摘要：目的构建Survivin的shRNA表达质粒并将其导入白血病细胞株HL-60细胞以探讨RNA干扰对HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法设计、合成两对针对survivin的shRNA序列,连接到带有人U6启动子的载体质粒pSINsi-Hu6中,将构建重组质粒命名为pSIN/shRNA1和pSIN/shRNA2。pSIN/shRNA1转染HL60细胞,应用四唑盐(MTT)比色法观察细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果酶切分析和测序证实pSIN/shRNA1和pSIN/shRNA2构建成功。MTT测定显示转染重组质粒pSIN/shRNA1入HL-60细胞48、72和96h后细胞增殖明显受到抑制,分别与阴性对照组、空白对照组组比较,差异有显著性(P<0.05)。流式细胞仪分析pSIN/shRNA1组胞凋亡率达(20.21±0.75)%,明显高于阴性对照组的(2.58±0.48)%和空白对照组的(1.26±0.30)%。结论成功地构建了survivin基因RNAi真核表达载体,且pSIN/shRNA1可序列特异性地抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,为白血病的基因治疗奠定基础。