摘要：本文以灵芝菌为发酵菌种,以果汁pH的变化为主要考察指标,通过单因素实验和正交设计确定北五味子果汁生物降酸的最佳发酵工艺,进而通过测定大鼠酒精肝损伤模型中血清和肝脏组织丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)的活力探究其保肝作用。结果表明,生物降酸的最佳工艺为:一定量的北五味子果汁冻干粉末,加入20倍体积(V/W)的蒸馏水,接种菌龄3 d,接种量6%(V:V),维生素B1浓度10 mg/L,振荡速度190 r/min,发酵时间12 d;发酵后的北五味子果汁pH从1.85升到3.21,滴定酸度从14.9 g/L降到6.9 g/L,果汁中多糖的含量增加了约61.5%,多酚和黄酮的含量分别减少了约64.2%和50.6%。这几种成分的含量变化,可能是果汁生物降酸的主要原因。北五味子果汁经过发酵之后其保肝护肝活性要优于原果汁,因此具有良好的健康饮品开发潜力。

摘要：目的对米泔水制北苍术的最佳炮制工艺进行优化,并对其抗腹泻作用进行研究。方法以单因素试验为基础,结合Box-Behnken设计-响应面法,以苍术素、浸出物和外观性状为综合评价指标,对米泔水用量、闷润时间、炒制温度和炒制时间4个因素进行考察,确定米泔水制北苍术的最佳炮制工艺。建立脾虚泄泻症大鼠模型,比较给药前后大鼠体质量和粪便含水率变化,并采用酶联免疫吸附法测定血清中二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)和分泌型免疫球蛋白(secreted immunoglobulin,SIgA)含量。结果响应面法得出米泔水制北苍术的最佳炮制工艺为米泔水中米水比例为1∶60,米泔水用量25 mL,炒制温度160℃,炒制时间30 min;与模型组比较,高剂量组米泔水制北苍术醇提取物可使脾虚泄泻大鼠的粪便含水率和DAO含量显著降低(P<0.01),体质量和SIgA含量显著增加(P<0.01),且接近阳性药水平;生苍术醇提取物对脾虚泄泻大鼠的粪便含水率、体质量、SIgA和DAO含量改善效果低于米泔水制北苍术(P<0.05、0.01)。结论响应面法简便稳定、准确可靠,可用于优化米泔水制北苍术炮制工艺,且米泔水制北苍术醇提物的抗腹泻作用药效显著。

摘要：目的优化盐关黄柏salt-processed Phellodendri Amurensis Cortex炮制工艺,探讨盐关黄柏化学成分含量变化与色度值的相关性。方法使用Hypers11 BDS C18色谱柱,0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;柱温为25℃;体积流量为1.0 mL/min;检测波长为208 nm;进样量为10μL;采用HPLC法测定盐关黄柏有效成分含量。以盐水量、炒制时间、炒制温度为影响因素,黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、柠檬苦素的含量为评价指标,采用熵权法计算各指标权重,得到综合评分,利用Design-Expert 12.0软件,Box-Behnken设计-响应面法优化炮制工艺,并测定响应面法项下不同工艺参数的17份样品色度值,对其成分与色度值进行Pearson相关性分析及回归分析。结果盐关黄柏最佳炮制工艺为每200 g关黄柏饮片加6.67%盐水60 mL、炒制温度为140℃、炒制时间为30 min。盐关黄柏中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、柠檬苦素含量与色度值L^(*)(代表颜色明、暗)值呈负相关,与色度值a^(*)(代表颜色红、绿色度)、b^(*)(代表颜色黄、蓝色度)值均呈正相关。结论优选的炮制工艺稳定可行,且盐关黄柏化学成分与色度有显著相关性,可通过外观色泽初步评价盐关黄柏的品质,对传统中药炮制工艺及其质量评价研究具有一定的参考价值。

摘要：目的优化三仁颗粒制备工艺,并进行质量控制研究。方法采用HPLC法建立苦杏仁苷、厚朴酚、和厚朴酚的含量测定方法,并以出膏量、苦杏仁苷含量、厚朴酚含量、和厚朴酚含量、50%乙醇浸出物为评价指标,以熵权法分配各指标权重,采用正交试验优选三仁汤最佳提取工艺;以成型率、休止角、堆密度和吸湿率为评价指标,采用星点设计-响应面法优化三仁颗粒最佳成型工艺;建立10批三仁颗粒的指纹图谱并进行相似度分析和共有色谱峰归属鉴定,结合薄层鉴别和含量测定对三仁颗粒进行质量控制。结果以苦杏仁苷、厚朴酚、和厚朴酚的含量作为三仁汤质控标准,测得三仁汤中3种指标性成分的质量分数分别为苦杏仁苷0.536~1.054 mg/g,厚朴酚0.015~0.062 mg/g,和厚朴酚0.013~0.053 mg/g;三仁汤最佳提取工艺为加8倍量水,煎煮2次,每次1 h;三仁颗粒最佳成型工艺为糊精为辅料,药辅比1∶1.5,乙醇体积分数78%,乙醇用量为药粉和辅料总量的21%;建立了苦杏仁、薏苡仁、厚朴的薄层鉴别方法和苦杏仁苷、厚朴酚、和厚朴酚的含量测定方法;建立了10批三仁颗粒的指纹图谱,相似度为0.939~0.999,共指认15个共有峰,1号峰归属于苦杏仁、厚朴,2、7、13号峰归属于豆蔻、厚朴、淡竹叶,3、4、8、9号峰为苦杏仁专属峰,5号峰归属于苦杏仁、豆蔻、厚朴、淡竹叶,6、11、12、14、15号峰为厚朴专属峰,10号峰归属于厚朴、淡竹叶。结论该提取方法有效成分提取率高,稳定可靠;成型工艺方法成型率高,流动性好;质量控制和指纹图谱各检查项方法均稳定可靠,能够为三仁颗粒的质量控制提供参考。

