摘要：新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的传染性疾病,而主蛋白酶具有高度的序列保守性,在冠状病毒生命周期中起关键作用,是理想的抗病毒药物设计靶标。本文概述了SARS-CoV-2主蛋白酶的结构和催化反应机制,并根据主蛋白酶抑制剂结构和机制的不同,将已报道的抑制剂分为肽模拟抑制剂和非肽类小分子抑制剂两类,其中以Paxlovid为代表的肽模拟抑制剂,根据其基团可分为基于金属络合物类的Ebselen,基于亚硫酸氢盐类的GC376与GC373,基于醛类的钙蛋白酶抑制剂Ⅱ、Ⅻ和α酮酰胺类的化合物13a、13b。此外,非肽类小分子药物黄芩素也极具潜力。最后对主蛋白酶抑制剂的抗病毒活性、耐药性、稳定性和广谱性等进展进行综述,为广谱抗病毒药物的研发提供参考。

摘要：医学微生物学是医学基础课程的重要组成部分。随着现代信息技术的不断发展,医学微生物学的教学模式正在经历从传统课堂授课到多元化教学模式的转变,新的教学模式应更加注重学生的积极参与性和良好的师生互动性。文章首先分析医学微生物学的教学现状和课程建设方向,随后探索翻转课堂模式在医学微生物学教学中的具体应用。在具体的教学过程设计中,笔者从分析学科特点出发,利用布鲁姆教育目标分类法对“流行性感冒病毒”的教学目标和教学内容进行分类,然后利用翻转课堂的形式完成课内和课外教学任务。这种教学方式不仅能够强化学生课内学习的效果,还能将医学微生物的学习由课堂内延伸至课堂外,显著提升医学微生物学的教学质量。

摘要：教学评价是人才培养质量监测工作的核心。新冠疫情期间,由于线上教学成为人才培养的主要手段,首都医科大学寄生虫学教研室在建设人体寄生虫学在线课程的同时,也建立了相应的在线教学评价体系。本文通过以课堂表现、课后思考题、阶段性单元测试、形态学绘图、设计性实验报告、虚拟仿真在线实验考核等形式为主的过程性评价和以期末在线考试为主的总结性评价相结合的方式对学生进行考核评价,并通过问卷调查反馈学生在线学习效果和教学改进意见。文章就线上教学评价体系的构建和应用的体会进行了总结,以期充分发挥教学评价的评定、反馈和督导功能,提升人才培养质量。

摘要：目的 对2018—2019年北京市柯萨奇病毒A组16型(coxasckievirus A16, CVA16)结构蛋白VP1序列进行变异分析,了解其与手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)流行的关系。方法 对2018—2019年首都医科大学附属北京佑安医院HFMD患儿标本进行逆转录聚合酶链反应(reverse triscription polymerase chain reaction, RT-PCR),测序扩增产物,获得CVA16的VP1全长序列,结合GenBank中北京及国内外CVA16代表性毒株构建系统进化树,分析VP1的氨基酸置换熵值和氨基酸的年替换比例。结果 分子进化分析表明,2018—2019年首都医科大学附属北京佑安医院26株CVA16全部为B1基因型。其中,有16株B1b型,占61.54%;10株B1a型,占38.46%。北京B1a型毒株明显分属早期和近期2个进化分支。B1a型近期分支与国内近期流行B1a型毒株、越南和泰国流行株的亲缘关系较近。通过分析VP1氨基酸置换熵值,发现2007—2019年北京CVA16 B1b型和B1a型毒株的易突变位点不同,分别为VP1-23;VP1-164和VP1-251。2012年起B1b型毒株VP1-23位点的蛋氨酸逐渐替代亮氨酸成为优势氨基酸;而近年北京B1a型毒株呈VP1-164K251I模式,与近年国内其他地区B1a型流行株及越南,泰国毒株一致。结论 2018—2019年北京市CVA16主要流行基因型为B1b型,新出现的B1a型毒株的易突变氨基酸模式与B1b型及早期B1a流行株不同,近期B1a型毒株可能由越南和泰国等国输入并在国内传播、流行。今后应加强对CVA16不同基因型及不同进化分支的动态监测和精细分析,为疫苗设计等疾病防控策略的制定和调整提供科学依据。

