摘要：目的　设计、制作可产生气道振荡的小型装置 ,并在体检测其对气道滞留物消除的影响。方法　利用空气动力学原理 ,通过调节呼气附加装置出气口角度、大小及盖口钢珠重量等方法 ,控制装置的频响范围 ,并应用于人体测试 ,呼吸道主要部位放置压力感受器 ,傅立叶分析方法分析共振频率和振幅。采用同位素标记气溶胶吸入后γ照像的方法 ,观察该装置对气道滞留物消除过程的影响。结果　该装置自身的频响范围为每秒 10～ 2 0次 ,应用于人体测得呼吸道从口咽部至肺叶支气管开口处的共振频率为每秒 13～ 14次 ,呼气时气道压力为 18～ 2 3cmH2 O ,压力振荡幅度为 1～ 2 .3cmH2 O。使用该装置可明显缩短气道内放射性气溶胶的半数消除时间。结论　该小型呼气附加装置的使用 ,可增加气道壁的震荡 ,改善气流特点 ,促进气道滞留物的消除 ,可望成为慢性阻塞性肺疾患 (COPD)气道粘液高分泌患者方便。

摘要：目的采用二次文献分析法系统评价圆锥角膜发生的危险因素。方法检索Cochrane图书馆、PubMed、Embase数据库、中国知网、万方数据和维普中文科技期刊全文数据库自2000年1月起至2021年5月发表的与圆锥角膜发生和进展有关的高质量分析性研究设计文献,提取有效数据,采用纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)对检索的病例对照和队列研究文献质量进行评价。分类指标的合并效应量采用比值比(OR)及其95%置信区间(CI),以Q检验和I^(2)检验评价文献中各结局指标的异质性,异质性分析P>0.1或I^(2)≤50%者采用固定效应模型进行分析;I^(2)>50%者采用随机效应模型并谨慎解释研究结果。采用亚组分析及敏感性分析法分析文献中评估指标的异质性来源。采用Egger检验、Harbord检验、Peters检验及漏斗图综合评价发表偏倚。结果共纳入21篇文献,包括病例对照研究18篇和队列研究3篇,研究资料来自10个国家,纳入圆锥角膜病例共30124例,对照者59012例,NOS评分均≥7分。Meta分析结果显示,家族史(OR:8.68,95%CI:6.30~11.97)、揉眼(OR:4.62,95%CI:3.75~5.70)、变态反应(OR:2.34,95%CI:1.73~3.16)、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OR:1.53,95%CI:1.12~2.10)和唐氏综合征(OR:7.09,95%CI:4.19~11.99)是圆锥角膜的危险因素,糖尿病(OR:0.63,95%CI:0.50~0.79)为圆锥角膜的保护因素,二尖瓣脱垂非圆锥角膜的危险因素(P>0.05)。亚组分析结果显示,变态反应的异质性部分来源于具体疾病分类,糖尿病和阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的异质性全部由病例来源产生;敏感性分析显示,改变分析模型后结果稳健。所纳入的文献间均无发表偏倚。结论家族史、揉眼、变态反应、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征和唐氏综合征为圆锥角膜的危险因素,糖尿病为圆锥角膜的保护因素。

摘要：目的:以纯化的有高度特异性的IXiao3G6单抗为靶分子,对噬菌体随机7肽库进行淘筛,以期筛选到与O1群小川型霍乱弧菌单抗有高亲和力的模拟肽,为基于表位的霍乱弧菌模拟多肽疫苗的研制奠定基础。方法:运用噬菌体随机7肽库技术,以纯化的IXiao3G6单抗为靶蛋白,进行噬菌体随机肽库3轮筛选,以双抗夹心ELISA和竞争抑制实验分析获得的噬菌体短肽与筛选配基的结合能力及特异性,并进行阳性克隆序列测定和同源性分析。结果:3轮筛选后,阳性噬菌体得到有效富集,夹心ELISA检测随机挑取的25个噬菌体克隆,有22个噬菌体克隆为阳性,测序表明其中20个阳性克隆的氨基酸序列完全一致,均为APAIPAS。对该序列同源性分析,未发现有相同的已知序列。竞争抑制实验表明,O1群小川型霍乱弧菌脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)能很好地抑制阳性克隆与IXiao3G6McAb的结合,抑制程度随LPS浓度的升高而增加,而对照细菌的LPS则不具有相应的抑制作用,进一步提示噬菌体克隆展示肽模拟了O1群小川型霍乱弧菌LPS抗原表位。结论:筛选到模拟O1群小川型霍乱弧菌LPS的抗原表位的模拟肽,为基于表位的霍乱弧菌模拟多肽疫苗的开发与设计提供了实验依据。

