摘要：目的评估老年脓毒症患者使用小剂量左西孟旦[0. 1～0. 2μg/(kg·min)]对死亡率和器官功能的影响。方法采用回顾性、随机、双盲设计,收集2014年1月至2017年12月我院ICU收治的168例年龄≥65岁的感染性休克患者作为研究对象。采用计算机进行随机区组设计,将所有患者随机平均分为左西孟旦组(84例)和对照组(84例)。对照组给予标准治疗,左西孟旦组在标准治疗的基础上连续静脉输注0. 1～0. 2μg/(kg·min)左西孟旦(规格:5 ml/12. 5 mg) 24 h,无负荷剂量。记录患者给药后28 d内平均每日连续器官衰竭评估(Sequential organ failure assessment,SOFA)评分,比较两组患者ICU住院死亡率、住院期间死亡率、28 d内患者死亡率,以及ICU住院天数、总住院天数。结果左西孟旦组和对照组患者在ICU住院死亡率、住院期间死亡率、28 d内患者死亡率、平均每日SOFA得分以及除心血管评分之外的其他器官评分方面差异均无统计学意义(P> 0. 05)。左西孟旦组患者的ICU住院天数、总住院天数较对照组缩短,而心血管器官衰竭评分高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论小剂量左西孟旦能缩短ICU住院天数和总住院天数,并能改善患者的心血管功能,对于老年脓毒症患者有应用价值。

摘要：目的:探讨使用CRSIPR/Cas9技术删除CTL的免疫检查点CTLA-4后CTL的抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果及其作用机制。方法:针对CTLA-4设计特异性小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)并构建sgRNA/Cas9质粒,使用慢病毒载体转染质粒至CTL获得删除CTLA-4的CTL(CTLA-4 KO CTL),并验证质粒的转染效率和CTLA-4的删除效率。BALB/c裸鼠随机分为2组进行实验,预防性注射CTLA-4 KO CTL(实验组)及CTL(对照组),3 d后接种结肠癌细胞株LS174-T,观察成瘤率及成瘤时间。建立结肠癌移植瘤裸鼠模型,成瘤后裸鼠随机分为2组,分别给予CTLA-4 KO CTL(实验组)及CTL(对照组)进行细胞治疗,观察移植瘤的体积、裸鼠的生存时间,并检测移植瘤裸鼠血清中TNF-α及IFN-γ分泌水平。结果:设计sgRNA并成功构建以慢病毒为载体的CRSIPR/Cas9系统,使用构建好的CRSIPR/Cas9系统转染CTL细胞,转染效率最高可达(28.80±0.62)%,转染后以流式细胞术检测CTLA-4的删除效率,CTLA-4 KO CTL组的CTLA-4表达较CTL组显著降低[(0.91±0.25)%vs(42.70±2.72)%,P<0.01]。预防实验中,实验组结肠癌移植瘤发生率明显低于对照组(33.33%vs 100.00%,P<0.01)。治疗实验中,实验组肿瘤体积较对照组显著减少[(503.0±23.9)vs(911.2±51.4)mm^3,P<0.05],实验组裸鼠相较于对照组生存时间明显延长(中位生存期:78 vs 42 d,P<0.05),实验组裸鼠血清TNF-α[(268.93±17.04)vs(148.26±20.07)pg/ml,P<0.05]及IFN-γ[(315.38±18.67)vs (202.92±29.32) pg/ml,P<0.05]的分泌水平较对照组明显增高。结论:以CRSIPR/Cas9技术成功删除CTL中免疫检查点CTLA-4后可以显著抑制裸鼠结肠癌移植瘤的成瘤率、增强CTL对荷结肠癌裸鼠的抗肿瘤作用,并明显增高荷瘤鼠血清中TNF-α和IFN-γ水平。