摘要：目的:为解决目前医务工作者在循证医学临床实践中获取最佳证据的困难和障碍,构建炎症性肠病的循证医学信息服务平台.方法:充分利用网络资源来获取数据源,采用Microsoft SQL Server数据库技术和ASP设计程序和网站,建立起专门的信息服务平台.结果:成功建立信息平台,运行良好,利用该平台可为临床医生迅速获取诊断和研究依据提供信息保障.结论:我们在新的临床医学模式下主动为临床循证医学实践提供信息服务,使医生获得更有效的科学依据用于临床实践,促进我国临床医学的发展.

摘要：目的 :构建能产生与骨保护素配体 (OPGL)同源的发卡结构小干预RNA (siRNA)的载体并验证其对OPGLmRNA的抑制效应 .方法 :根据大鼠的OPGL的基因序列 ,参考OPGLmRNA的空间结构 ,设计发卡结构siRNA模版 ,并构建由U6启动子引导产生siRNA的质粒载体 .转染大鼠骨髓基质细胞 ,4 8h后提取细胞总RNA ,RT PCR ,以OPGL与内参 β actin扩增产物的吸光度比值来反映OPGLmRNA的表达情况 ,结果进行统计学分析 .结果 :成功获得U6启动子引导产生siRNA的质粒载体 ,转染骨髓基质细胞后细胞中OPGLmRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少 .结论 :U6启动子引导产生siRNA的质粒载体能有效地减低OPGLmRNA的表达量从而抑制OPGL的表达 .

摘要：目的 :观察维甲酸 (RA)、氟伐他汀 (Flu)对放射性肺损伤的治疗作用 .方法 :雌性SD大鼠 10 0只随机分为正常对照组 (C组 )、单纯照射组 (R组 )、RA治疗组 (W组 )、RA联合Flu治疗组 (F组 )和地塞米松 (Dex)治疗组 (D组 ) .后 4组动物经硫喷妥钠ip麻醉后 ,行直线加速器全胸部照射 ,照射后次日W组每日灌服RA 2 0mg·kg -1·d -1,F组灌服Flu、RA各 10mg·kg-1·d-1,D组灌服Dex 3.33mg·kg-1·d-1.于照射后 5 ,15 ,30 ,6 0d活杀动物 ,切片行HE和甲苯胺蓝染色 ;透射电镜 ;TGF β1mRNA原位杂交检测 .采用SPSS统计软件进行析因设计方差分析 .结果 :R组在照射后 30 ,6 0d肺间质面密度逐渐增大 (P <0 .0 1) ,而W、F组与同期R组比较明显减小 (P <0 .0 1) ,D组 30d减小 (P <0 .0 5 ) .R组在照射后 6 0d与C组相比肥大细胞数增多 (P <0 .0 1) ,而W、F、D组与同期R组比较减少 (P <0 .0 1) .R组 6 0d间质胶原纤维明显增多 ,II型细胞线粒体、内皮细胞肿胀 ;W、F组间质胶原纤维减少 ,II型细胞线粒体肿胀消失 .R组照射后 30 ,6 0d与C组比较TGF β1mRNA表达明显增强 (P <0 .0 1) ,W、F组在照射后 30 ,6 0d与同期R组相比减弱 (P <0 .0 1) .结论 :RA联合Flu较RA单用能更好地减轻放射性肺炎 ,抑制胶原纤维增生 。

摘要：目的　构建由缺氧反应元件串联重复体修饰的人端粒酶逆转录酶 (h TERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶FCY1基因表达的复制缺陷型重组腺病毒 .方法　人工设计缺氧反应元件串联重复序列 ,克隆后插入 h TERT启动子上游并经测序证实 .将修饰后的 h TERT启动子和酵母胞嘧啶脱氨酶基因 FCY1插入穿梭质粒 ,与辅助质粒共转染 HEK2 93细胞 ,重组产生复制缺陷型腺病毒 .结果　获得了由 3倍和 6倍缺氧反应元件修饰的 h TERT核心启动子引导 FCY1基因表达的复制缺陷型重组腺病毒 .结论　基于 Cre重组酶 / lox P的腺病毒载体构建系统操作简便。

摘要：目的 :建立高效液相色谱法测定Beagle犬血浆中 1,4 二氢 2 ,6 二甲基 4 (3’硝基苯基 ) 3,5 吡啶二甲酸甲戊酯(MN92 0 2 )的方法 ,并研究其代谢动力学规律 .方法 :采用正交设计优化色谱分离条件 .Beagle犬给予二氢吡啶类药物MN92 0 2 (0 .335mg/kg ,iv) ,用反相高效液相色谱法分析血浆中原型药物浓度 ,血浆药物浓度 时间数据用 3P97药代动力学软件分析 .结果 :在选定的色谱条件下 ,MN92 0 2和干扰能得到较好的分离 ,其保留时间 <14min .Beagle犬静脉注射给予MN92 0 2后 ,其体内过程符合二室模型 ,T1/ 2 β为 (2 0 0± 32)min ,曲线下面积 (AUC)为 (32 14 7± 95 4 4 ) μg·min/L .结论 :所建立的方法稳定、简便、准确 ,可用于Beagle犬血浆中MN92 0 2的浓度测定 .MN92 0 2在Beagle犬体内代谢迅速 .