摘要：目的 制备水飞蓟素脂质体(silymarin liposomes,SM-L)并进行质量评价,考察SM-L对人永生化角质形成细胞(human immortal keratinocyte line,HaCaT)增殖和摄取的影响。方法 采用乙醇注入法制备SM-L,以包封率和ζ电位为考察指标,Box-Behnken响应曲面设计实验优化SM-L处方和制备工艺,并对SM-L进行质量评价;采用噻唑蓝(MTT)法考察SM-L对HaCaT细胞增殖的影响,细胞划痕实验考察SM-L对HaCaT细胞水平迁移能力的影响,共聚焦显微镜观察并以流式细胞术考察HaCaT细胞对SM-L的摄取情况。结果 优化的SM-L制备工艺为大豆磷脂、水飞蓟素和胆固醇的质量比为20∶7.94∶6.21,无水乙醇和水的最佳比例为1∶10。SM-L包封率为(85.44±0.87)%,平均粒径为(133.80±2.13)nm,多分散指数为0.134±0.020,ζ电位为(-14.1±0.3)m V,稳定性良好,36 h皮肤透过率为(14.58±6.37)%,皮肤滞留率为(65.80±4.04)%。细胞实验证明一定质量浓度范围的SM-L能促进HaCaT细胞增殖,SM-L相比水飞蓟素对HaCaT细胞的水平迁移促进作用有明显提高,并且SM-L能够有效提高HaCaT细胞对水飞蓟素的摄取。结论 制备所得的SM-L粒径均一,性质稳定,透皮性能好,并且可以促进HaCaT细胞增殖和对水飞蓟素的摄取,有很好的角质修复作用。

摘要：【目的】研究氮磷钾配施对北苍术的产量、苍术素含量及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和基因表达量的影响,探讨氮磷钾配施对北苍术药材产量增加、质量形成的影响及其机制,对提高北苍术药材产量及质量有重要的现实意义。【方法】以一年生北苍术为试验材料,采用L_(9)(3^(4))正交设计,设置10个不同氮、磷、钾用量处理的田间试验,在营养生长期、花期、初果期、盛果期及枯萎期测定北苍术的地上部分、根茎和须根鲜重;采用高效液相色谱法,测定北苍术中苍术素含量;采用双抗体夹心法(ELISA),测定北苍术根茎中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的活性;采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR),测定北苍术关键酶ACC基因的相对表达量;利用Spearman相关性分析,探讨苍术素合成的分子调控机制。【结果】不同氮磷钾肥料配施均能够促进一年生北苍术地上部分以及地下根茎、须根鲜重的增加,其中T3 (N_(1)P_(3)K_(3))和T6 (N_(2)P_(3)K_(1))施肥方案最佳,地上部分鲜重在盛果期分别为对照组的1.52和1.47倍,地下根茎鲜重、须根鲜重在枯萎期分别为对照组的2.08和2.09倍、1.30和1.41倍。T3、T6施肥方案北苍术有效成分苍术素含量在枯萎期较对照组分别提升33%和61%,且根据不同生育期内苍术素的动态积累规律,推测北苍术枯萎期至次年出苗前是苍术素积累的最佳时期。通过相关分析表明,苍术素含量与ACC活性和ACC基因表达量之间的相关系数分别为0.66和0.583,ACC活性与ACC基因表达量相关系数达0.839,均达到极显著正相关(P<0.01)。低、中氮水平下高磷处理提高了关键酶ACC基因的表达量,促进ACC活性提升,并进一步增加苍术素的积累,而高氮、高钾抑制了ACC基因的表达,进而降低苍术素的积累。【结论】高磷有利于北苍术中ACC基因的表达及酶活性的提升,促进苍术素的合成和积累,有利于北苍术的提质增效。北苍术的最佳施肥方案为:氮肥90 kg/hm^(2)、磷肥225 kg/hm^(2)、钾肥315 kg/hm^(2)或氮肥180 kg/hm^(2)、磷肥225 kg/hm^(2)、钾肥105 kg/hm^(2)。

