摘要：目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)在骨髓间充质干细胞(BMSC)向淋巴管内皮细胞(LEC)分化中的作用. 方法 取第3~5代大鼠BMSC进行实验.(1)取大鼠BMSC,采用随机数字表法(分组方法下同)分为阴性对照组、CD90组、CD44组、CD34组,每组样本数为3,阴性对照组细胞加入磷酸盐缓冲液5μL,余3组细胞分别加入相应抗体5 μL,流式细胞仪检测细胞表面抗原阳性情况.(2)取3个批次大鼠BMSC,均分为空白对照组、VEGF-C组、HGF组、bFGF组、VEGF-C+HGF组、VEGF-C+bFGF组、HGF+bFGF组、VEGF-C+ HGF+ bFGF组,每组样本数为3.空白对照组细胞加入2 mL完全培养基,VEGF-C组细胞中加入2 mL完全培养基和10 μg/mL VEGF-C 10 μL,HGF组细胞加入2 mL完全培养基和10 μg/mL HGF 16 μL,bFGF组细胞加入2 mL完全培养基和1μg/mL bFGF 20 μL,VEGF-C+ HGF组、VEGF-C +bFGF组、HGF+ bFGF组、VEGF-C+ HGF+ bFGF组细胞加入2 mL完全培养基及同前相应浓度和量的诱导因子.培养10d,倒置相差显微镜下观察细胞形态,蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法分别检测淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)、VEGF受体3(VEGFR3)及整合素α9蛋白和mRNA表达.(3)取大鼠BMSC,分为空白对照组、HGF+ VEGF-C+ bFGF组、bFGF+ VEGF-C+HGF组、VEGF-C+ HGF+ bFGF组,每组样本数为3.空白对照组细胞加入2 mL完全培养基;HGF+VEGF-C +bFGF组细胞加入2 mL完全培养基、10 μg/mL HGF 16 μL、10 μg/mL VEGF-C 10μL,6h后加入1 μg/mL bFGF 20 μ***+VEGF-C+HGF组细胞加入2 mL完全培养基以及1μg/mLbFGF 20 μL和10 μg/mL VEGF-C 10 μL,6h后加入10 μg/mL HGF 16 μL;VEGF-C+ HGF+ bFGF组细胞同时加入2 mL完全培养基及同前浓度及量的3种诱导因子.另取2个批次大鼠BMSC,同前进行分组,除将HGF+ VEGF-C+ bFGF组、bFGF+ VEGF-C+ HGF组6h的间隔时间调整为12、24 h外,其余处理方法同前.培养10 d,蛋白质印迹法检测LYVE-1、VEGFR3及整合素α9的蛋白表达.对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验、Bonferroni校正. 结果 (1)阴性对照组、CD90组、CD44组、CD34组细胞表面抗原阳性表达率分别为0.39%、99.84%、99.90%、0.57%.(2)培养10 d,空白对照组、HGF组、bFGF组、HGF+ bFGF组细胞呈长梭形,其余各组细胞呈多边形.(3)培养10d,空白对照组、HGF组、bFGF组、HGF+ bFGF组细胞无LYVE-1、VEGFR3和整合素α9蛋白表达.培养10 d,VEGF-C+ HGF+ bFGF组细胞LYVE-1、VEGFR3和整合素α9的蛋白表达量均明显高于VEGF-C组(t=24.21、11.04、15.43,P<0.01)、VEGF-C+ HGF组(t=10.81、9.93、10.20,P <0.01)、VEGF-C+ bFGF组(t=11.67、6.32、19.00,P<0.01). VEGF-C +HGF组及VEGF-C+bFGF组细胞LYVE-1的蛋白表达量明显高于VEGF-C组(t=8.69、15.20,P<0.01);VEGF-C+bFGF组细胞VEGFR3的蛋白表达量明显高于VEGF-C组及VEGF-C+HGF组(t=8.67、7.21,P<0.01);VEGF-C+ HGF组细胞整合素α9的蛋白表达量明显高于VEGF-C组及VEGF-C+ bFGF组(t=8.80、8.83,P<0.01).(4)培养10d,空白对照组、HGF组、bFGF组、HGF+ bFGF组细胞均无LYVE-1、VEGFR3和整合素α9 mRNA表达.培养10d,VEGF-C组细胞LYVE-1、VEGFR3的mRNA表达量明显低于VEGF-C+ bFGF组、VEGF-C+ HGF+ bFGF组(tLYVE-1=6.22、18.01,tVEGFR3=8.49、15.34,P<0.01),整合素α9的mRNA表达量明显低于VEGF-C+ HGF组、VEGF-C+ HGF+ bFGF组(t=13.24、9.65,P<0.01).VEGF-C+HGF+

摘要：组织扩张是一种自然存在的现象,人体的皮肤在持续承受压力的情况下,会自然的拉伸以及扩张,从而产生额外的皮肤,这些额外的皮肤便是扩张器重建修复的理论基础。组织扩张技术在人体各个部位的重建手术中具有相当重要的价值,尤其在面颈部瘢痕的治疗。相关并发症如下:感染、血肿、血清肿、外露、坏死、移位以及皮瓣回缩等。想要获得良好的美学结果及减少并发症的发生,病人的选择、手术的设计以及技术的把控都不可或缺。

摘要：目的:研究神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)植入皮肤全层缺失后对创面的影响。方法:分离并培养SD大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),将酸性成纤维细胞生长因子(Acidic fibroblast growth factor,a FGF)与DMEM/F12配成最佳诱导浓度80 ng/m L,将BMSCs诱导分化为神经干细胞,DAPI标记。根据实验设计,将54只SD大鼠背部脊柱两侧造模,形成皮肤软组织创面。按随机分为局部注射NSCs(A组)、局部创面注射BMSCs(B组)、局部创面注射等量生理盐水(C组);术后3、7、14 d,分别观察记录创面愈合时间,计算创面的愈合率,同时切取标本,石蜡包埋处理切片,标本组织行HE染色和VG染色反映皮肤创面炎症反应及组织胶原纤维的增生情况。结果:NSCs局部注射移植后可促进神经修复,在实验过程中观察NSCs对创面愈合的影响,A组创面愈合时间短较B、C组明显缩短(F=10.360,P=0.000));痂皮薄,创面稍燥,HE染色镜下观察局部炎症反应轻微,无出血、积脓、坏死;A组愈合率明显高于B组阳性对照组,B组阳性对照组高于生理盐水阴性对照组(F=1.323,P=0.000)。结论:神经干细胞作为种子细胞移植局部皮肤创面后,可修复创面神经,神经分泌的各种神经肽类物质可加速皮肤创面的修复,缩短修复时间,减轻瘢痕。提高患者满意度。