摘要：作为科技创新的重要主体,高校应着力开展科技创新、技术转移和科技成果转化,打通创新和应用“最后一公里”,实现科技成果向社会和教学“双转化”。然而,当前我国高校科技成果转化率不足,高校科技转移机构未能充分发挥效能。基于此,文章以全生命周期理论为指导,以提高我国高校转移机构运行效能为目标,将高校技术转移机构模式下的项目建设分为项目需求、项目设计、项目立项、项目实施、项目评估5个主阶段,从多方面分析了高校科技成果转化率低的原因,并提出了健全转化保障体系、加强校企联合、健全激励评价机制等提高科技成果转化的具体对策。

摘要：基于小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)的翻转课堂教学模式结合了线上线下教学的优势,已经广泛应用于医学教育领域。为了进一步提高医学检验专业学生的形态学检验能力,本研究在重庆医科大学2019级四年制医学检验技术专业和卫生检验与检疫专业共211名学生的临床基础检验学技术课程形态学教学中采用该教学模式。本文阐述了该教学模式在临床基础检验学技术课程形态学教学中的设计和实施过程,通过考试成绩和问卷调查评价教学效果。结果显示,2019级医学检验技术专业和卫生检验与检疫专业学生的形态学考试总评成绩分别为(83.22±1.63)分和(76.67±2.48)分,其均值分别比2018级2个专业学生的相关成绩[(76.39±0.69)分,(67.36±1.37)分]高了6.83分和9.31分;在回收有效问卷的198名学生中,190名(96.0%)学生认为该教学模式有助于形态学知识的巩固,143名(72.2%)学生认为其能够针对性地解决形态学学习中的难点,119名(60.1%)学生认为增强了他们的临床实践能力。基于SPOC的翻转课堂教学模式有助于学生对形态学知识的理解和掌握,进而培养了其自主学习能力,使其能够主动解决学习中的难点,增强其对细胞及其他有形成分的辨认能力,提高了该课程形态学的教学效果。

摘要：针对相关研究提出的在创新创业中如何结合学生专业知识、激发学生创新创业激情、营造创新创业氛围的问题,该文提出同伴教育结合项目发展(Peer education-Project development,PEPD)的创新创业教学新方法。结合前期PEPD在创新创业教学中的良好效果,分享PEPD的具体流程,剖析PEPD中必备的核心要素以及各个核心要素的作用,总结PEPD的优点和不足。

摘要：目的 设计合成4个苯氧乙酸类化合物,通过不同方法表征其对人谷胱甘肽-S-转移酶Mu(glutathione-S-transferase Mu, GSTM)的抑制性能,考察苯氧乙酸类化合物与GSTM之间的构效关系。方法 设计合成含α,β-不饱和酮结构的4-丙烯酰苯氧乙酰乙胺(Ⅰa)、N,N’-(4-(丙烯酰基)苯氧乙酰基)丁二胺(Ⅱa)和不含α,β-不饱和酮结构的4-丙酰苯氧乙酰乙胺(Ⅰb)、N,N’-(4-(丙酰基)苯氧乙酰基)丁二胺(Ⅱb),利用初速度法表征4个化合物对GSTM的半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC)和表观抑制常数(inhibition constant,K),利用荧光光谱法表征4个化合物对GSTM的解离常数(dissociation constant,K)。结果 含α,β-不饱和酮结构的Ⅰa、Ⅱa可与谷胱甘肽(glutathione, GSH)发生亲电加成反应,与酶和GSH孵育原位生成产物后,其对GSTM的IC分别为(67±6)μmol/L、(0.10±0.02)μmol/L (n=2);不含α,β-不饱和酮结构的Ⅰb、Ⅱb对GSTM无明显抑制作用。Ⅰa相对GSH的K为(19.9±1.6)μmol/L,相对CDNB的K为(9.1±0.7)μmol/L (n=3);Ⅱa相对GSH的K为(0.063±0.005)μmol/L,相对CDNB的K为(0.079±0.006)μmol/L (n=3);可见Ⅱa较Ⅰa的K低(P0.05),而Ⅱa较Ⅰa、Ⅱb较Ⅰb的K低(P<0.05)。结论 α,β-不饱和酮结构是苯氧乙酸类化合物抑制作用的必须官能团;二价抑制剂Ⅱa、Ⅱb较单价抑制剂Ⅰa、Ⅰb对GSTM具有更高亲和力,Ⅱa的产物较Ⅰa的产物抑制作用更强。