摘要：背景:通过母体给药治疗虽可部分改善妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇的临床症状、延长孕周,但不能明确改善胎儿缺氧及羊水粪染的情况。目的:采用药物配置人工羊水来置换妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠模型的高胆汁酸羊水,观察孕鼠子宫内环境的变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/09在重庆医科大学动物实验中心实验室(一级实验室)完成。材料:孕15dSD雌鼠40只,随机数字表法分为4组:S-腺苷基-L-蛋氨酸(S-Adenosyl-L-methionine,SAMe)羊膜腔内注射组、生理盐水羊膜腔内注射组、SAMe静脉注射组、空白对照组,每组10只。方法:4组于孕15d起每天用苯甲酸雌二醇诱导妊娠期肝内胆汁淤积症模型。孕17dSAMe羊膜腔内注射组和生理盐水羊膜腔内注射组分别予各胎囊内注射SAMe1mg和9g/L氯化钠液0.3mL,SAMe静脉注射组尾静脉注射SAMe30mg,空白对照组不予特殊处理。主要观察指标:各组于妊娠第20天计算羊水粪染率、死胎率,测定羊水中总胆汁酸水平,采用免疫组织化学染色技术分析胎盘中缺氧诱导因子1α表达的变化,并用RT-PCR方法检测胎盘中缺氧诱导因子1αmRNA的表达。结果:各实验处理组羊水粪染率较空白对照组低(P<0.05);羊膜腔内给药组羊水粪染率较尾静脉注射组低(P<0.05);生理盐水羊膜腔内注射组与SAMe羊膜腔内注射组羊水粪染率差异无显著性意义。羊膜腔内注射组死胎率较SAMe静脉注射组、空白对照组低(P<0.05);SAMe静脉注射组与空白对照组、生理盐水羊膜腔内注射组与SAMe羊膜腔内注射组死胎率差异无显著性意义。各实验组羊水胆汁酸浓度较空白对照组显著降低(P<0.01);羊膜腔内注射组羊水胆汁酸浓度较SAMe静脉注射组低(P<0.01);SAMe羊膜腔内注射组羊水胆汁酸浓度显著低于生理盐水羊膜腔内注射组(P<0.01)。SAMe羊膜腔内注射组和生理盐水羊膜腔内注射组胎盘上缺氧诱导因子1α及缺氧诱导因子1αmRNA表达均显著低于SAMe静脉注射组和空白对照组(P<0.01);SAMe羊膜腔内注射组缺氧诱导因子1α及缺氧诱导因子1αmRNA表达水平较生理盐水羊膜腔内注射组低(P<0.01)。结论:药物配置人工羊水置换治疗妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠能更显著改善胎鼠宫内缺氧情况,减少死胎发生。

摘要：目的构建Skp2基因的RNAi真核表达质粒,观察其对SPC-A-1肺癌细胞内Skp2基因表达及细胞生长的影响。方法根据GenBank中Skp2cDNA序列设计针对Skp2基因的shRNA序列,合成序列并克隆入pGenSil-1质粒中,构建Skp2 pshRNA重组质粒。脂质体介导重组质粒转染SPC-A-1肺癌细胞。RT-PCR检测肺癌细胞Skp2 mRNA的表达,Western blot检测Skp2蛋白表达。MTT检测各组细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期改变。结果重组质粒经酶切鉴定和测序,证实表达干扰质粒构建成功。转染重组质粒的肺癌细胞Skp2 mRNA和蛋白的表达明显下降(P<0.05),细胞生长增殖受到抑制,阻滞在G0/G1期的细胞比例增加,而进入S期的细胞比例明显下降(P<0.05)。结论构建的Skp2 shRNA表达质粒能有效下调Skp2基因的mRNA及蛋白的表达、抑制细胞的生长增殖。

摘要：目的:调查医护人员对肝硬化隐匿型肝性脑病筛查的认知、态度及筛查现状,旨在为制定隐匿型肝性脑病管理方案提供参考。方法:采用方便抽样法,抽取重庆市7所三级医院、5所二级医院的1039名医护人员为研究对象,采用自行设计的肝硬化隐匿型肝性脑病认知及筛查现状调查问卷进行调查。结果:医护人员对肝硬化病人隐匿型肝性脑病认知和态度得分分别为(2.15±1.11)分、(20.41±2.56)分,不同科室、职业、职称、学历、工作年限、医院等级以及是否接受过相关健康教育对隐匿型肝性脑病筛查的认知和态度得分比较差异均有统计学意义(P<0.001);医生和护士认知及态度各条目得分比较差异有统计学意义(P<0.05);79.9%的医护人员表示未对肝硬化病人实施过隐匿性肝性脑病的筛查,未筛查最常见的原因为缺乏教育和培训。结论:重庆市医护人员对肝硬化隐匿型肝性脑病筛查态度积极,但认知和临床实践水平仍需提高,各医院应强化医护人员对相关知识的掌握,重视对隐匿型肝性脑病筛查管理,以有效预防肝性脑病的发生。

