摘要：【目的】探究酪氨酸酶相关蛋白1b(tyrosinase-related protein 1b,TYRP1b)基因变异与斑马鱼体色性状的相关性。【方法】以体色表型存在显著差异的红色、黄色和蓝色斑马鱼共计219个样本的肌肉组织DNA为模板,设计3对引物,采用PCR扩增、Sanger测序技术筛查TYRP1b基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),并将SNPs与斑马鱼体色性状进行关联分析。【结果】获得的斑马鱼TYRP1b基因外显子2、部分内含子3、外显子4、内含子4、外显子5、内含子5、外显子6和外显子7长度分别为134、212、168、135、180、113、150、171 bp。SNPs筛查显示,3种体色斑马鱼群体共筛查到18个SNPs,部分内含子3存在11个SNPs位点:g.2125G>A、g.2150G>A、g.2152G>T、g.2161C>A、g.2175A>T、g.2180G>T、g.2185A>T、g.2192A>C、g.2200A>T、g.2201A>C和g.2213T>C;内含子4检测到4个SNPs位点:g.7C>A、g.65A>G、g.84T>A和g.103C>T;内含子5存在1个SNPs位点:g.61G>T;外显子4、6分别存在1个SNPs位点:g.125G>T和g.80T>A,且均为同义突变;外显子2、5和7均未检测到SNPs。关联分析表明,TYRP1b基因内含子3中g.2152G>T、g.2175A>T、g.2180T>G、g.2192A>C、g.2200A>T、g.2201A>C位点、内含子4中g.65A>G位点及外显子6中g.80T>A位点的基因型均与斑马鱼体色性状极显著相关(P<0.01)。【结论】斑马鱼TYRP1b基因内含子3、4及外显子6存在8个与体色表型存在关联的SNPs,可能影响斑马鱼体色性状或与之紧密连锁。

摘要：【目的】克隆贵州白山羊肌细胞生成素(myogenin)基因并对其结构特性进行生物信息学分析,为进一步探索该基因调控山羊肌肉发育的分子机制提供重要参考依据。【方法】以贵州白山羊血液基因组DNA为模板,设计4对特异性引物,运用PCR扩增、Sanger直接测序及序列拼接方法获得贵州白山羊myogenin基因完整编码区核苷酸序列,应用BioEdit 7.0、NetPhos 3.1、Conserved Domains Search、SMART、Motif Scan等生物信息学软件分别分析该基因核苷酸与氨基酸序列的组成、编码蛋白磷酸化位点、关键结构域和功能模体等结构特性,通过DNAStar Lasergene、DNAMAN 8.0和Mega 5.0软件分别进行15个偶蹄目物种myogenin基因编码氨基酸序列相似性比对及系统进化树构建。【结果】贵州白山羊myogenin基因序列全长2424 bp(获得GenBank登录号:HZ53289),由3个外显子、2个内含子、部分5′-UTR和3′-UTR构成,长度分别为471、82、122、765、589、135和260 bp,编码区长度为675 bp,共编码224个氨基酸。贵州白山羊myogenin蛋白第1—86位氨基酸为生肌决定因子(myogenic determining factors,MyoD)家族特有碱性结构域(Basic domain),第81—139位氨基酸为螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,H-L-H)结构域,第160—170位氨基酸为低复杂度结构域,存在21个磷酸化位点和核定位信号蛋白等功能模体结构。氨基酸序列比对表明,6个半胱氨酸残基、1个核定位信号和1个低复杂度结构域在15个偶蹄目物种完全保守。myogenin基因编码氨基酸序列相似性与系统进化分析均显示,贵州白山羊与波尔山羊、湖羊和马可波罗盘羊的亲缘关系最近。【结论】本研究成功克隆得到贵州白山羊myogenin基因全长序列,大小为2424 bp,编码224个氨基酸,myogenin蛋白包含Basic domain和H-L-H结构域。该结果可为myogenin基因调控山羊肌肉发育的分子机制研究提供理论参考。