摘要：目的 :构建 pGEX dif14原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达dif14蛋白片段以获得其抗原 .方法 :采用N末端融合谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)的 pGEX 4T 1载体 ,根据dif14基因开放读框N端 5 2氨基酸序列设计引物PCR扩增并购建原核表达载体 ,测序证实 .在大肠杆菌DH5α中进行表达 .结果 :测序证实dif14原核表达载体构建正确 ,含 pGEX dif14表达质粒的大肠杆菌经异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导后能够表达约Mr35× 10 3 的融合蛋白 .结论 :成功地构建了原核表达质粒 pGEX dif14 ,并在大肠杆菌得到表达 。

摘要：目的 :探讨一种用于单样本、配对以及两独立样本等简单设计等效性检验的样本量与检验效能的估算方法 .方法 :在介绍Phillips法所依据的原理公式的基础上 ,利用统计软件SAS作实例探讨 ,并与传统的计算等效性检验样本量的公式相比较 .结果 :传统估算等效性检验的样本量的公式必须将两药物的实际差别考虑在内 ,否则将会低估所需要的样本量 ,而Phillips法特别注意了这一点 ,不会出现类似错误 .结论 :利用Phillips法计算几种简单设计的等效性检验的样本量与检验效能 ,与传统公式调整后的计算结果基本一致 。

摘要：目的　测试比较正常成年和无耳廓成年雪貂在水平面和正中矢状平面内对声音的定位能力 .方法　在特殊设计的隔音测试仓内 ,连接有计算机控制的测听系统 ,雪貂事先训练建立声音与给水的条件反射后再用于具体的定位实验 ,在水平面和垂直面我们比较了围绕正中 0°和离水平面 45°两侧的声源定位 .分别用 50 0 ,1 0 0和 40 ms时程的持续噪音 ,其强度是由强到弱 .结果　在水平面正常成年雪貂和无耳廓雪貂的声音定位能力评分没有明显差别 .但是在正中矢状平面内两组动物的表现都要差 ,无耳廓雪貂的定位能力更要差于正常雪貂 (P<0 .0 5) ,对长时噪音的定位有适应改善能力 .说明自幼切除耳廓消弱了动物在垂直平面内依赖于频谱选择特性的部分声音定位能力 .结论　外耳的频谱选择特性对水平面空间听觉定位精确率影响不大 。

摘要：目的:探讨前后测量设计资料中伴随的个体自然生长现象.方法:以肥胖儿童的减肥试验为例,假设有两组儿童,一组为处理组,该组儿童为肥胖儿童组接受减肥药物控制体质量;另一组为对照组,该组儿童为标准体质量儿童组,分别在8岁和10岁时测量儿童的体质量,假设两组儿童在试验前后体质量的均值分别为Y1(t1)=31.0,Y0(t1)=23.0,Y1(t2)=36.0,Y0(t2)=28.0,在处理组缺失干预时Y1(t2)=41.0.结果:用简单得分法估计处理效应,α=36.0-31.0-(28.0-23.0)=0(kg),说明两组儿童试验后的体质量无差异,处理效应不存在,但是真实的处理效应为Y1(t2)-Y1(t2)=36.0-41.0=-5.0(kg),说明处理效应是存在的,即施加干预前后儿童的体质量有差别.结论:总结了前后测量设计资料个体生长趋势的4种情况,提示我们在分析前后测量设计资料时个体自然生长问题不容忽视.

摘要：目的:构建汉坦病毒(Hantavirus,HV)单链抗体/鱼精蛋白片段融合蛋白1A8 ScFv/Cκ/P基因的原核表达载体,蛋白经表达后纯化并进行1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白的功能活性鉴定.方法:采用PCR的方法,扩增单链抗体基因1A8 ScFv和1A8 ScFv/Cκ,将鱼精蛋白片段的编码序列设计入扩增引物,获得HV单链抗体/鱼精蛋白片段的融合蛋白基因1A8 ScFv/Cκ/P.将获得的重组基因克隆入原核表达载体pET32a,并在大肠杆菌BL21中表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,用Ni-NTA螯合层析介质进行纯化.采用ELISA方法分析1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白与HV抗原的结合活性,凝胶迁移阻滞实验检测1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白与质粒DNA的结合活性.结果:成功构建了HV 1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白基因的表达载体,在大肠杆菌中实现了可溶性表达.通过功能活性测定,纯化的1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白既保持了与HV抗原的结合能力,同时又具有与核酸的结合活性.结论:构建和表达的HV 1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白具有HV抗原结合活性和DNA结合的活性.