摘要：目的:探讨干扰肺腺癌SPC-A-1细胞中Skp2(S-phase kinase associated protein,Skp 2)基因的发夹结构RNA(smallhairpin RNA,shRNA)对肺癌细胞Skp2和p27基因表达的影响及对细胞生长的影响。方法:设计、合成特异性的shRNA序列并与pGenesil-1质粒载体连接转染SPC-A-1细胞,经过稳定筛选后的肺癌细胞,通过RT-PCR和Western印迹法分别检测细胞内Skp2、p27 mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞生长情况并绘制生长曲线。结果:在转染干扰RNA后SPC-A-1细胞内的Skp2 mRNA及蛋白表达下降明显,而p27蛋白水平却明显上升,这与抑制了Skp2表达导致p27降解减少有关。生长曲线表明细胞生长受到了抑制。结论:成功构建了针对Skp2基因的shRNA真核表达载体,能有效抑制肺癌细胞生长,并使得Skp2基因表达下降,p27基因的表达增多,为肺癌细胞的基因治疗提供了实验依据。

摘要：目的评价主动呼吸循环技术(ACBT)对急性加重期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的干预效果。方法根据日排痰量将70例急性加重期COPD患者分为多痰组和少痰组,每组35例。所有患者均给予ACBT干预(ACBT、体位引流)和常规干预(呼吸科常规护理),采用自身配对设计,密闭信封法确定两种方法的随机干预顺序,观察排痰量、血氧饱和度(SpO2)和心率的变化。结果在多痰组,与呼吸科常规干预比较,ACBT干预使患者干预期间和干预后1 h的排痰量显著增加,干预期间SpO2无明显变化,心率明显降低。在少痰组,与呼吸科常规干预比较,ACBT干预使患者1 d的排痰总量显著增加,干预期间和干预后1 h排痰量则无明显变化,干预期间SpO2和心率明显改善。两组患者经ACBT干预后均未发生严重不良反应。结论 ACBT干预对急性加重期COPD患者有一定的短期排痰和呼吸锻炼效果,且无明显不良反应。

摘要：目的探讨丹参素抗肝纤维化作用的机制。方法分离大鼠原代肝星状细胞（HSC），用0．0312、0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000mmol／L不同浓度丹参素作用于HSC，四甲基偶氮唑盐法检测丹参素对HSC生长增殖的抑制作用；应用免疫细胞化学法观察Ⅰ型胶原合成，酶联免疫吸附法观察Ⅰ型胶原分泌。Westernblot法观察丹参素对白细胞介素-1β（IL-1β）刺激的HSC内氨基末端蛋白激酶（JNK）蛋白及其磷酸化表达的影响。采用随机设计的方差分析，SNK-q进行统计学处理。结果与0mmol／L组比较，丹参素其他浓度组明显抑制了HSC增殖，并呈剂量依赖性。丹参素（0．0625～0．2500retool／L）对IL-1β引起的HSC增殖具有明显的抑制作用，并呈剂量依赖性。0．25mmol／L丹参素对正常培养的和经IL-1β刺激的HSC作用24h能下调Ⅰ型胶原的合成和分泌。IL-1β能刺激HSC中P-JNK的明显表达，丹参素能下调IL-1β诱导的HSC中P-JNK的表达，但其对JNK表达水平没有明显影响。结论丹参素可抑制正常传代培养的和经IL-1β刺激的大鼠HSC增殖、Ⅰ型胶原合成与分泌，其机制可能与抑制JNK信号转导通路有关。

摘要：聚焦超声技术起源于20世纪40年代，在20世纪50年代，有学者设计制造了最早的聚焦超声治疗设备，并成功地进行了动物大脑深部损伤的实验。由于缺乏精确定位和监控技术，聚焦超声技术没有得到广泛应用。20世纪70年代以来，随着B超、CT、MRI等对医学有着深刻影响的影像学技术的出现，不但为临床诊断提供了更多、更有力的诊断依据，也使临床治疗中的精确定位和监控成为可能。伴随着医学理论和医学技术的不断进步，聚焦超声技术最终在20世纪90年代成功地应用于临床。

摘要：目的 探讨p38MAPK磷酸化对HepG2细胞耐药的影响及其意义.方法 采用浓度递增法,建立动态HepG2/顺铂（CDDP）耐药模型,Western blot检测磷酸化p38的表达;予以p38MAPK特异性抑制剂SB203580分别处理24、48、72 h后,流式细胞仪动态分析HepG2/CDDP耐药细胞周期、四甲基偶氮唑盐法检测顺铂对HepG2/CDDP耐药细胞的半数药物抑制浓度（IC50）、Western blot检测HepG2/CDDP耐药细胞凋亡分子Bcl-2、Bax及P-gp蛋白的表达.动态耐药模型磷酸化P38的检测行单因素方差分析; SB203580处理后计量资料行3×3析因设计方差分析,率的比较采用x2检验.结果 成功建立HepG2/CDDP耐药细胞株,其对CDDP的IG50值与对照HepG2细胞差异具有统计学意义（t=99.30,P〈0.01）;随着HepG2/CDDP耐药细胞株耐药表型的增强,P38MAPK活化水平逐渐增强（F=69.39,P〈0.01）.P38MAPK特异性抑制剂SB203580可逐渐降低HepG2/CDDP对顺铂的IC50值（F=2350,P〈0.01）、G0/Gl期细胞比例（x2=520,P〈0.01）、Bcl-2/Bax表达比值（F=83.8,P〈0.01）及细胞膜药物转运相关蛋白P-gP的表达（F=107,P〈0.01）.结论 P38活化水平随着肝癌耐药细胞株耐药表型的增强而逐渐升高;抑制P38的活化可有效逆转肝癌HepG2/CDDP耐药细胞株的耐药性.

