摘要：构建鸡去泛素化相关因子1(Chicken ubiquitin-related factor 1,chUAF1)的原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。将提取的鸡法氏囊cDNA根据哺乳动物基因组的特性5′-端GC含量高3′-端GC含量低的特点设计2对引物,PCR获取2段基因片段。将两者用搭桥部分的酶切位点进行酶切,胶回收,连接成chUAF1基因全长,再将基因克隆入pMD18-T载体,酶切鉴定后,将chUAF1基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UAF1。转化BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达并鉴定。结果显示,所构建的chUAF1基因表达载体pET28a-chUAF1经PCR及DNA测序结果表明构建正确,SDS-PAGE鉴定在预期位置出现阳性条带。结果表明,已成功构建了pET28a-chUAF1原核表达载体,为下一步试验提供了依据。

摘要：采用正交试验设计,以桑黄菌丝体粗多糖含量为考察指标,用苯酚—硫酸法,分别确定了热水浸提法、微波辅助提取法和超声提取法的最佳工艺。通过极差分析得出:热水浸提法的最优工艺为浸提时间3 h、浸提3次、液料质量比50∶1、浸提温度90℃,粗多糖提取率为2.10%;微波提取法的最优工艺为微波处理15 min、液料质量比50∶1、提取3次,提取率为4.18%;超声提取法的最优工艺为超声30 min、提取2次、液料质量比60∶1、温度60℃、频率60 Hz,提取率为3.02%。微波辅助法与热水浸提法相比,时间缩短,且提取率提高近1倍;与超声提取法相比,时间缩短1/2,但提取率提高40%。因此,微波辅助提取法速度更快、提取效率更高、操作更简便,优于其他2种方法。

摘要：采用80℃热水为溶剂,浸泡提取,采用正交实验设计,以多糖含量为指标,筛选玉竹多糖的提取工艺。玉竹多糖的最佳提取工艺为:加6倍量80℃热水温浸提取3次,每次1h。