摘要：目的观察侧脑室注射NEP1-40对脑缺血再灌注大鼠轴突再生、患肢功能恢复和RhoA信号通路活动的影响,探讨其可能的机制。方法将60只成年雄性SD大鼠分为假手术组、脑缺血对照组、侧脑室注射PBS组和侧脑室注射NEP1-40组;采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型;用Western blot方法检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白(GAP-43)和RhoA蛋白表达;用Montoya设计的"楼梯测试"方法对患肢运动功能进行测试。结果①侧脑室注射NEP1-40组大鼠缺血灶周边脑组织GAP-43在术后7d和14d均高于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组,以术后7d最显著。②侧脑室注射NEP1-40组大鼠缺血灶周边脑组织RhoA在术后各时相点显著低于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组。③侧脑室注射NEP1-40组大鼠在术后各时相点"楼梯测试"结果显著高于脑缺血对照组和侧脑室注射PBS组。结论NEP1-40能够促进脑缺血再灌注大鼠损伤后轴突再生和运动功能恢复,其机制可能与抑制RhoA信号通路活动有关。

摘要：目的构建SREBP-1c基因的miRNA真核表达载体,观察其对内质网应激状态下L02和HepG2肝细胞脂质沉积的影响。方法设计并构建SREBP-1c基因的3个miRNA干扰载体,经测序鉴定miRNA载体构建成功后转染肝细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。Western blot检测转染后SREBP-1c的表达;甘油三酯测定和油红O染色检测细胞内脂质沉积;Western blot检测SREBP-1c下游脂代谢相关基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC1)的表达。结果靶向干扰SREBP-1c的miRNA真核表达载体构建成功。Westernblot结果显示,转染SREBP-1c-1miRNA和SREBP-1c-3miRNA载体后,L02和HepG2细胞内SREBP-1c蛋白水平表达均明显减低(P<0.05),SREBP-1c-1miRNA的干扰效果最好(P<0.05)。与对照组相比,转染SREBP-1c-1miRNA载体后L02和HepG2肝细胞内甘油三酯含量均明显降低(P<0.05),细胞内脂滴明显减少;FAS和ACC1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论 SREBP-1c基因沉默通过FAS/ACC1降低了内质网应激状态下肝细胞脂质合成。

摘要：目的利于64排螺旋CT确定横窦和乙状窦的体表定位,评价采用上项线和颧弓-枕外隆突连线作为横窦标志的准确性,为横窦区入路相关手术的骨窗定位提供解剖学基础。方法回顾性重建100例进行过64排螺旋CT头部CTA检查患者的横窦和乙状窦影像,对比观察体表骨性标志与静脉窦的位置关系,确定横窦的体表定位。结果星点主要位于横窦和乙状窦连接部的横窦侧;星点位于横窦和乙状窦连接部前上方占4%,星点恰好位于连接部占81%,星点位于连接部后下方占15%。颧弓-枕外隆突连线和上项线走行不完全一致,它们与横窦的关系多样;上项线与横窦走行不一致;颧弓-枕外隆突连线可作近段横窦的定位标志,但是随着它们向外移行,颧弓-枕外隆突连线则主要位于横窦下方,并且它们的距离越来越远。结论上项线不能代表颧弓-枕外隆突连线的走行,同时它们都不是定位横窦的可靠标志,64排螺旋CT的头部减影CTA检查可作为常规术前检查来明确个体解剖资料从而定位横窦和乙状窦,以便指导横窦区相关手术入路设计。

摘要：目的探讨Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人肾癌细胞株786-O Livin mRNA及蛋白表达的抑制作用以及对细胞凋亡的影响。方法设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体辅助转染至786-O细胞内。采用RT-PCR检测转染后Livin mRNA的变化,细胞免疫化学、激光扫描共聚焦显微镜观察Livin蛋白在细胞内的分布、转染后表达的变化及细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,激酶法测定Caspase3活性的变化。结果转染Livin ASODN后,RT-PCR显示786-O细胞表达Livin mRNA减少(P<0.01),激光扫描共聚焦显微镜下见细胞表达Livin蛋白减少、细胞形态发生变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率显著增加(P<0.01),Caspase3活性明显增加(P<0.01)。结论Livin ASODN能明显下调786-O细胞Livin基因的表达,诱导细胞凋亡。抑制Caspase3活性是Livin抑制细胞凋亡的途径之一。