摘要：人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)16型E6原癌蛋白作为抗原，能诱发机体产生细胞免疫和体液免疫，是宫颈癌治疗性疫苗研究的热点［1］。我们用PCR方法从重庆宫颈癌组织中扩增出HPV16 E6基因，并在HeLa细胞中成功表达E6原癌蛋白，为宫颈癌治疗性核酸疫苗的研究打下了基础。1　资料与方法1.1　资料1.1.1宫颈癌活检组织　　取自重庆医科大学附属第二医院门诊患者。病理诊断为宫颈鳞状细胞癌。组织离体后迅速投入液氮，-70℃冷冻保存。1.1.2　引物　　根据标准株［2］序列设计，上下游引物是5’TTGAAGCTTATGCACCAAAAGAGAACTGCAATG 3’和5’CATTCTAGATTACAGCTGGGTTTCTCTACGTG 3’，分别有HindⅢ，XbaⅠ酶切位点。由上海生工生物工程公司合成。

摘要：背景:陡脉冲可使肿瘤细胞膜发生不可逆性电击穿导致细胞死亡,目前已在细胞实验和体外实验中证明了陡脉冲杀伤肿瘤细胞的可行性。目的:基于陡脉冲理论,观察脉冲作用前后作用区域的即刻温度变化,以及陡脉冲作用后肿瘤组织的病理学变化变化,以验证陡脉冲电场的生物学效应。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-05/2008-03在重庆医科大学医学超声工程研究所完成。材料:新西兰大白兔30只,建立VX2移植性肝癌模型。VX2瘤株由重庆医科大学超声研究所提供,陡脉冲治疗仪由重庆大学输配电装备及系统安全与新技术国家重点实验室自行设计。方法:将模型兔根据施加电压不同随机分为500,600,700,800V电压组,每组6只,给予组合脉冲处理。电压分别500600,700,800V,脉宽均为10μs,频率为20Hz,持续10min。并设空白对照组,仅插入电极而不开通电源,不予脉冲处理。主要观察指标:监测陡脉冲作用前后同一部位肿瘤组织的温度变化;取作用后肿瘤组织送光镜、电镜检查。结果:30只兔均进入结果分析。陡脉冲电场覆盖区组织温度升高不明显,脉冲作用前后温度变化无统计学差别(P>0.05)。苏木精-伊红染色显示脉冲作用活体兔肝VX2肿瘤组织后引起肿瘤组织凝固性坏死,电镜显示肿瘤细胞受到不可逆性损伤结论:陡脉冲可致肿瘤细胞发生不可逆性损伤,其对组织的损伤是一种非热效应,并非传统意义上的热疗。

摘要：目的:探讨从孕妇外周血细胞中检测胎儿基因组和血浆中捕获胎儿游离核酸方法的实用性。DNA方法:在基SRY因高保守区设计两对性别特异性引物,利用巢式聚合酶链反应分别对例孕妇外周血胎儿基因组和血浆中游(nest-PCR)50DNA离核酸进行特异性扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,测序验证扩增产物的准确性。(PAGE)DNA结果:名孕妇中名分娩男5028婴,名分娩女婴。基因片段阳性检出率:基因组为();游离核酸组为()。名分娩女婴者除例22SRY75%21/2832%9/28221基因组检测结果阳性外,其余均为阴性结果。本研究检测系统灵敏度为52.8pg/μ。l结论:孕妇外周血中胎儿基因组和游DNA核酸检测可作为产前基因诊断的途径,两者联合应用有助于提高胎儿遗传信息的检出率。

摘要：目的 构建针对多药耐药基因(mdrl)编码区的发夹状RNA重组质粒载体pshRNA-mdrl,并行序列分析,为下一步逆转肿瘤的多药耐药性打下基础。方法 设计含19-21bp mdrl编码基因片段及中间以4个bp间隔的反向重复序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体pTZU6+1上,转化JM109茵株,提取重组质粒酶切鉴定并序列分析。结果 将合成的DNA片段成功克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的序列。结论 靶向mdrl基因发夹状RNA干扰重组质粒的成功构建,可进一步研究其对mdrl mRNA转录的抑制,达到逆转肿瘤的多药耐药性的目的。