摘要：油茶大小年现象十分普遍,这是造成油茶低产的重要原因之一,长期以来普遍认为养分因素是影响大小年的重要原因之一,为探明和确定施肥对油茶产量大小年及油茶生长相关指标的影响,选择8年生生长势接近的油茶,采用混水平正交试验设计,在油茶不同生长阶段施用有机肥、氮磷钾及其他营养元素,在油茶不同生长周期测定叶片相关指标,在果实收获期测定产量及茶籽相关指标,并比较和分析产量及其他指标变化。结果表明,尿素、硝酸铵对叶片叶绿素SPAD值和氮含量影响极显著,施肥时间对叶片SPAD值影响极显著,硫酸镁对叶片SPAD值影响显著,施用过磷酸钙、钼酸铵和磷酸二氢钾对油茶叶片氮含量影响显著,尿素、硝酸铵、施肥时间对叶片相关指标影响权重最大。施肥时间对产量影响极显著,施硫酸钾和氨基酸对产量影响显著,施硫酸钾对2年平均产量影响极显著,施用氨基酸对2年平均产量影响显著,施硫酸钾对单果质量影响极显著,施过磷酸钙对鲜果出籽率影响显著,硫酸钾、氨基酸、尿素、施肥时间、有机肥对各指标影响权重最大。氨基酸对茶籽含水量和种仁出油率影响显著,硫酸亚铁、氯化钾、硝酸铵、氨基酸、尿素等因素对茶籽相关指标权重最大。施肥时间对油茶开花数量影响极显著,施肥时间对开花影响最大,其次是有机肥、硝酸铵和氨基酸。在11月根施4 kg有机肥,尿素、硫酸钾和过磷酸钙各0.4 kg,以及叶面喷施氨基酸、钼酸、硝酸铵、硫酸亚铁、硼砂和硫酸镁为最佳处理。

摘要：【目的】本研究旨在解析肌细胞生成素(MyoG)基因启动子区序列的结构特性及其转录调控机制。【方法】以贵州白山羊血液基因组DNA为模板,设计2对引物,采用PCR扩增、Sanger测序技术获得MyoG基因启动子区序列,通过DNAStar和Mega 5.0软件分别进行不同物种MyoG基因启动子区序列相似性比对及系统进化树构建,利用生物信息学软件预测分析该序列核心启动子区、转录因子结合位点、顺式作用元件、CpG岛等结构特征。【结果】贵州白山羊MyoG基因启动子区序列长2334 bp,包括2092 bp的5′-侧翼序列和242 bp的外显子1,GC含量略低于AT含量。通过不同物种比对分析,贵州白山羊MyoG基因启动子区序列与绵羊、牛、猪、人、小鼠和鸡同源序列相似性分别为98.34%、96.15%、77.76%、74.15%、57.63%和43.04%。系统进化树结果表明,贵州白山羊与绵羊和牛的亲缘关系较近,与鸡的亲缘关系最远。生物信息学结构预测发现,贵州白山羊MyoG基因转录起始位点位于翻译起始密码子ATG上游50 bp,5′-侧翼区存在1个潜在的启动子区域和1个CpG岛,含有1个TATA-box(TTTAAATG)、1个GC-box(CCGCCC)、2个CAAT-box(CCAAT)、17个E-box(CANNTG)和1个富含A/T碱基的元件结构(TATATTTAT)。AliBaba 2.1、PROMO、Patch 1.0、JASPAR 2022和AnimalTFDB 3.0在线软件综合预测发现,贵州白山羊MyoG基因启动子区存在Sp1、NF-1、MEF2、MyoD、USF、GATA-1、GATA-3、SRF、C/EBP和c-Myb等多种转录因子潜在结合位点。【结论】本研究成功克隆获得贵州白山羊MyoG基因启动子区序列,为深入解析该基因调控山羊肌肉发育的分子机制提供理论依据。

摘要：为获得油茶(Camellia oleifera Abel)的最佳肥料配方,对盛果期油茶林进行不同肥料配方的施用试验,试验选用13个因素各3个水平27个处理的正交试验设计,对9年生油茶林开展不同水平有机肥料及营养元素组配施肥试验研究,在油茶不同生育期分别测定春梢、叶片、开花和2年产量等指标,并分析和比较油茶生长发育和产量相关指标及各养分元素对油茶各项指标影响的权重,据此明确肥料养分配比,以期为油茶高效栽培推荐最佳专用肥配方。结果表明:磷元素对顶梢和一级侧梢影响较大,镁对二级和三级侧梢影响较大,促进春梢生长最佳肥料配方为1.5 kg有机肥中加入0.1 kg尿素、0.05 kg过磷酸钙、0.2 kg氯化钾、62 mg/L硼酸和493 mg/L硫酸镁;有机肥对叶片相关指标影响较大,其次是钾元素,促进叶片生长最佳肥料配方为1.5 kg有机肥中加入0.05 kg尿素、0.2 kg过磷酸钙、0.1 kg氯化钾、4930 mg/L硫酸镁和2.78 mg/L七水硫酸亚铁;磷对开花时间影响最大,其次是钾和氮,最佳肥料配方为0.5 kg有机肥中加入0.2 kg尿素、0.2 kg过磷酸钙、0.2 kg氯化钾、62 mg/L硼酸、4930mg/L硫酸镁、27.8 mg/L七水硫酸亚铁和0.25 mg/L四水钼酸铵;硼元素对当年产量及结果数量影响较大,其次是钾和铁元素;磷元素对下一年产量影响最大,钾元素次之;提高油茶产量最佳肥料配方为1.5 kg有机肥加入0.05 kg尿素、0.2 kg过磷酸钙、0.1 kg氯化钾、62 mg/L硼酸、493 mg/L硫酸镁和2.5 mg/L四水钼酸铵。结合叶片、产量指标和化肥减施及施肥成本等因素,认为在贵州铜仁地区,推荐盛果期油茶肥料配方为每株1.5 kg有机肥配施0.05 kg尿素、0.2kg过磷酸钙、0.1 kg氯化钾、62 mg/L硼酸、4930 mg/L硫酸镁、2.78 mg/L七水硫酸亚铁及0.25 mg/L四水钼酸铵。

