摘要：目的构建1个简单、有效,用于ABO基因分型的AS-PCR体系,及基于AS-PCR体系的PCR测序方法,并将此方案用于1个B亚型家系分析。方法参照ABO血液基因型cDNA的261,297,467和803位点,通过设计针对这些位点的AS-PCR引物构建可用于ABO血液基因型分型的AS-PCR体系,并将该AS-PCR体系应用于1个B亚型家系进行分析,并依据其分析结论设计PCR测序方法,以进行单体型分型。结果该家系成员母亲和两名子女的基因型分别为O01Bw11、O01Bw11和O02Bw11。结论 AS-PCR体系和PCR测序相结合的方案,操作简单、耗时短、结果准确,可用于ABO亚型的基因型分型。

摘要：目的:建立一种快速、准确,并且分析简单的基于STR分型技术的18-三体综合征诊断技术。方法:采用D18S51、D18S386、D18S391、D18S535和D18S1001为多重PCR扩增基因座,设计对应的荧光标记引物用于单管多重STR扩增分析。结果:STR分型结果在判断18-三体综合征中与常规核型分析结论相符。结论:该技术廉价、快速、操作简单,且实验过程无需人为干预,因此用于大规模样本的产前筛查。

摘要：目的建立可用于--THAI型和HPFH-SEA型地中海贫血的基因检测的实验体系。方法设计针对--THAI型和HPFH-SEA型地中海贫血的基因的Gap-PCR引物,经PCR扩增后用琼脂糖凝胶电泳方法进行分析。结果采用所构建的实验体系,可检出--THAI型和HPFH-SEA型基因型。讨论在日常检案中,应密切留意血液学检测与常规地贫基因分型试剂盒分型不一致的情况,避免--THAI型和HPFH-SEA型基因型的漏检。

摘要：目的地中海贫血是一种中国南方沿海地区高发的单基因遗传疾病。由于常用检测试剂盒的检测范围并未囊括--THAI、HPFH-SEA和DBT(中国型缺失,Gγ+(Aγδβ)0)等等位基因,我们需要开发一种可快速诊断这三种等位基因的检测体系。方法针对--THAI、HPFH-SEA和DBT等位基因设计引物,采用溶解曲线法构建检测体系。结果经--THAI、HPFHSEA和DBT等位基因阳性标本验证实验表明,该体系可较好地检出这三种地中海贫血等位基因。结论该体系采用溶解曲线法为基础方法,具有速度快、分型准确和成本低的优点,适合基层应用。

摘要：因夏天暴晒1h的密封车内温度与《GA/T842 2009血液酒精含量的检验方法》中顶空平衡的温度相近,模拟暴晒1h的密封车内温度是否会对试管内溶液的乙醇浓度产生影响。经过长短试管、阶梯温度、水溶液及血液等条件变化进行实验,证明上述提及的温度条件并未产生足以干扰准确度的影响。

摘要：目的建立一种可准确、快速检测沙眼衣原体、单纯疱疹病毒2型、人乳头瘤病毒16型3种病原体DNA的多重荧光定量PCR检测方法。方法本研究针对沙眼衣原体、单纯疱疹病毒2型、人乳头瘤病毒16型分别设计了一对特异性探针引物,构建了可同时检测沙眼衣原体、单纯疱疹病毒2型、人乳头瘤病毒16型的多重荧光PCR反应体系,并与商业试剂同时检测300例临床标本,评估其一致性。结果性能评价结果显示,所建立的多重荧光PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,与对照商业试剂检查结果符合率达到100%。结论所建立的多重荧光PCR检测方法能实现3种病原体的快速、正确定量检测。

