摘要：目的：筛选优化沙棘粉中儿茶素的提取方法,并用HPLC测定其含量。方法：以均匀设计法优化提取条件,采用Agilent ZORBAX SB-C18柱,以甲醇—乙酸溶液（用乙酸调p H值至3.2）（25：75）为流动相,流速1 mL/min;柱温25℃,检测波长280nm。结果：优选出的最佳提取条件：甲醇浓度为74.0%,水浴温度为70℃,超声时间为30min。儿茶素在0.50-10.0μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数（r）为0.9999,平均回收率为97.25%（RSD=1.77%）。结论：本试验建立的含量测定方法操作简便、重现性好且具有较强的专属性。

摘要：目的 建立三重PCR体系用于鉴别消毒奶及其加工环境中的单核细胞增生李斯特菌。方法 以李斯特菌属细菌中共有的编码P60蛋白的iap基因和单核细胞增生李斯特菌特有的编码溶血素的hly基因为靶目标设计引物，用于三重PCR扩增。结果 李斯特菌属细菌的iap基因在二重PCR的扩增片断为1．45kb，单核细胞增生李斯特菌溶血素的hly基因的扩增片断为420bp；在三重PCR体系中单核细胞增生李斯特菌除了扩增到420bp的hly基因片断以外，iap基因以700bp的小片断取代了1．45kb的大片段，而同属的其他细菌仍旧扩增iap基因1．45kb的大片段。结论 所建立的三重PCR法能扩增出李斯特菌属细菌的预期条带，此方法对肉汤培养物的检测灵敏度为3．2×10^1 cfu／ml，对人工污染牛奶的检测灵敏度为1．4×10%2cfu／ml。高水平***（10^8cfu／m1）共存不影响单核细胞增生李斯特菌的特异性检出。三重PCR还可以直接鉴别出培养3～6小时后的含有单核细胞增生李斯特菌（1．45×10^0～1．45×10^1 cfu／m1）的牛奶。

摘要：参考已发表的多杀性巴氏杆菌KMT-1基因保守区设计LAMP引物,以牦牛多杀性巴氏杆菌PMqh-10株为对象,建立了用于检测牦牛多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增方法。结果显示,63℃水浴锅中反应50 min即可观察到阳性结果,dNTP的最适浓度是1.8mmol/L,Mg2+最适浓度是12 mmol/L。方法特异性检测结果显示,该方法对随机选用的其他菌无扩增作用。

摘要：利用多联实时荧光定量PCR技术建立了一种梅迪-维斯纳病毒和羊痘病毒快速鉴别诊断方法。分别设计并合成梅迪-维斯纳病毒和羊痘病毒基因的引物,建立多联实时定量PCR快速鉴别诊断方法;对所建立的方法进行稳定性、特异性和敏感性试验;并用所建立的方法对临床样品进行检测。结果显示:设计的引物敏感性和特异性较好,该多联实时荧光定量PCR方法中梅迪-维斯纳病毒Tm值为89～90℃,羊痘病毒Tm值为91～92℃,对其他供试的菌株则为阴性,并且该方法对梅迪-维斯纳病毒的DNA最低检出量为25拷贝/μL,羊痘病毒为40拷贝/μL,两病原都存在时为80拷贝/μL。研究结果表明本实验建立的方法可用于同时检测梅迪-维斯纳病毒和羊痘病毒,为动物检疫提供了一种有效的检测方法。