摘要：目的 通过胰十二指肠切除术（PD）患者术前的计算机断层扫描（ CT）资料,探讨能预测术后胰瘘（POPF）的有效指标.方法 回顾性分析郑州大学人民医院2010年6月至2017年1月行PD患者的CT图像资料,研究胰腺指数、胰管宽度、胰腺CT值、胰脾CT值比、胰腺厚度等13个变量指标,确定各指标与POPF的相关性,绘制受试者工作曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC）进行评价.对具有最大AUC的指标设计不同切割点值,计算约登指数等指标,找出具有最大预测效能的临界值.结果 共154例PD患者纳入研究范围,27例（17.5％）发生了POPF.变量指标中7个与POPF显著关联,其中胰腺指数具有ROC曲线下具有最大面积（AUC：0.865,P〈0.001）;胰管宽度（AUC：0.834,P〈0.001）同样具有较高的预测价值;胰腺厚度、胰脾CT值比率、腹壁脂肪厚度、胰腺CT值、胰腺腹主动脉CT比率与POPF同样相关.胰腺指数切割点界定在0.15时,敏感度为0.83,特异度为0.86,约登指数为0.69,准确度为0.88,预测效能最高.脐周腹围、脾脏CT值等6个指标与POPF无相关性.结论 对术前患者CT指标进行分析可预测PD术后POPF的风险,通过评估发现胰腺指数具有最大预测效能,同时胰管宽度,胰脾密度比等指标与POPF相关.

摘要：目的 观察微小RNA-135a（miRNA-135a）对人胰腺癌细胞株Bxpc-3增殖及凋亡的影响.方法 噻唑蓝（MTT）实验检测5-氟尿嘧啶（5-Fu）对Bxpc-3细胞的抑制率,选择合适的5-Fu浓度进行后续实验；流式细胞术检测5-Fu作用后Bxpc-3细胞的凋亡率；实时定量荧光逆转录聚合酶链反应（FQ-PCR）检测5 Fu作用后Bxpc-3细胞miRNA-135a的含量变化.设计miRNA-135a模拟物及反义寡核苷酸链,分别转染Bxpc-3细胞,并转染空病毒组作为对照,RT-qPCR检测各转染组miRNA-135a表达量；MTT法实验检测转染后各组Bxpc-3细胞的增殖率；流式细胞术检测5-Fu作用后各转染组Bxpc-3细胞的凋亡率.结果 5-Fu对胰腺癌细胞Bxpc-3的抑制有浓度和时间依赖性,随着药物浓度增大及作用时间延长,5-Fu对Bxpc-3抑制率增高.经5-Fu处理3、6、12h后miRNA-135a表达量是对照组的（0.45±0.02）、（0.60±0.03）、（0.73±0.02）倍,差异均有统计学意义（P＜0.05）.转染miRNA-135a模拟物组较空病毒miRNA-135a表达量升高（9.73±0.83）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）；转染miRNA-135a反义寡核苷酸链组是空病毒组miRNA-135a表达量的（0.26±0.01）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）.转染miRNA-135a模拟物组较转染空病毒组细胞增殖率明显升高,相反转染miRNA135反义寡核苷酸链组较转染空病毒组细胞增殖率明显降低.24h后,转染miRNA-135a模拟物组Bxpc-3细胞凋亡率[（12.03±1.07）％]较空病毒组[（20.61±1.53）％]明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）；转染miRNA-135a反义寡核苷酸链组Bxpc-3细胞凋亡率[（38.20±2.64）％]较空病毒组的（20.61±1.53）％明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 5-Fu作用于Bxpc-3细胞后miRNA-135a表达量降低；上调miRNA-135a表达,Bxpc-3细胞的增殖速率升高,Bxpc-3细胞的凋亡率降低；下调miRNA-135a的表达,Bxpc-3细胞增殖率降低,Bxpc-3细胞的凋亡率增高.

