摘要：为了从微量元素角度评价彩色甘薯品质与其生长环境间的关系,本研究分析了陕西南部甘薯主要栽培区的10个品种彩色甘薯块根及土壤中微量元素含量。结果发现,彩色甘薯中微量元素含量与栽培条件、甘薯品种有关。土样中各微量元素含量均高于薯样,甘薯中微量元素含量与其土壤环境中微量元素含量成正相关;栽培条件相同时,不同品种的甘薯对土壤中同一元素吸收差异较大,同一品种的彩色甘薯对不同元素的选择性吸收也不相同。供试的10个品种中浙紫1号、密选1号、红心431、徐薯27和香黄含有丰富的微量元素,开发利用的价值较大。

摘要：为探讨CHS基因的下调表达对花朵着色的影响以及为百合观赏性状遗传改良提供技术支持,利用基于同源重组原理的Gateway技术,根据课题组从东方百合‘索邦’分离的LCHS2基因序列(Genbank登录号:GQ483376)和pENTR/D-TOPO载体要求,设计上游5'端添加'CACC'的一对特异引物,PCR扩增获得636 bp的干扰片段。通过TOPO克隆,将该片段克隆入载体pENTR/D-TOPO构建入门克隆载体pENTR/D-CHS,测序结果显示,与原序列同源性为100%。再经过LR反应使pENTR/D-CHS上的干扰片段替换掉目标载体pHellsgate12上的ccdB片段,快速构建了包含LCHS2基因干扰片段的RNAi表达载体pH12-CHSi,经限制性内切酶XhoI、XbaI酶切鉴定获得724 bp和722 bp的片段,与预期结果一致。pH12-CHSi电击法转化农杆菌GV3101,菌液PCR鉴定,出现636 bp的目的条带,表明RNAi表达载体pH12-CHSi已成功转入农杆菌。

摘要：根据从本课题组前期构建的中国野生葡萄华东葡萄株系白河-35-1在白粉病诱导下的cDNA文库中获得的1条与抗白粉病相关的EST序列,设计特异引物,结合RACE(Rapid-amplrfication of cDNA ends)技术克隆了中国野生华东葡萄白河-35-1广泛逆境蛋白基因(Universal stress protein,USP)全长序列。该基因全长836 bp,编码175个氨基酸,GenBank登录号为GU946975。进一步研究该基因在白粉菌诱导下的相对表达水平,我们通过半定量RT-PCR技术,研究了VpUSP在中国野生华东葡萄抗病、感病株系中的表达变化,结果表明,广泛逆境蛋白在中国野生华东葡萄感病株系中,接种白粉病前后均有表达,但表达量变化不明显;然而,抗病的中国野生华东葡萄株系在接种白粉病后VpUSP基因表达量呈明显的增加趋势,初步表明中国野生华东葡萄VpUSP基因在与白粉病菌互作过程中具有表达活性。

摘要：本研究利用质体基因组的进化保守性,根据烟草质体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoea batatas L.)质体基因组中克隆了两个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。选用水稻质体基因组强启动子prrn及psbA3'非翻译区调控选择标记基因aadA和报告基因gfp,构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3',之后将表达盒克隆进甘薯质体同源片段中,获得甘薯质体多顺反子定点整合表达载体pSAG,酶切鉴定结果表明所构建的载体符合预期设计。这为后期甘薯质体转化体系的建立和通过质体基因工程手段将更多目的基因导入甘薯进行遗传改良奠定了基础。

摘要：以汉中栽培2种黑稻(黑丰,黑米B)和1种白稻(香粘)为材料,根据水稻查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因DNA序列的保守区域设计3对引物,进行PCR扩增,获得CHS外显子Ⅱ部分序列,测序并与籼稻CHS基因(X 89589.1)比对,发现有13处SNP,这些SNP可能是黑稻种子黄酮类物质含量差异的重要原因之一。稻和其他植物CHS基因外显子Ⅱ序列的进化分析表明,CHS基因虽然整体上反映进化关系,但由于不同基因的进化历史不同,因此单独用CHS基因的进化树来反映物种的进化关系是不确切的,而应尽量选择多位点进行研究。研究结果为高黄酮类物质含量的黑稻育种和黑稻CHS基因在分子系统分类方面提供了必要数据。

