摘要：本试验旨在研究青海半细毛羊白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)基因分子进化情况,对IL-8基因进行了克隆及序列分析。根据GenBank公布的羊IL-8基因序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增目的片段,将目的基因与pMD18-T克隆载体连接,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,对PCR与酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定,采用生物信息学软件对IL-8基因序列进行序列分析。结果表明,羊外周血淋巴细胞中扩增出与预期大小(370bp)相符的条带,同源性分析结果显示,克隆的核苷酸序列与已知IL-8基因序列同源性为96.1%～99.0%,是较为保守的基因。

摘要：为研究不同添加水平的抗菌肽对仔猪免疫功能和猪瘟疫苗免疫效果的影响,试验采用单因素随机设计,将60头仔猪随机分成4组,对照组、抗菌肽Ⅰ组、抗菌肽Ⅱ组、抗菌肽Ⅲ组分别在基础饲粮中添加0%、0.05%、0.1%、0.2%抗菌肽,试验期为35 d。结果表明:(1)抗菌肽Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组脾脏指数分别较对照组提高7.48%、13.08%、14.49%(P<0.05),抗菌肽Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组胸腺指数分别较对照组提高5.42%、6.63%、7.83%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组脾脏指数分别较抗菌肽Ⅰ组提高5.22%、6.52%(P<0.05);(2)抗菌肽Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组IgG含量分别较对照组提高14.27%、24.07%、24.15%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组IgA含量分别较对照组提高10.70%、12.44%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组IgG含量分别较抗菌肽Ⅰ组提高8.57%、8.64%(P<0.05);(3)抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组C4含量分别较对照组、抗菌肽Ⅰ组提高10.21%、11.30%、9.03%、10.10%(P<0.05);(4)抗菌肽Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组IL-2含量分别较对照组提高2.97%、5.75%、7.09%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组IL-4含量分别较对照组提高3.83%、4.35%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组IL-2含量分别较抗菌肽Ⅰ组提高2.71%、4.00%(P<0.05);(5)抗菌肽Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组猪瘟抗体效价分别较对照组提高20.66%、34.00%、37.66%(P<0.05),抗菌肽Ⅱ组、Ⅲ组猪瘟抗体效价分别较抗菌肽Ⅰ组提高11.06%、14.09%(P<0.05)。综上所述,抗菌肽不同添加剂量均可显著改善仔猪的免疫功能和猪瘟疫苗免疫效果,以0.1%添加剂量为适宜。

摘要：为高效表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白并制备多克隆抗体,参考牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组序列设计一对引物,利用RT-PCR扩增出822bp的E2基因片段,经测序鉴定正确后,将其定向克隆至原核表达载体pET32a(+)中,鉴定正确后,在大肠埃希菌BL21(DE3)细胞内得到了以包涵体表达形式存在的重组融合蛋白,重组蛋白亲和层析纯化后,免疫印迹鉴定表明重组蛋白能够被牛病毒性腹泻病毒阳性血清特异性识别,具有良好的反应活性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接ELISA测定其抗体效价达1∶25 600。本研究所表达的E2蛋白及制备的多克隆抗体,为E2蛋白结构、功能的研究以及抗原表位的鉴定奠定了基础,为进一步开发牛病毒性腹泻病毒快速检测试剂提供了条件。

摘要：从送检羊病料中分离到不同产毒能力的11株疑似产气荚膜梭菌菌株,对分离株进行了形态、菌落特性及产毒能力的观察、分析,并通过血清中和试验,胰酶消化试验进行了血清型鉴定;参照Gen Bank文库相关数据,自行设计了产气荚膜梭菌α,β,ε三种毒素的特异性引物,对其中两株产毒性能良好(1000 MLD/m L),溶血特性明显的菌株利用多重PCR进行分型鉴定,分离菌株海F、海H及标准株(721株)均扩增出大小为325 bp的α毒素条带及236 bp的β毒素条带,无ε毒素,结合实验室诊断及多重PCR鉴别诊断结果,确定此次疫情为C型产气荚膜梭菌引起的羊猝狙。本试验的研究为羊猝狙的快速诊断、流行病学调查提供了科学依据,为建立产气荚膜梭菌多重PCR鉴定诊断方法奠定了基础。

摘要：为了研究不同添加水平复合微生态制剂对断奶仔猪生长性能、肠道微生物和免疫功能的影响,试验采用单因子设计,将120头断奶仔猪随机分成4组(对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),每组30头猪。对照组饲喂基础日粮,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别在基础日粮中添加0.5,1.0,2.0 g/kg的复合微生态制剂,试验期28 d,测定仔猪生长性能、肠道微生物菌群、免疫功能指标。结果表明:与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组平均日增重均显著提高(P<0.05),料重比、腹泻率均显著降低(P<0.05),猪瘟抗体效价和Ig G、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)含量均显著提高(P<0.05);高剂量组盲肠、结肠、直肠中乳酸杆菌、双歧杆菌数量均显著高于对照组(P<0.05),Ig G、Ig A含量均显著高于对照组(P<0.05)。说明复合微生态制剂可显著提高断奶仔猪生长性能,降低腹泻率,促进肠道有益菌增殖,减少有害菌数量,提高机体免疫功能,且2.0 g/kg添加剂量的作用效果更为显著。

摘要：为建立一种快速、准确的动物衣原体检测方法,本研究基于动物衣原体的保守基因env B的序列,设计并合成引物与探针,建立了一种动物衣原体特异性重组酶聚合酶扩增（RPA）检测方法。该检测方法在37-39℃恒温反应20 min,即可实现对动物衣原体目的基因片段的有效扩增,并具有高灵敏度的特点,最低检测限为101copies/L,同时利用建立的RPA检测方法和普通PCR方法 对10份临床样品进行衣原体检测,结果阳性检出率完全一致。表明,本研究建立的动物衣原体RPA检测方法操作简单方便、灵敏度高,短时间内能获得准确可靠的诊断结果,对动物衣原体的临床检测和疾病诊断提供了一种新的、可靠的技术支持。

摘要：利用厌氧菌实验室常规检测方法从一例送检病死羊肾脏培养物中分离到一株梭杆菌。通过形态学观察、动物实验、血清中和及胰酶破坏试验,确定分离病原菌为B型诺维氏梭菌。用自行设计的诺维氏梭菌α毒素特异性引物对纯培养物进行PCR扩增检测,PCR扩增得到大小为530bp的目的条带,与常规诊断结果一致;对分离的野生毒株的产毒能力进行了测定分析,野毒分离株在自制的VF厌气肝汤中的产毒能力达4000 MLD/mL,证明该菌株具备生产羊黑疫疫苗用株的潜力。