摘要：目的:观察增殖细胞核抗原(PCNA)基因特异性的10-23脱氧核酶(DNAZYME)对人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)增殖的影响。方法:设计合成针对PCNA基因起始密码AUG的DNAZYME,应用脂质体转染法将其转人体外培养的HUASMC。检测DNAZYME干预HUASMC 2 D后[3H]-TDR的掺入量;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析HUASMC的增殖;采用流式细胞仪检测细胞周期。结果:1．0 ΜMOL/L DNAZYME干预HUASMC 2 D后,[3H]-TDR 的掺入量低于对照组(P<0．05)。1．0ΜMOL/L的DNAZYME和反义寡聚核苷酸(ASODN)组处理2、3和5 D后,MTT比色吸光度值低于对照组(均P<0．01)。DNAZYME对细胞增殖的抑制呈剂量依赖性。细胞干预2 D后,DNAZYME、ASODN 和对照组的C0/G1期细胞的比率分别为73．8％、54．7％和41．1％。结论:针对PCNA的DNAZYME能有效抑制HUASMC 的体外增殖。

摘要：根据GenBank中小鼠的IL-2 cDNA序列设计引物,从小鼠肝脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出小鼠的IL-2基因。结果表明,克隆出了IL-2基因,获得了与预期大小相一致的850 bp的DNA片段,为研究其组成、结构和利用基因工程生产该药物打下基础。

摘要：目的:研究小干扰RNA(siRNA)对血管内皮细胞Akt1基因表达的沉默作用及其对肺癌A549细胞条件培养基促血管内皮细胞迁移的影响。方法:以人脐静脉内皮细胞为靶细胞,设计针对Akt1基因mRNA的siRNA(siAkt1),利用阳离子脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞,采用半定量PCR技术(RT-PCR)检测Akt1mRNA的表达,用Western blotting技术检测Akt总蛋白表达。同时用体外"伤口愈合"实验观察细胞迁移。结果:筛选出的siAkt1能显著抑制内皮细胞Akt1mRNA(P0.05)。结论:特异性siRNA通过有效抑制Akt1基因的表达而抑制A549细胞条件培养基促血管内皮细胞迁移的作用,这为肺癌血管生成干预治疗提供了新的理论基础。