摘要：背景:黄芪作为传统的中药,具有抗自由基、增加机体免疫力、改善微循环、保护血管内皮细胞及保护神经系统等多种作用。其中,黄芪的神经血管保护作用与其对局部脑皮质血流速度的调节有关。目的:观察脑创伤后黄芪对局部脑皮质血流速度变化的影响。设计:随机配对设计。单位:解放军兰州军区神经外科研究所。材料:实验于 2000-02/05在兰州军区神经外科研究所外伤实验室进行。取健康雄性 SD 大鼠 75只,随机分成正常对照组 5只、盐水对照组和黄芪组各 35只,后两组又分为创伤后 1,3,6,8,12,24和 48h 等 7个时间点,每个时间点 5只动物。方法:正常对照组不造模,其他 2组采用改进的 Feeney’s方法建立颅脑创伤模型;伤后黄芪组立即腹腔注射黄芪注射液(5g/kg),盐水对照组腹腔注射 0.5m L 生理盐水。主要观察指标:测定创伤后相应时间点大鼠脑组织局部脑皮质血流速度。正常对照组打开骨窗后直接测量。结果:经补充后 75只大鼠进入结果分析。局部脑皮质血流速度:盐水对照组伤后 1h 即低于对照组[(6.90±0.68),(7.94±0.65),P <0.05],伤后24h 降至最低点,伤后 48h 开始回升[(5.86±0.61),(6.15±0.60)]。黄芪组各时间点均高于盐水对照组(P <0.05)。结论:黄芪具有明显增加局部脑皮质血流速度的作用,其作用与黄芪的神经血管保护作用有关。

摘要：目的 :建立人血浆中奥美拉唑的高效液相色谱测定法 ,以测定志愿者口服 2种奥美拉唑制剂后的血药浓度 ,并对 2种制剂的生物等效性进行评价。方法 :血浆中加入内标尼美舒利后 ,以乙醚提取 ,进行高效液相色谱法检测。色谱柱为HypersilODS2 2 0cm× 4 6mm ,5μm ,流动相为甲醇-水 -冰醋酸 -三乙胺 ( 60∶4 0∶0 5∶0 5) ,流速 1mL·min- 1,检测波长为 3 0 2nm。 1 2名健康志愿者随机分成两组 ,分别服用 2种奥美拉唑制剂 ,人体实验方案采用双交叉实验设计法。结果 :本测定方法的提取回收率为 87 0 2 %～ 98 0 7% ,血浆中奥美拉唑的最低检出浓度为 3ng·mL- 1,线性范围为 5～ 1 80 0ng·mL- 1。用本法测定了 1 2名志愿者随机交叉口服单剂量 4 0mg洛赛克胶囊和奥美拉唑肠溶片后血浆中奥美拉唑的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。结论 :用本法测定人血浆中奥美拉唑浓度结果满意。奥美拉唑体内过程符合一室模型 ,统计学结果表明

摘要：本研究通过分析《伤寒论》教学中存在的问题,将整体构思(conceive)、设计(design)、实现(implement)和运作(operate)的CDIO教育理念贯穿于《伤寒论》教学中,以学生为中心、教师为引领、问题为导向,通过课前预习阶段(conceive,构思)、课堂学习阶段(design,设计)、课后复习阶段(implement,实现)、课外早期临床(operate,运作)及CDIO期末考核阶段,全面促进学生对《伤寒论》课程的学习兴趣,注重提升学生中医文化自信,培养学生中医临证思维,促进经典理论和方证的临床应用,提升临床疗效,为中医药卓越人才培养进行有益的教学改革探索,获得了较好的教学效果。

摘要：目的以不同取代的苯乙酸为原料设计合成一系列苯乙酰胺衍生物,并考察化合物对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导的胰岛细胞损伤的保护作用。方法培养Min6细胞,分为B空白对照组、PA处理组、PA+化合物组,采用CCK-8法检测细胞活性;通过Western blot观察细胞TXNIP、NLRP3的蛋白表达;MDA、SOD试剂盒检测MDA含量以及SOD活性;胰岛素试剂盒检测Min6细胞胰岛素的分泌量。结果共设计合成10个苯乙酰胺衍生物,结构经1H NMR、ESI-MS确证;药理活性研究表明,大多数化合物对胰岛细胞有保护作用,化合物LY-6和LY-8相较PA模型组(细胞活力为61.4%)保护作用较强,其中LY-6细胞活力最高,达到104.9%;与PA组相比,LY-6和LY-8组TXNIP和NLRP3蛋白表达降低,MDA含量减少,SOD活性增加,胰岛素分泌量增加。结论LY-6和LY-8可通过抑制TXNIP的表达,减少对NLRP3炎性小体的激活,减少MDA的产生、增加SOD的活性,最终减少胰岛β细胞的凋亡,增加胰岛素的分泌量。故化合物LY-6可以作为潜在的抗糖尿病新化学实体。