摘要：目的建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）荧光定量聚合酶链反应（荧光定量PCR）。方法设计检测HBVDNA（tDNA）和cccDNA特异性引物及探针，用3．44×10^0～3．44×10^9copies／pl含HBV全基因组序列（C基因型）质粒作为标准品，建立荧光定量PCR检测标准曲线。取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本，验证该法灵敏度和特异度。提取肝组织中DNA，取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶（PSAD）酶切；另一部分不酶切作为tDNA和β—globin检测样本，分别进行HBV cccDNA、tDNA和β—globin定量检测，以β-globin为参比，对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化。结果检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3．44×10^0～3．44×10^9copies／μl。检测HBV cccDNA和HBVDNA下限均为3．44×10^0copies／μl。33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0．003copies／cell和0．031 copies／cell；检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性。应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性，提高cccDNA检测法特异度达7．24×10^2倍。对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次，Ct值的变异系数为0．224％-0．609％。结论该方法灵敏度和特异度高，重复性好，可用于检测肝组织中HBV cccDNA。

摘要：医学微生物学是医学教育中实践性与应用性很强的重要学科。自主学习能力、创新思维能力、实验操作能力、团结协作能力以及分析问题和解决问题的能力是新形势下对医学人才的要求。开展医学微生物学第二课堂、设立专题进行查阅文献、讨论并设计实验,进而开展实验进行验证,不仅发挥了学生的主观能动性,巩固了第一课堂理论知识,而且对于各种综合能力的提高均有裨益。

摘要：目的构建蓝氏贾第鞭毛虫alpha-8贾第素(α-8 giardin)特异性锤头状核酶-GCV重组载体。方法采用RNA draw软件对蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素基因序列(GenBank登录号为AY781323)的二级结构进行模拟分析,按照G∶C比例和锤头状核酶设计原则,选取合适的核酶切割靶点,设计特异性锤头状核酶(H8)序列,并将其与犬贾第虫病毒(GCV)连接,获得α-8贾第素特异性锤头状核酶-GCV重组载体(pGCV634/H8/1423)。将载体线性化体外转录产物电击转染至贾第虫滋养体细胞内。提取转染后24 h的各组虫体总RNA,并以其为模板采用RT-PCR验证转染效果及对靶mRNA的切割效果。结果成功设计、合成了蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素mRNA锤头状核酶序列(H8),将其与犬贾第虫病毒载体(GCV)连接,成功构建了pGCV634/H8/1423;RT-PCR实验结果表明,重组载体pGCV634/H8/1423转染贾第虫细胞后24 h可检测到核酶RNA的存在,并实现了对α-8贾第素mRNA高效、特异的切割作用。结论构建的pGCV634/H8/1423能有效转染至贾第虫细胞内,并在其细胞内对α-8贾第素基因的mRNA具有高效、特异的切割作用。

摘要：丙酮酸磷酸双激酶(Pyruvatephos phate dikinase,PPDK)可能是蓝氏贾第鞭毛虫能量代谢中具有催化作用的关键酶桩一。为了进一步探讨该酶在贾第虫能量代谢中的作用,本文采用RNA draw软件分析贾第虫编码PPDK的基因序列并设计特异性反义锤头状核酶(Hammerheade ribozyme),克隆该核酶序列并与犬贾第虫病毒(GCV)连接,构建了载有特异性锤头状核酶的贾第虫病毒重组载体pGCV634/H5/2174。该载体经线性化处理后进行体外转录,转录产物以电击方式转染对数生长期的贾第虫滋养体。提取转染后24h虫体总RNA,并以其为模板进行RT-PCR验证转染效果和对靶mRNA的切割效果。结果初步证实了该载体对虫体细胞内编码PPDK的mRNA具有切割作用。

摘要：在现代网络背景下,信息技术在教育领域的不断渗透和发展对当前《医学微生物学》的教学提出了新的挑战。慕课和微课是信息时代发展的产物,是未来高等教育的发展方向,前者是指大规模在线开放课程,后者即微课程,两者均具有传统教学无法比拟的优点。因此,现代《医学微生物学》教学应汲取慕课和微课的精华,将传统课堂教学与慕课、微课相结合,优化教学设计和教学内容,提高教学效果。

摘要：目的探讨新的以实验技能为考查重点的考核模式的效果，为完善病原生物学与免疫学实验课程考核评价体系提供借鉴。方法选择2009级五年制口腔专业学生进行新的考核模式的试点，通过问卷调查，分析评价试行效果。结果大多数学生对新的课程安排和考核方式总体评价较高，在实验设计能力、操作技术、撰写报告能力及创新能力等方面得到明显提高。结论新的课程安排及考核模式优于传统模式，能有效提高学生的综合实验技能。