摘要：该研究使用正交设计法,以油茶幼胚作为外植体,研究不同品种、不同基本培养基、不同激素种类及浓度、不同培养条件等因素的组合对油茶愈伤组织诱导的影响。结果表明,油茶胚性愈伤组织诱导最佳配方为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L TDZ,诱导率达到100%;单因素对于愈伤组织诱导率具有显著影响为品种>培养基>NAA>TDZ,其他因素对愈伤组织的诱导无显著性影响。

摘要：为了探究坡地油茶(Camellia oleifera Abel.)丰产树形及修剪方法,运用裂区试验设计,选用自然开心形、圆头形、塔形3种树形,进行不同强度的修剪,比较不同树形下的不同修剪强度对油茶果实各项指标和春梢生长的影响。结果表明:修剪树形、修剪强度仅对于油茶产量有显著性差异(P中度修剪>重度修剪,而且轻度修剪对于开花数量的增加也表现出较大的优势。圆头形轻度修剪对于茶果数量、产量及出油率的增长最大,开心形重度修剪对于春梢长度(达18.69cm)和开花数量增长明显,塔形轻度修剪处理种出仁率(56.05%)和茶籽含水率(42.61%)相较于其他处理组高。从经济价值和生产实际应用价值方面来看,圆头形轻度修剪对果经济性状相关指标较其他方式效果较好,而开心形重度修剪可促进开花及春梢长度生长。

摘要：为了探讨泛素结合酶UBE2G2在胞内布鲁氏菌繁殖中的作用,通过分别构建过表达载体和设计合成小干扰RNA(siRNA)对UBE2G2基因进行过表达和沉默;利用MTT比色法检测UBE2G2基因沉默或过表达对细胞活性的影响;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测布鲁氏菌M5-90感染对UBE2G2基因表达的影响;用布鲁氏菌M5-90感染过表达和沉默UBE2G2基因的细胞,利用qRT-PCR检测细胞中CHOP基因表达的变化,利用菌落计数法检测胞内细菌数量的变化,利用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、白介素18(IL-18)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化。结果显示,获得UBE2G2基因的过表达作用的载体pLVX-puro-UBE2G2;筛选出UBE2G2基因的干扰效果最佳片段为UBE2G2-83-siRNA;UBE2G2基因沉默或过表达对细胞活性没有影响;M5-90感染可提高细胞中UBE2G2基因的表达;M5-90感染过表达UBE2G2基因的细胞,可提高细胞中LDH水平和胞内细菌数量并可抑制CHOP的表达、IL-18和IFN-γ的水平;M5-90感染沉默UBE2G2基因的细胞,可提高细胞CHOP的表达、IL-18和IFN-γ的水平并可抑制LDH水平和胞内细菌数量。结果表明,泛素结合酶UBE2G2可调控胞内布鲁氏菌存活。

摘要：该文在分析园林专业植物组织培养课程特点和课程目标的基础上,讨论该课程内容的重组和优化,提出基于OBE理念的教学各环节的设计,合理分配所需理论知识点,实现对专业能力和非专业能力的培养,满足生产企业对专业人才能力的需求。

摘要：以梵净山四级薇菜干为原料,研究超声辅助提取梵净山薇菜多酚最佳工艺条件。在单因素试验的基础上,选择超声温度、超声时间、乙醇体积分数、超声功率为关键因素,以薇菜多酚得率为响应值,设计Box-Behnken响应面法优化其超声提取条件。结果表明:各因素对梵净山薇菜多酚得率的影响程度从大到小依次为料液比﹥乙醇体积分数﹥超声时间﹥超声功率,薇菜多酚的最佳提取工艺参数为料液比1∶30(g/mL)、乙醇体积分数40%、超声功率300 W、超声时间40 min。在此条件下,梵净山薇菜多酚得率预测值为38.5967%,试验测定值为38.57%,与回归方程的理论预测值相吻合。