摘要：目的:克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因,构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达。方法:根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物,用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因,并重组到scFv的表达载体中,在大肠杆菌进行表达,表达产物经体外变性复性后进行SDS-PAGE鉴定。用ELISA检测其特异性结合活性。结果:成功地克隆抗角蛋白抗体的V区基因,构建了scFv的表达载体,并在大肠杆菌中表达。ELISA检测证实,表达的scFv保留了亲本Fab抗体的特异结合活性。结论:获得功能性抗角蛋白的scFv,可用于进一步的临床应用研究。

摘要：目的建立RhD mRNA剪接体实时荧光定量技术,了解不同个体中RhD mRNA剪接体的含量与表达水平。方法制备本实验室SYBR Green荧光染料定量检测RhD mRNA剪接体的标准曲线,设计RhD mRNA剪接体的引物,提取随机选择的150例血液样品中的mRNA,反转录为c DNA,并以c DNA为模板进行PCR扩增,扩增时加入荧光基团,利用荧光信号实时监控整个PCR进程,最后通过标准曲线来计算RhD mRNA各剪接体的表达量。结果根据荧光定量的峰值读数,以2nd Derivative Max计算方法,计算出所测样本的理论值、实测值,两个重复孔的平均值作为所检测样本RhD mRNA剪接体的表达量。结论此方法可以准确定量不同个体RhD mRNA剪接体的拷贝数,为RHD血型基因的研究与抗原表达的研究提供依据。

摘要：目的 用RNA干扰技术,分别以转化生长因子（TGF）β 1、基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）-1和TIMP-2为靶基因,设计并构建针对TGF β 1、TIMP-1和TIMP-2基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体,并在体外检测其对大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）的TGF β 1、TIMP-1和TIMP-2基因表达的抑制情况.方法 设计合成TGF β 1、TIMP-1和TIMP-2的siRNA并与含绿色荧光蛋白的pGenesil-1载体连接,构建siRNA真核表达载体,并测序鉴定.体外转染HSC-T6细胞,观察转染效率,并用荧光定量PCR以及Western blot分析对目的 基因的抑制效率.组间比较用方差分析,两两比较用q检验.结果 成功构建了针对TGF β 1、TIMP-1和TIMP-2基因的siRNA真核表达载体.体外成功转染HSC-T6细胞,转染后的细胞TGF β 1、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达分别下调63.4%±8.0%,64.5%±9.0%,55.0%±17.0%（F值分别为17.55、128.42、210.36,P值均＜0.01）,TGF β 1、TIMP-1及TIMP-2蛋白表达分别下降57.8%±3.0%,55.1%±5.0%,49.3%±1.0%（F值分别为130.75、159.09、35.72,P值均＜0.01）.结论 成功构建了针对TGF β 1、TIMP-1和TIMP-2基因的siRNA真核表达载体;将重组载体成功转染入体外培养的HSC-T6细胞,并显著抑制了目的 基因的表达;为进一步研究其在体抑制表达提供了实验工具.

摘要：利用低能N+注入黏红酵母高压突变株G-39,经筛选获得高产β-胡萝卜素的离子诱变株GL-5,其β-胡萝卜素产量由出发菌株的9.64mg/L提高到17.36mg/L,增加了80.08%。通过均匀设计试验法,初步确定了诱变株GL-5的β-胡萝卜素发酵最适条件(葡萄糖40g/L、蛋白胨30g/L、酵母膏10g/L、番茄汁3ml/L、核黄素0.5mg/L、初始pH6.0、摇瓶装量50ml/250ml、接种量50ml/L),使其β-胡萝卜素产量进一步由17.36mg/L提高到34.21mg/L,比对照增加了98.09%。这表明,离子诱变株GL-5是一株优良的高产β-胡萝卜素突变株,离子注入对该菌种具有良好的诱变效果。

摘要：现阶段我国部分超高层建筑存在信息传递割裂和各参建方协同管理效率低等问题。鉴于此,以实际工程为依托,利用BIM技术可视化、模拟性和协同作业的优点,探索BIM技术在超高层建筑深化设计、碰撞检查、模拟施工交底和物料追踪中的应用,以期为类似超高层建筑BIM技术的应用提供工程借鉴。

摘要：目的探讨建立的RhD mRNA剪接体多态性检测技术的有效性与实用性。方法采用设计的两对引物扩增全长RhD mRNA外显子,完全避开RHCE基因的干扰,特异性扩增并分析了随机选取的非血缘关系50例标本的RhDmRNA剪接情况。结果两对引物能扩增RhD mRNA剪接体的全长外显子基因并分析出RHD基因剪接体的多态性,扩增出4种剪接体的特异性:exon-1-3扩增产物:415 bp;exon-3-10扩增产物均由3种不同组合构成:产物一:约880 bp,产物二:约750 bp;产物三:约550 bp。50例标本:exon-1-3扩增产物:全部无缺失;exon-3-10扩增产物:带1无缺失,带2缺exon-7的占总标本27例、缺exon-7,8的占总标本6例、缺exon-8,9的占总标本12例、缺exon-7,9的占总标本5例,带3全部缺exon-7,8,9。结论建立的RhD mRNA剪接体多态性检测技术可以准确扩增RhD mRNA全长基因,并有效分析该基因剪接体的多态性。