摘要：针对球形果蔬的视觉检测过程中存在的表面图像获取遗漏或重复,造成面积识别不准、相关品质特征检测准确率低的问题,提出了一种保证图像中球形果蔬表面各处面积比例与真实值一致的外表面投影展开算法。首先,在果蔬样品滚动过程中获取多组图像,裁剪其中正对相机的窄列区域进行拼接展开,随后,通过相机获取图像方式建立几何关系,计算展开图中每行像素的理论长度并进行尺寸缩放,得到各处面积比例符合真实值的样品外表面投影图像。利用标准球进行投影算法准确率验证,应用田口试验设计L16(34)正交试验,以果杯速度、裁剪宽度、相机高度为主要影响因素衡量检测的准确度,试验结果表明三因素影响均显著,确定最优参数为果杯速度0.40 m/s、裁剪宽度9像素、相机高度255 mm,标准球的表面积投影准确率为95.47%。以最优参数进行苹果、脐橙和番茄3种球形果蔬的表面投影试验,并探索不同样品角度对投影准确率的影响,3种水果检测准确率分别为84.0%、92.2%和87.6%,验证了果蔬表面二维投影算法的可行性。

摘要：对水稻中多种病原细菌的检测,使用常规方法往往耗时耗力,而多重PCR可以更加高效地进行多种细菌的检测。根据水稻细菌性谷枯病菌gyrB基因,水稻细菌性叶鞘褐腐病菌PfsI/R quorum sensing位点以及水稻细菌性条斑病菌和水稻白叶枯病菌含铁细胞接受因子基因设计引物,建立4种水稻病菌的多重PCR检测方法,对方法进行特异性和灵敏度测试,并对采自不同地区的水稻样本进行检测。结果显示,多重PCR方法能同步地快速检测出水稻细菌性谷枯病菌、水稻细菌性叶鞘褐腐病菌、水稻细菌性条斑病菌或水稻白叶枯病菌,检测灵敏度达到103 cfu/mL的菌液浓度,利用该方法对我国不同地区的58份水稻种子进行检测,其中17个样本检测出水稻细菌性条斑病菌或水稻白叶枯病菌,未检测到水稻细菌性谷枯病菌和水稻细菌性叶鞘褐腐病菌。

摘要：为建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的非洲猪瘟病毒(ASFV)检测方法,根据ASFV保守区域设计引物探针,在荧光PCR检测方法的基础上,建立了检测ASFV的微滴数字PCR方法,对其特异性及线性关系进行评估,以阴性样品和低拷贝样品分别测定该方法的空白检测限(LOB)和最低检测限(LOD)。结果显示:该方法有较好的线性关系(R2=0.999),与其他6种猪常见病毒及5种动物组织无交叉反应,LOB为1.6 copies/μL,LOD为3 copies/μL。利用建立的数字PCR、C1荧光PCR,以及世界动物卫生组织(WOAH)提供的荧光PCR和常规PCR方法对50份不同来源的样品进行检测,结果表明,建立的ASFV数字PCR检测方法具有高效、特异、灵敏等特点,可用于非洲猪瘟监测和口岸动物疫病防控。

摘要：根据鼠肺炎病毒NS2基因保守区设计一对特异性引物,建立了一种快速、灵敏、特异的PVM检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示,标准品浓度在1.0×101~1.0×107 copy/μL之间时,其浓度的对数值与荧光定量RT-PCR实验中的Ct值之间有良好的线性相关性(相关系数R2=0.9988),且该标准品检出限为1.0×102 copy/μL。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、古典猪瘟病毒、牛病毒性腹泻粘膜病病毒、禽流感病毒均无扩增反应,引物具有良好的特异性。同时,该方法实验间的变异系数为0.51%~1.56%,均小于2%,表明该方法扩增稳定性高、重复性强。结果表明:该研究新建的PVM实时荧光定量RT-PCR检测方法有着特异性好、灵敏度高、重复性强的优点,可用于PVM的监测以及流行病学研究。

摘要：为解决大型礼花弹和纯响弹不能运输的问题,设计了一种大型礼花弹的新包装形式。该包装通过一定厚度的蜂窝纸板隔离箱内的礼花弹,增大了箱内礼花弹间的距离,减少了箱内烟火药密度。通过联合国系列6试验的验证,表明该包装形式能阻断礼花弹爆炸后产生的冲击载荷的传播,可将大型礼花弹的危险级别由1.1G降为1.3G,且新型包装的安全性能(抗跌落和抗冲击)明显改善,性价比优于目前其他的礼花弹改善包装形式。