摘要：目的:建立一种检测罗库溴铵的电化学发光(ECL)方法。方法:利用正交设计实验对检测体系中三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)浓度和磷酸缓冲盐(PBS)浓度及pH值实行搭配实验,并对实验结果进行多元二次回归分析,得到最佳检测条件。结果:Ru(bpy)32+浓度、PBS浓度及pH值的最佳实验条件分别为1.0 mmol/L、102.5 mmol/L和8.0。本方法检测线性范围为0.1至100μg/mL,检测限为0.06μg/mL。结论:该方法快速、简单。可用于罗库溴铵注射液的测定。

摘要：建立了一种新的基于高区别因子三臂DNA纳米探针的荧光分析法检测人体多重耐药(MDR)基因。此探针由保护链P1和互补链C1与信号报告部分(信号链S1和信号链S2)组成:P1与修饰了荧光猝灭基团Dabcyl的S1及C1部分碱基杂交;修饰了荧光基团FAM的S2与C1另一部分碱基杂交。探针内部Dabcyl和FAM相互靠近,荧光猝灭。当MDR基因存在时,其与三臂DNA纳米探针发生链替代反应,释放荧光信号。在最优条件下,单碱基错配产生的微小的热力学改变即可影响该探针链替代效率,从而实现高特异性检测MDR基因和其点突变基因(2m、3m、3d、5m、5d)。该探针对不同突变位点及同一突变位点的不同突变类型MDR基因均展现出良好的特异性,其检测3d的区别因子达到24.1,平均区别因子达到11.8。在混合人血清中,MDR基因的回收率为99.0%~101.7%。此外,本方法通用性好,不需要重新设计S1和S2即可实现对miR-21的特异性检测。

摘要：目的通过对葡激酶(SAK)基因序列进行定点突变、表达、纯化与进行聚乙二醇修饰以获得较高纯度的聚乙二醇化葡激酶(peg-SAK-cys),并对其溶栓活性与免疫原性初步进行验证。方法根据SAK蛋白晶体结构及抗原位点选择突变位点,设计引物将所选的氨基酸突变为半胱氨酸。将突变质粒通过化学转化进入BL21(DE3)感受态,并利用经典原核表达技术,在大肠杆菌中表达突变葡激酶(SAK-cys)。利用镍离子交换柱、分子筛等方法分离纯化目的蛋白。用纤维蛋白平板溶圈法和血栓弹力图初步对其生物活性进行验证。以酶联免疫吸附(ELISA)法评价peg-SAK-cys的免疫原性。结果成功获得了SAK-cys质粒,表达、纯化了突变蛋白,并进行聚乙二醇修饰获得了peg-SAK-cys,分离纯化后纯度在总蛋白质量的90%以上。计算其溶圈实验结果,活性为8.2×10~4IU·mg^(-1);血栓弹力图实验结果提示其具有较高的溶栓活性;免疫原性测定结果提示peg-SAK-cys免疫原性低于野生型SAK(P=0.000 2)。结论通过位点特异性特变与聚乙二醇修饰技术的联合运用可以成功改造出有较低免疫原性的活性SAK。

摘要：目的以二聚体突变荧光引物技术为基础建立对沙眼衣原体进行定量检测的新方法。方法以沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因构建重组质粒作为DNA标准品,设计二聚体突变荧光引物,优化定量PCR体系并进行性能评价;同时对148例临床生殖道标本进行检测。结果建立的二聚体突变荧光引物的定量PCR方法,其线性范围为101～109 copies/μL,灵敏度为10 copies/μL;低浓度样品的批内变异系数(CV)为4.71%,批间CV为5.57%;高浓度样品的批内CV为3.20%,批间CV为3.66%;常见生殖道病原菌检测结果均为阴性;对确诊的148例患者标本检测准确率为99.32%。结论建立的沙眼衣原体定量PCR检测方法具有快速、准确、结果可靠等特点,可为沙眼衣原体感染的诊断、治疗监测和流行病学调查提供较好的技术支持。

