LV-SUZ12-sgRNA转导入ST88-14细胞并稳定表达绿色荧光蛋白,RT-qPCR结果显示过表达稳定株SUZ12表达量明显升高(P<0.05),CRISPR/Cas9敲减稳定株SUZ12表达量明显下降(P<0.05)。MTT结果显示过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖。结论:SUZ12过表达和敲减的稳定细胞株构建成功,初步验证结果表明过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖,为针对SUZ12在MPNST中的生物学功能、作用机制和疾病诊断治疗的进一步研究提供了实验基础。