摘要：灵敏、准确、多样的检测方法对有效防控猪瘟疫情极其重要,为了丰富现有的猪瘟病毒(CSFV)检测技术,本研究拟建立基于RAA-Cas13a的检测方法。基于全序列比对的基础上分别设计1对引物和两条cr RNA,对不同浓度的阳性质粒、阳性样品和7种其他猪病病毒样品进行RAA扩增,扩增产物以Cas13a酶切体系进行荧光检测;结果显示,Cas13a酶切体系可以放大普通RAA的检测信号,RAA-Cas13a可以将检测的灵敏度提高至102copies/μL,不能检出其他7种猪病病毒,检测变异系数小于5%,临床样本检测结果与荧光RT-PCR一致性高。结果表明,本研究建立CSFV的RAA-Cas13a灵敏度较高、特异性和重复性好,具有推广应用的潜力。

摘要：本研究针对H1亚型猪流感病毒(swineinfluenzavirus,SIV)HA基因保守序列设计引物和探针,通过反应条件优化,建立了一种快速、准确检测H1亚型SIV的微滴数字RT-PCR定量方法。该方法特异性强,除H1亚型SIV外,H3、H5、H7亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等检测均为阴性;敏感性高,最低可检测4.7拷贝/μL;重复性好,对5个不同稀释度的H1亚型SIVRNA进行3次重复试验,每个稀释度的变异系数均小于5%。利用该方法对湖南省规模化养殖场收集的30份猪鼻拭子样品进行检测,发现与荧光RT-PCR检测结果一致。试验表明,该方法快速、准确、灵敏,可为H1亚型SIV的快速筛查及流行病学研究提供可靠的技术保障。

摘要：为建立以色列急性麻痹病毒(IAPV)荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中IAPV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以体外转录制备的重组质粒标准品为模板,经过反应条件优化,建立了IAPV荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对70份福建地区临床疑似IAPV感染的蜜蜂样品进行检测,并对阳性样品进行测序验证。结果显示,荧光定量RT-PCR方法的最佳引物和探针浓度分别为0.25μmol/L和0.20μmol/L,最佳退火温度为61℃。该方法仅对IAPV出现阳性扩增信号,对蜜蜂克什米尔病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、蜜蜂残翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂黑蜂王台病毒、蜜蜂囊状幼虫病毒等6种病毒均未出现扩增,特异性较强;该方法对重组质粒标准品的最低检测限为9.7拷贝/μL,比普通RT-PCR敏感性高约100倍;该方法批内及批间变异系数均小于1.5%,重复性好。利用该方法和普通RT-PCR方法分别对70份临床样品进行检测,结果显示,两种方法的阳性检出率分别为31.4%(22/70)和27.1(19/70),二者的符合率为95.9%。本研究首次建立的IAPV Taq Man荧光定量RTPCR检测方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为IAPV的流行病学调查及其分子生物学的快速检测奠定了基础。

摘要：热厉螨为蜂房内寄生虫,可严重侵害蜜蜂幼虫和蛹,及时检出并采取防治措施,可使蜂群免受毁灭性损害。本研究在序列比对分析的基础上,分别针对亮热厉螨、梅氏热厉螨、柯氏热厉螨COⅠ基因,以及蜂16S rRNA基因(内对照)设计4对引物和5条探针,经体系优化建立了可快速鉴别检测3种热厉螨的多重荧光PCR检测方法,并对方法的分析性能进行了评价。结果显示,本方法针对病原靶标的最低检测限(LOD)分别为6.07 copies、5.67 copies和6.21 copies,不与其他蜂病病原核酸发生交叉反应。应用建立的多重荧光PCR检测方法对201份蜂及蜂产品进行检测,分别检出亮热厉螨阳性样品1份和梅氏热厉螨阳性样品1份,经测序及序列比对确认为相应热厉螨特异序列。本研究建立的含蜂内参靶标的多重实时荧光PCR方法特异、灵敏,并可对采样、核酸提取及扩增进行全程质控,为热厉螨的快速筛查和种属鉴定提供了可靠方法。

摘要：进出口烟花爆竹作为第Ⅰ类危险货物(爆炸品),其固有危险特性在设计、生产、仓储、运输、燃放等产品全生命周期的具体风险及其表现形式是海关检验监管工作中需要重点关注的对象。本文旨在运用安全系统工程理论,研究海关检验监管全流程中构成整个系统安全的进出口烟花爆竹产品各单元的关系和相互影响,以协调各业务环节和进出口烟花爆竹各单元之间的关系,取得系统安全的最佳流程设计点,提出相应的风险防控措施建议。