摘要：目的比较两种中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）抑制剂GW311616A和西维来司钠（sive—lestat）对U937细胞增殖和调亡的影响。方法采用四唑蓝比色试验（MTT）检测细胞增殖抑制率；用透射电镜观察细胞形态学变化；用流式细胞术检测细胞凋亡[膜联蛋白V／碘化丙锭（AnnexinV／PI）双标记法]及细胞周期变化；应用间接免疫荧光法观察细胞内NE表达水平；同时利用ELISA法和比色法检测细胞内NE含量和活性的变化。使用SPSS13．0软件对所得数据进行统计分析，采用完全随机设计资料的方差分析和Dunnett—t检验对各处理组数据进行比较。结果MTr法检测结果显示两种药物均能抑制U937细胞的增殖，且具有一定的剂量依赖效应，GW311616A和西维来司钠的Ic50值分别为150、214μmol／L。GW311616A对U937细胞的增殖抑制作用高于西维来司钠（P〈0．01）；电镜结果显示两种药物处理的U937细胞均能看到典型的细胞凋亡形态；AnnexinV／PI双标记法结果表明两种药物均能引起U937细胞的早期凋亡，GW311616A（150μmol／L）组的凋亡率为13．60％，西维来司钠组（150μmol／L）为3．69％，GW311616A对其凋亡的影响比西维来司钠更明显（P〈0．01）；流式细胞术检测结果显示GW311616A（150μmol／L）组的凋亡率为14．61％，细胞周期主要阻滞于G2／M期，西维来司钠（150μmol／L）组的凋亡率为4．25％，细胞周期主要阻滞于S期；间接免疫荧光法检测结果显示GW311616A组荧光强度明显减弱，而西维来司钠组荧光强度未明显减弱；ELISA和比色法结果显示两种药物均能使U937细胞内NE含量和活性降低，但GW311616A对他们的影响大于西维来司钠（P〈0．01）。结论GW311616A和西维来司钠均能抑制U937细胞的增殖，引起其凋亡，但前者比后者更有效，更能造成细胞的损伤。

摘要：为了探讨抑制人胃癌细胞核糖核酸酶Ⅲ家族成员Drosha蛋白的表达对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其与转染效率浓度梯度依赖的关系,本研究通过质粒构建的方法,采用Crispr-Cas9基因编辑网站设计针对敲除人Drosha基因的单guide RNA (gRNA)序列;利用转染试剂Lipo2000浓度梯度(2μL, 3μL, 5μL)依赖的方式将单g RNA质粒及阴性对照转染入胃癌HGC-27细胞中;利用实时荧光定量PCR (qPCR)检测阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的Drosha基因表达情况;利用蛋白质免疫印记Western blotting检测不同浓度处理组Drosha蛋白的表达情况;采用CCK8法检测阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的增殖能力;采用Wound healing实验比较阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的迁移能力;利用Transwell TM实验比较阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的侵袭能力。成功设计针对敲除人Drosha基因的单Guide RNA (gRNA)序列;与对照组相比,实验组成功抑制了人胃癌HGC-27细胞Drosha的基因及蛋白表达,增殖能力无明显改变(p>0.05),但是抑制了人胃癌细胞HGC-27的迁移和侵袭能力(p<0.05),其中当Lipo2000浓度为3μL时,转染效率最高,迁移和侵袭抑制率也最明显。表明了抑制Drosha基因在人胃癌HGC-27细胞中的表达量,可以以Drosha表达量依赖的方式抑制细胞的迁移和侵袭。本研究有助于为胃癌的早期诊断和与治疗提供新的分子靶标。