摘要：背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂（Smac）蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白，我们先前的研究表明，Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人，因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡，但如何成功将SmacsiRNA转染进入LECs是研究的关键。目的构建人SmacsiRNA慢病毒载体并对人LECs进行感染，研究慢病毒载体构建方法及其在人晶状体上皮细胞HLE—B3中的干扰效率，利用RNA干扰（RNAi）技术建立Smac低表达的HLE—B3株。方法根据我们前期的工作设计并合成针对Smac基因序列的siRNA序列，将合成的双链DNA以T4噬菌体DNA连接酶与GV118慢病毒载体相连接，转化DH5α感受态细胞，采用PCR筛选阳性克隆，经测序鉴定正确后，感染293T细胞，收集上清液并标定病毒滴度。用重组慢病毒感染HLE—B3细胞，荧光显微镜下观察转染后的阳性HLE—B3细胞数并计算病毒感染复数（MOI）。将常规培养的HLE—B3细胞分为阴性对照组、空质粒组和GV118-Smac—siRNA1组，阴性对照组为常规培养的细胞，空质粒组细胞仅转染不含慢病毒载体的siRNA质粒，GV118-Smac·siRNA1组细胞转染GV118-Smac—siRNA1质粒，采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中SmacmRNA的相对表达量。结果构建的重组载体GV118-Smac—siRNAl转化DH5c感受态细胞后阳性克隆产物大小为340bp，空载的克隆产物为299bp，与预期结果相符，测序结果显示合成的Smac—siRNA1与预期目的序列一致。构建的GV118-Smac—siRNA1病毒滴度为3．0x10。TU／m1。感染HLE．B3细胞后荧光显微镜下可见MOI为100时，细胞毒性低且感染效率高，约为82％。阴性对照组、空载质粒组和GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量分别为（101．290±8．349）％、（92．330±6．320）％和（32．540±4．221）％，3个组间总体比较差异有统计学意义（F=32．871，P〈0．01），其中GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量较阴性对照组明显下降，差异有统计学意义（P=0．000），而空载质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量略低于阴性对照组，但组间差异无统计学意义（P=0．535）。结论本研究中成功构建了siRNA慢病毒载体GV118-Smac—siRNA1，其转染HLE—B3效率高，该siRNA载体能够有效地抑制人LECs中Smac基因的表达。

摘要：目的:探讨生理性支抗(PASS)技术在牙性前突拔牙矫治中的磨牙支抗控制效果。方法:选取因牙齿前突需要拔牙矫治的恒牙期安氏Ⅰ类和Ⅱ类患者共76例(年龄11~41岁),拔除4颗前磨牙,上颌强或中支抗设计。分别使用生理性支抗矫治器(PASS)组和自锁托槽矫治器(自锁组)进行拔牙矫治,每组各38例,其中自锁组有17例使用种植钉加强支抗。收集两组患者治疗前后头颅侧位片,测量与磨牙支抗和前牙内收相关的骨性、牙性和牙合平面指标(共23项)。结果:治疗后,所有患者前牙区主要骨性、牙性指标均有改善(P0.05)。结论:PASS技术在不采用额外支抗增强措施的情况下能够实现对上颌磨牙的强支抗控制效果。

摘要：背景:大量研究表明增强脑内源性神经细胞的自我修复和增殖能力将成为治愈缺血缺氧性脑损伤最有价值的方法之一。目的:探讨氦氖激光对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤内源性神经干细胞增殖及分化的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-12/2008-05在郑州大学护理学院完成。材料:7d龄健康Wistar新生大鼠36只,随机分为假手术组、模型组、激光治疗组,12只/组。氦氖激光多功能治疗仪由桂林电子仪器厂生产。方法:模型组、激光治疗组新生大鼠通过结扎左颈总动脉后,再吸入低浓度氧(含体积分数为8%的O2、体积分数为92%的N2)建立缺血缺氧性脑损伤模型;假手术组不结扎左颈总动脉,置于正常空气中。造模后第2天开始,激光治疗组给予氦氖激光照射,激光波长632.8nm,激光功率4mW,光斑直径3mm,功率密度56.62mV,能量密度33.975J/cm2,10min/次,1次/d,10d为1个疗程,共2个疗程,两疗程间隔2d。穴位选取顶骨正中的"百会"穴,以及第7颈椎与第1胸椎间、背部正中的"大椎"穴。疗程结束后制备脑海马切片,分别进行巢蛋白和微管关联蛋白2免疫组织化学染色。主要观察指标:大鼠脑内巢蛋白标记的神经干细胞和微管关联蛋白2标记的神经元的表达情况。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①大鼠内源性神经干细胞的表达:与假手术组比较,模型组、激光治疗组齿状回内巢蛋白免疫阳性细胞均明显增多(F=122.36,P<0.05),且激光治疗组增多幅度大于模型组(P<0.05)。②神经元特有结构蛋白的表达:激光治疗组大脑皮质微管关联蛋白2表达相当广泛,强阳性染成棕褐色的树突呈条索样、流星样放射状分布,海马各区锥体神经元和齿状回颗粒细胞层神经元排列比较整齐,树突连续阳性染色呈树枝状交叉分布于分子层。假手术组与激光治疗组染色所见无明显差别。模型组微管关联蛋白2表达明显减弱。结论:激光治疗能够促进缺血缺氧性脑损伤新生大鼠脑内源性神经干细胞增殖,并诱导其向神经元方向分化。