摘要：目的构建结肠癌转移相关基因1(MACC1)RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MB-231,观察其最佳感染条件。方法设计并合成MACC1基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,转化大肠埃希菌DH5a感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MB-231细胞,选择感染效率高、感染复数(MOI)低的感染条件。结果 PCR与测序鉴定证实成功构建了MACC1RNAi的慢病毒载体,可以高效转染MB-231细胞,其最佳感染条件为MOI=40。结论成功构建了MACC1RNAi慢病毒表达载体,其可高效感染MB-231,为进一步研究靶向MACC1RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。