摘要：为了提高检测效率,节省时间、试剂和样本,建立了基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)的双重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术用于羊乳中牛乳成分的检测。通过引物设计优化,牛引物目标产物的T m值在80℃,羊引物目标产物的T m值在83℃,由于在传统熔解曲线中峰型有交叉重叠,同时检测存在干扰,因此使用HRM技术,实现了2种不同动物源性成分的有效区分。该方法特异性好,不需要针对牛、羊源性成分单独进行检测,当体系中存在其中一种或两种都存在时都可将其快速检出,且对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,成功应用于市售羊乳及其制品的检测。

摘要：环介导等温扩增(LAMP)技术能够快速检测食品中的动物源性成分,但常用的有机检测染料稳定性差、Stoke′s位移小等导致荧光颜色区分不够明显.基于此,根据线粒体保守序列设计牛、羊特异性引物,同时采用核酸分子“光开光”钌(II)配合物[Ru(bpy)2(dppz)]2+作为荧光染料,建立了一种简便、快速、直观地检测羊奶制品中掺入牛源性奶成分的可视化LAMP方法.结果显示,该方法特异性好,对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,对牛、羊的检测灵敏度可达0.007 pg/μL和0.7 pg/μL,并能检测出羊乳中掺假0.1%的牛乳.因此,该方法可直接通过荧光目视比色判定检测结果,具有快速、直观、低成本等优点,为羊奶真实性现场快速检测提供技术支持.