摘要：目的探讨胃癌细胞中TWIST慢病毒表达载体的构建及构建。方法参考Genbank的人TWIST基因序列设计出1对TWIST全基因扩增引物,从人胃癌多药耐药细胞SGC7901/VCR中扩增TWIST基因,聚合酶链反应(PCR)产物线性化克隆入慢病毒表达载体GV341中,构建重组载体GV341-TWIST。将重组载体GV341-TWIST转染至人胃癌293T细胞包装病毒,免疫荧光检测293T细胞形态改变,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞TWIST表达水平,实时PCR法检测病毒滴度。结果成功构建了GV341-TWIST慢病毒表达载体,经限制性酶切后出现651 bp的条带,DNA测序分析证实重组慢病毒载体GV341-TWIST的插入序列有近100%的正确率,重组慢病毒载体转染293T细胞后,Western blot检测TWIST融合蛋白为25 kD。实时PCR测定重组慢病毒载体GV341-TWIST病毒滴度2.00E+8 TU/ml。结论本实验成功构建了人重组慢病毒载体GV341-TWIST慢病毒表达载体,在人胃癌293T细胞中高效表达了TWIST蛋白。

摘要：“喝酒不伤身”“好喝又大补”……岁末年初。各种保健酒的广告此起彼伏，不断吸引着人们的眼球。保健酒到底是药还是酒？保健酒真的不伤身？喝保健酒真能“大补”吗？