摘要：目的探讨微小RNA135a（miR-135a）是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞（AR42J）凋亡。方法设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链，并通过慢病毒转染AR42J细胞，72h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞荧光表达量，实时荧光定量聚合酶链反应（***）法检测转染后miR-135a的表达量。使用50陆∥L重组大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF—α）诱导AR42J细胞建立体外急性水肿性胰腺炎模型（AEP），淀粉酶试剂盒检测培养基上清淀粉酶含量，Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达量，流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率。构建Sp3野生型（WT）和突变型（Mut）3’非编码区（3’UTR）-荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告系统检测miR-135a对Sp3基因野生型及突变型3’UTR荧光素酶活性的影响，并通过FQ—PCR和Westernblot法检测转染miR-135a模拟物及反义寡核昔酸链后Sp3基因mRNA及蛋白表达量变化。结果转染miR-135a模拟物组较转染空病毒组miR-135a表达量升高（5．84±0．16）倍，转染miR-135a反义寡核苷酸链组miR-135a表达量是转染空病毒组的（0．54±0．01）倍，差异均有统计学意义（P〈0．05）。建立急性水肿性胰腺炎模型后，转染miR-135a模拟物组AR42J细胞凋亡率[（40．63±3．24）％]较转染空病毒组[（25．40±0．79）％]明显升高，转染miR-135a反义寡核苷酸链组AR42J细胞凋亡率[（15．10±0．10）％]较空病毒组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。生物信息学软件及荧光素酶定量实验结果表明Sp3是mill-135a的靶基因，转染miR-135a模拟物组s03mRNA及蛋白质表达量较转染空病毒组明显降低，转染miR-135a反义寡核苷酸链组Sp3mRNA及蛋白质表达量较空病毒组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-135a可能能够通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠体外急性水肿性胰腺炎中AR42J细胞的凋亡。

摘要：目的探究缝隙连接结合蛋白2(GJB2)在胰腺癌相关成纤维细胞(CAF)的表达和对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响。方法收集河南省人民医院39例胰腺癌标本和其对应癌旁组织,培养原代CAF和正常胰腺成纤维细胞(NF)以及胰腺癌类器官。测序分析CAF与NF基因表达差异。免疫组化染色进行GJB2表达评分,根据病理结果将标本分为T分期>2组和T≤2组,N>0组和N=0组,有神经浸润组和无神经浸润组。采用t检验评估不同分组GJB2表达评分差异,免疫组化染色进行GJB2表达评分,根据病理结果将标本分为T分期>2组和T≤2组,N>0组和N=0组,有神经浸润组和无神经浸润组。使用t检验评估不同分组GJB2表达评分差异,分析GJB2在CAF中表达量与患者预后相关性。设计GJB2过表达序列并构建载体,转染NF,蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后NF中GJB2表达量。将GJB2过表达组设为实验组(OE-NF),转染空载质粒NF设为对照组(OE-NC),分别与胰腺癌细胞、胰腺癌类器官共培养,Transwell实验和侵袭胶实验,采用t检验评估两组细胞影响下胰腺癌细胞的转移能力和侵袭能力差异。结果测序结果显示GJB2在CAF表达量高于NF(log2FoldChange:-5.37 pval:1.34e-042组表达量(11.310±0.221)较T≤2组(9.261±0.542)明显升高,差异有统计学意义(t=3.99,P0组表达量(10.950±0.249)较N=0的组(9.313±0.669)升高,差异有统计学意义(t=2.857,P<0.05)。神经浸润组(11.600±0.193)较无神经浸润组(9.625±0.442)升高,差异有统计学意义(t=4.563,P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析结果显示GJB2高表达组患者3年总生存期明显低于低表达组[风险比(HR)=2.50(1.26~4.96),P<0.01]。Transwell迁移实验中OE-NF组穿出数量(20.200±2.417)多于OE-NC组(6.600±1.288,t=4.966,P<0.01),且Transwell侵袭实验中OE-NF组(343.80±19.440)引导肿瘤细胞穿出数量多于OE-NC组(66.380±3.914,t=13.99,P<0.01)。结论GJB2在CAF中高表达且与患者预后相关,并且可促进胰腺癌细胞侵袭和迁移。