摘要：目的研究低氧对L02细胞脂质代谢的影响及其可能的机制。方法以正常人肝细胞株L02细胞为研究靶细胞，对照组和低氧处理组细胞分别在21％和1％氧浓度下培养。油红O染色、甘油三酯（TG）测定检测肝细胞脂肪变程度；RT-PCR法检测细胞内低氧诱导因子（HIF）2α、固醇调节元件结合蛋白（SREBP）-1c mRNA的表达情况；Western blot法检测HIF-2α亚基、脂肪分化相关蛋白（ADRP）、脂肪酸合成酶（FAS）蛋白的表达量。各组甘油三酯测定值行2×3的析因设计方差分析，两样本均数间比较采用t检验，其他多个样本均数的比较采用单因素方差分析与Newman-Keuls法检验。结果与对照组比较，低氧组L02细胞内出现脂质沉积，TG含量增多，且随低氧处理时间延长逐渐增多（F=115．04，P〈0．01）。低氧12、24、48h组SREBP—1c mRNA表达水平较对照组下调（0．236±0．043、0．287±0．044、0．342±0．049与0．503±0．037，F=28．37，P〈0．01），FAS蛋白表达水平较对照组下调（0．562±0．054、0．674±0．062、0．682±0．057与0．857±0．069，F=16．08，P〈0．01）。对照组未检测到HIF-20L表达，而低氧处理3h后HIF-2α蛋白表达逐渐增加，6h后达高峰，12、24h又逐渐降低，各时间点分别为0．609±0．031、0．973±0．067、0．792±0．056、0．437±0．038（，=85．30，P〈0．01）；低氧12、24、48h各组ADRP蛋白相对含量分别为0．319±0．043、0．732±0．056、0．873±0．066，均明显高于对照组0．211±0．019（P值均〈0．05），且随低氧时间延长，表达量逐渐增多（F=167．49，P〈0．01）。结论低氧通过HIF-2α-ADRP途径诱导肝细胞脂肪沉积。

摘要：目的:观察局部氧疗联合封闭负压引流干预促进豚鼠Ⅲ期压疮创面愈合的疗效,并优化其工作参数。方法:实验分疗效对比实验和参数优化实验两部分。疗效对比实验:选取20只清洁级雄性白色豚鼠,在左侧大转子处构建Ⅲ期压疮创面。20个创面随机分为五组:A组(持续-125mmHg负压治疗320min后给予5L/min的局部氧疗160min)、B组(-125mmHg负压治疗40min,5L/min的局部氧疗20min,交替8次)、C组(-125mmHg负压治疗40min后暂停20min,重复8次)、D组(5L/min的局部氧疗20min后暂停40min,重复8次)、E组(对照组)。在创面形成第0、1、3、7、11测量创面面积,计算创面面积收缩率。参数优化实验:构建23只Ⅲ期压疮豚鼠模型,采用均匀实验设计和多元回归分析,考察局部氧疗联合封闭负压引流干预方法的负压强度、氧流量、一小时内局部氧疗的工作时间和干预频次对日平均创面面积收缩率的影响。结果:在相同时相点,局部氧疗和封闭负压引流联合干预组创面面积收缩率均高于单纯负压、氧疗或空白组(P<0.001),且交替运行方式优于序贯运行方式。最优工作参数为干预频次12次/日、一小时内局部氧疗干预时间50min、封闭负压引流负压强度-125mmHg和局部氧疗氧流量10L/min。结论:局部氧疗和封闭负压引流联合干预方法能显著促进豚鼠Ⅲ期压疮创面愈合。均匀设计和回归模型可以对实验结果进行高精度预测,优化了工作参数。

摘要：肝纤维化程度的判断对于监测肝脏疾病的进展和监控药物疗效具有重要意义。作为肝纤维化分期金标准的肝活检因为有创操作,临床上不能广泛开展。而超声作为一种无创性的影像学技术,越来越多地被用于评价肝纤维化程度。本文对瞬时弹性成像技术、实时组织弹性成像技术、声脉冲辐射力弹性成像技术、实时剪切波弹性成像、组织结构声学定量技术,用于无创定量评估肝纤维化程度的研究进展进行综述。

摘要：近来，乙型肝炎抗病毒治疗的原则已为广大临床医生所接受。目前治疗原则是基于丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性和乙型肝炎病毒（HBV）DNA水平所制订，其目的是降低或抑制病毒DNA，从而达到防止疾病进展的作用。在这一原则和目标中，治疗必然是长期的，但治疗对象的选择、终点的确定、耐药株的产生和处理，以及有无预测治疗效果的时间点等诸多现实和重要的问题是临床实践中必需回答的。

摘要：目的探讨经会阴二维超声在女性压力性尿失禁(FSUI)的诊断、临床分型及病因鉴定中的临床应用价值。方法对77例FSUI患者(病例组)和41名健康体检女性(对照组)行经会阴二维超声,观察静息和瓦氏动作后膀胱颈、膀胱后角及近端尿道的动态变化、静息时膀胱颈有无漏斗形成、是否合并膀胱膨出及子宫脱垂情况,并进行比较分析。结果病例组静息和瓦氏动作后膀胱颈y轴位移(Δy)、静息时膀胱后角(α)、瓦氏动作后膀胱后角及近端尿道旋转度大于对照组(P均0.05)。结论经会阴二维超声可实时动态显示盆底组织结构,可对FSUI的临床分型及病因鉴定提供丰富的影像学信息,在FSUI的诊断、治疗及预后判断方面均有具重要意义。