摘要：目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR),用于肺炎链球菌检测和流行病学调查。方法以肺炎链球菌自溶素(lyt)和溶血素(ply)的基因为目的序列分别设计引物和探针,将其分别与10株肺炎链球菌、13株非肺炎链球菌DNA以及不同浓度梯度的肺炎链球菌DNA进行荧光定量PCR,并将引物和探针应用于200例临床标本检测,同时通过传统的微生物培养鉴定的方法来验证荧光定量PCR的特异性和敏感性。结果 10株肺炎链球菌均获得了明显的扩增产物,13株非肺炎链球菌DNA无明显的扩增信号,其检测敏感性可达100 fg;200例临床标本,实时荧光定量PCR检测出42例肺炎链球菌阳性(阳性率为21%),而培养法阳性16例(阳性率为8%)。结论实时荧光定量PCR是一种敏感、特异、快速的检测肺炎链球菌方法,可用于肺炎链球菌的诊断和流行病学调查。

摘要：目的利用双色实时荧光定量PCR法进行21-三体与18-三体的快速产前诊断。方法分别以21号的APP基因与18号染色体的TYMS基因为目的基因设计引物和不同荧光标记的Taqman探针,以相对定量指标△CT值判断21号与18号染色体的数目;并将其检测结果与传统染色体核型分析方法进行对比。结果 60例羊水细胞区分出了4例21-三体,3例18三体标本,正常人的△CT值为-0.89±0.22,21-三体患者及18-三体患者的△CT值分别-0.04±0.17和-1.55±0.24,患者与正常人标本组之间无交叉重叠,均有明显差异(P<0.001)。结论实验建立的双重实时荧光定量PCR能用于快速诊断羊水细胞的21-三体和18-三体等非整倍体。

摘要：目的回顾性研究广西8市2010—2018年HIV抗体阳性母亲使用预防艾滋病母婴传播(prevention of mother-to-child transmission of HIV,PMTCT)的抗逆转录病毒药物后对18月龄幼儿身体发育不良的影响,为国家改进PMTCT的用药方案提供依据。方法选取广西8市作为研究现场,按照回顾性病例对照研究设计,病例组为广西8市2010年1月—2018年12月"全国母婴阻断系统数据库"中使用PMTCT药物的HIV抗体阳性母亲及所分娩婴儿,收集分析其使用PMTCT药物的历史卡片和母婴阻断资料及18月龄幼儿体检资料。对照组为相同8市妇幼保健院2018年健康母亲及所分娩婴儿,收集分析其18月龄幼儿体检资料。幼儿身体发育不良定义为身高、体重和头围3项指标中至少1项指标低于正常值范围。结果病例组的HIV抗体阳性母亲及所分娩婴儿使用PMTCT药物率分别为91.38%(2811/3076)和96.41(2954/3064),病例组18月龄幼儿的HIV抗体阳性率为1.21%(37/3064)、死亡率为2.28%(70/3064)、HIV母婴传播率为2.21%。病例组满18月龄健康体检时发现幼儿身体发育不良率为14.57%(301/2066);对照组满18月龄幼儿身体发育不良率为10.39%(563/5419),病例组与对照组差异有统计学意义(P=0.000)。结论广西8市近9年HIV抗体阳性母亲及所分娩婴儿使用PMTCT药物率高,可能导致满18月龄幼儿身体发育不良率较高,应进一步深入研究影响因素。

摘要：目的建立双重实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体和单纯疱疹病毒2型的方法。方法针对沙眼衣原体和单纯疱疹病毒2型基因组保守序列,设计引物和探针,建立双重荧光定量PCR检测方法,评价其敏感性、特异性,并与常规单重荧光PCR方法比较。结果成功建立了双重实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体和单纯疱疹病毒2型的方法,检测限均为1000copies/μL,敏感性和特异性均为100%。应用该方法检测了50份患者标本,与试剂公司提供的单重荧光PCR试剂检测结果一致性为100%。结论该研究建立的快速、准确,可同时检测沙眼衣原体、单纯疱疹病毒2型的双重实时荧光定量PCR法,具有较高的敏感性、特异性和稳定型,操作简单,可用于沙眼衣原体、单纯疱疹病毒2型的临床筛查和诊断。