摘要：目的优化马齿苋炭的炮制工艺,并探讨其对痔疮模型大鼠的改善作用。方法采用Box-Behnken设计-响应面法,以鞣质含量、水溶性浸出物含量以及外观性状的综合评分为指标,考察炒制温度、投药量、炒制时间对马齿苋炭炮制工艺的影响,优选出最优工艺参数,并进行验证。以最优炮制工艺制得的马齿苋炭(0.8 g/mL)外敷痔疮模型大鼠,每天给药1次,连续11 d;末次给药后,对大鼠肛周病理情况进行评分,并检测其血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的水平。结果马齿苋炭最优炮制工艺为炒制温度200℃、投药量150 g、炒制时间14 min。最优炮制工艺的验证实验结果显示,马齿苋炭的综合评分为92.57,与预测值(96.56)的相对误差为-4.13%。经最优炮制工艺制得的马齿苋炭以0.8 g/mL的糊状外敷,可明显促进痔疮模型大鼠创面愈合,显著减少渗出液量,显著降低血清中TNF-α、IL-6、IL-β水平。结论优化后的马齿苋炭炮制工艺具有可行性;经最优炮制工艺制得的马齿苋炭对痔疮模型大鼠症状具有良好的改善作用。

摘要：目的:运用均匀设计结合药理模型的方法筛选黄连总生物碱与三七总皂苷组合物(HS组合物)的最佳配伍比例,观察该剂量HS组合物对糖尿病并发症的影响。方法:以黄连总生物碱、三七总皂苷为研究对象,根据均匀设计方案选用U6(62)表分组设计,以小鼠血糖、血浆凝血酶原时间(PT),活化部分凝血酶原时间(APTT)为筛选指标,回归分析获得最佳剂量配比。采用高糖高脂结合链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型,将大鼠分为空白组,模型组,二甲双胍组(150 mg·kg-1),HS组合物组(黄连总生物碱360 mg·kg-1,三七总皂苷40 mg·kg-1),灌胃给药10周,通过观察各组大鼠血糖、糖耐量并计算血糖曲线下面积(AUC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),血液流变学指标以及胰腺、心脏、肾脏、视网膜的病理变化,验证该组合物对糖尿病并发症的作用。结果:HS组合物的小鼠给药最佳配伍比例为黄连总生物碱625 mg·kg-1+三七总皂苷60 mg·kg-1。验证实验显示,与空白组比较,模型组小鼠空腹血糖及血脂水平显著升高(P <0. 01),HDL-C显著降低(P <0. 01);全血高、中、低切黏度均显著升高(P <0. 01),胰腺、心脏、肾脏、视网膜损伤程度较重;与模型组比较,二甲双胍组于给药第6,8,10周血糖明显降低(P <0. 05,P <0. 01),HS组合物组第2,4,8,10周空腹血糖水平明显降低(P <0. 05,P <0. 01),血清中TG及LDL-C值明显降低(P <0. 05,P <0. 01),HDL-C,HDL-C/LDL-C值显著升高(P <0. 01),全血高切黏度与全血中切黏度均显著降低(P <0. 01);病理结果显示,HS组合物能减轻大鼠胰腺、心脏、肾脏以及视网膜的损伤。结论:HS组合物最佳配伍剂量对高糖高脂结合链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病并发症具有良好的抑制作用。

摘要：目的制备艾司奥美拉唑钠肠溶固体分散体片(E-EsSDT),以改善艾司奥美拉唑钠(Es)的引湿性、热不稳定性以及口服遇酸降解的问题。方法基于质量源于设计理念,运用鱼骨分析图筛选E-EsSDT的关键质量属性,并采用单因素考察法、Plackett-Burman设计及Box-Behnken设计对E-EsSDT进行优化及表征分析。结果最佳处方为水与乙酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯-LG(AS-LG)比例为3∶22、Es与AS-LG比例为1:3.5、剪切间断时间为44 s。稳定性试验结果表明,E-EsSDT的Es含量、吸湿增重、耐酸力均符合规定;表征分析表明,Es以无定型形式存在于固体分散体中。结论E-EsSDT的制备同时解决了Es引湿性、热不稳定性以及口服遇酸降解的问题。

摘要：目的基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念设计优化缬沙坦双层片的制备工艺,并考察体外释放行为。方法运用鱼骨分析法结合风险评估,对影响双层片关键质量属性(CQAs)的各因素进行剖析,以综合评分Y3作为CQA,进行实验设计(DOE)。运用Plackett-Burman设计从缓释材料用量、缓释层速释层黏合剂用量、缓释层速释层制粒目数、速释层崩解剂用量、压片压力8个影响因素中筛选出关键工艺参数(CPPs)。结合Box-Behnken设计,对CPPs进行优化,建立设计空间,加以验证并考察其体外释药行为。结果缓释材料用量,缓释层制粒目数、速释层崩解剂用量3个CPPs对双层片释放行为影响较为显著,通过95%置信区间的优化,最终确定的CPPs范围为:缓释材料用量19%~23%、缓释层制粒目数20~26目、速释层崩解剂用量6%~8%,在此区间制备出的缬沙坦双层片符合设计要求,体外释药符合Ritger-Peppas方程。结论基于QbD理念设计的缬沙坦双层片制备工艺稳定可行,符合制剂设计的释放要求。