摘要：建立适用于从毕赤酵母菌中提取外源重组蛋白的超声破碎方法。采用Western Blotting免疫印记技术检测从毕赤酵母菌中提取的外源人脂联素蛋白活性,并以外源人脂联素蛋白活性作为考察指标,采用单因素和L9(33)正交试验设计,对超声破碎条件进行优化。结果表明:在外源人脂联素蛋白活性最高的情况下,超声破碎条件为超声破碎功率450W、时间25min、时间间隔(工作时间:间歇时间)10:10(s/s),此时细胞破碎率为(67.8±2.1)%。若在超声破碎时添加1mmol/L PMSF,虽对细胞破碎率并无显著影响,但外源人脂联素蛋白活性将会明显增高。

摘要：利用低能N+注入黏红酵母高压突变株G-39,经筛选获得高产β-胡萝卜素的离子诱变株GL-5,其β-胡萝卜素产量由出发菌株的9.64mg/L提高到17.36mg/L,增加了80.08%。通过均匀设计试验法,初步确定了诱变株GL-5的β-胡萝卜素发酵最适条件(葡萄糖40g/L、蛋白胨30g/L、酵母膏10g/L、番茄汁3ml/L、核黄素0.5mg/L、初始pH6.0、摇瓶装量50ml/250ml、接种量50ml/L),使其β-胡萝卜素产量进一步由17.36mg/L提高到34.21mg/L,比对照增加了98.09%。这表明,离子诱变株GL-5是一株优良的高产β-胡萝卜素突变株,离子注入对该菌种具有良好的诱变效果。

摘要：以青风藤药材为原料,在单因素实验研究的基础上,采用Box-Behnken响应曲面分析法对影响青风藤药材中青藤碱超临界CO_2萃取得率的关键因素:萃取时间、压力、温度进行了优化,旨在为青藤碱新型、绿色提取分离方法作探讨。根据统计模型进行了工艺参数的优选,以得率为指标,优化后所得青藤碱超临界CO_2萃取工艺条件为:萃取压力为27.63 MPa,萃取温度为50.68℃,萃取时间为120.24 min,该条件下得率为1.372%。验证试验证实了该方程的预测值与试验值之间具有较好的拟合度。

摘要：利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以叶绿体基因强启动子prrn驱动选择标记基因aadA及报告基因gfp构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3,′然后将表达盒克隆进菊苣叶绿体同源片段中,获得菊苣叶绿体定点整合表达载体pJAG,酶切分析证明所构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立菊苣的叶绿体转化体系奠定基础,为进一步通过叶绿体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣叶绿体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。

摘要：通过静电自组装法制备Fe_3O_4@酵母,并对其进行SEM和XRD表征。以亚甲基蓝模拟染料废水,采用响应面方法(Response Surface Methodology,RSM)中Box-Behnken Design(BBD)设计法对溶液初始质量浓度、流速和p H等影响因素进行了优化。通过分析试验结果,建立了以去除率为响应值的二次多项式模型,预测最佳条件为亚甲基蓝初始质量浓度为101.21 mg/L,流速为5.48 m L/min,p H=10.75,去除率为63%,在此条件下做验证性实验3次,最终实测去除率均值为61.86%,与预测值具有良好的一致性。对亚甲基蓝去除率影响的大小顺序为X3>X2>X1,即溶液p H>溶液流速>溶液初始质量浓度。对Fe_3O_4@酵母复合微球的多相类Fenton再生进行了研究,基于酵母菌的生物吸附和纳米Fe_3O_4的非均相Fenton反应的耦合作用,Fe_3O_4@酵母复合材料具有良好的可再生性。