摘要：目的构建膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)M_3型受体干扰RNA慢病毒载体。方法合成4条M_3受体干扰序列,构建GV118-sh-M_3慢病毒载体,测序验证序列。将GV118-sh-M_3慢病毒载体与质粒p Helper1.0、p Helper 2.0三个载体共转染293T细胞,收集病毒颗粒并用荧光法检测4组病毒滴度。体外原代培养BSMCs,4组GV118-sh-M_3慢病毒(KD1、KD2、KD3和KD4)转染BSMCs,观察绿色荧光蛋白表达并通过RT-PCR、Western blotting法检测各组干扰效率。结果成功构建4个GV118-sh-M_3慢病毒载体,测序结果符合设计序列。4组GV118-sh-M_3慢病毒滴度分别为2×10~8、6×10~8、5×10~8和5×10~8TU/m L。分别转染BSMCs后,KD1组绿色荧光蛋白表达量最高且干扰效率最高。结论成功包装并筛选了GV118-sh-M_3慢病毒载体,为后续进一步研究干扰M_3受体在神经源性膀胱中的作用奠定了基础。

摘要：目的:构建大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)基因短发卡RNA干扰慢病毒载体,并通过感染大鼠原代逼尿肌细胞进行鉴定。方法:根据大鼠TGF-β1基因设计合成3对shRNA序列,将其分别连接至带荧光标签和抗性基因的慢病毒载体pHBLV上,通过转化至DH5α感受态细胞,提取阳性克隆后用DNA测序进行鉴定,选择序列正确的克隆大量扩增并提取重组的慢病毒质粒。将重组慢病毒质粒和慢病毒包装的辅助质粒转染至293T细胞进行慢病毒包被,抗性筛选后通过荧光法对病毒进行滴度测定。用慢病毒感染大鼠原代逼尿肌细胞,通过qRT-PCR和Western blot检测TGF-β1 mRNA和蛋白的表达水平。结果:设计的3种大鼠TGF-β1 shRNA干扰慢病毒载体经测序鉴定构建成功。使用该病毒感染大鼠原代逼尿肌细胞,qRT-PCR和Western blot结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,3种TGF-β1 shRNA感染组的细胞TGF-β1在mRNA和蛋白水平均有不同程度的下调,其中TGF-β1 shRNA 2的蛋白敲低效率最好(57%)。结论:本研究成功构建了大鼠TGF-β1 shRNA干扰慢病毒载体,并在大鼠原代逼尿肌细胞中进行了鉴定,为进一步的基因治疗研究提供了可能性的基础。

摘要：目的了解即将毕业的实习护生对岗前集中培训的需求状况，为新护士岗前集中培训提供参考信息。方法采用描述性研究设计，用自行设计的问卷对246名即将毕业的护生进行岗前集中培训需求的调查结果实习护生岗前集中培训的内容需求都较高；近40％的被调查对象认为3周的培训时间比较合适；对培训人员和培训方式的选择有不同需求；不同学历层次的被调查对象对岗前集中培训内容、培训时间的选择无明显区别。结论毕业前护生对岗前集中培训有很高的需求，所以要在培训内容、培训人员以及培训方式等方面进行科学规范化的安排，统一管理，有效地实施。

摘要：目的探讨Braden量表、NRS 2002对医用粘胶相关性皮肤损伤(MARSI)的预测价值。方法采用便利抽样法,选取2018年1—12月在北京市某三级甲等医院治疗的612例ICU患者为研究对象,采用自行设计的一般资料收集表、Braden量表、NRS 2002收集资料。通过灵敏度、特异度及ROC曲线,评价Braden量表、NRS 2002及两者联合对ICU患者MARSI发生的预测作用。结果612例ICU患者的MARSI发生率为11.3%(69/612)。发生MARSI患者与未发生MARSI患者的Braden量表、NRS 2002评分比较,差异有统计学意义(P<0.01)。Braden量表、NRS 2002及两者联合预测ICU患者发生MARSI的ROC曲线下面积分别为0.564(95%CI 0.477~0.651)、0.670(95%CI 0.601~0.738)、0.724(95%CI 0.651~0.796),且两者联合预测MARSI发生的ROC曲线下面积高于单独应用Braden量表,差异有统计学意义(P<0.01)。Braden量表联合NRS 2002预测MARSI的敏感度和特异度为0.739和0.663。结论ICU患者MARSI的发生率较高,Braden量表联合NRS 2002能有效预测ICU患者MARSI的发生。在临床护理工作中,护理人员可结合量表的评估结果进行恰当的皮肤护理,对患者进行有效预防与处理,保障皮肤安全。