摘要：目的探讨肝硬化患者非感染性腹水细菌移位（BT）的发生、转归及短期预后。方法在细菌16S核糖体RNA（16S rRNA）基因保守区设计1对细菌通用引物。对87例肝硬化伴非感染性腹水患者的腹水和血清进行PCR扩增，检测细菌DNA作为BT的分子标志，细菌DNA阳性者通过核苷酸测序进一步鉴别细菌的种属。6个月后随访了解临床转归，对其中部分患者进行腹水细菌DNA复查。结果87例肝硬化患者腹水细菌DNA阳性33例，血清细菌DNA阳性12例。腹水和血清中的细菌均以大肠埃希菌为主，同一患者腹水和血清的细菌鉴定结果一致且序列同源性达99％以上。6个月后患者腹水中细菌DNA的检测结果较入组时呈现动态变化。影响肝硬化患者预后的主要因素是肝功能Child—Pugh分级和BT。结论非感染性腹水BT在肝硬化患者体内是一个动态过程，可能形成感染或被机体清除。肝功能Child—Pugh分级和BT的发生影响患者预后。

摘要：随着流式细胞检测技术的发展,仪器检测灵敏度、精度与稳定性不断提升。藻红蛋白(phycoerythrin,PE)荧光标记蛋白的定量检测结果已得到普遍认可。越来越多的研究提示测定样品单细胞表面蛋白的定量有明确临床意义,流式蛋白定量检测的需求正在增加,但是常用的BD QuantibriteTMBeads PE荧光定量方法局限于PE定量标准品,仅能使用PE荧光抗体,无法适应目前多色流式检测的需要。介绍了在多色流式检测中使用系列抗体定量捕获微球QuantumTMSimply Cellular?微球(QSC微球)进行单细胞表面多重蛋白定量的方法。QSC微球最初设计用于细胞表面蛋白定量,但因为其定量结果不稳定且与经典方法差距巨大,无法实际应用。通过比对多种实验条件探索解释并克服QSC微球蛋白定量技术的缺陷。介绍了改进后的多色流式细胞表面蛋白定量方法并展示了新方法获得的人淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD25、CD27、CD28、CD45RA、CD127和CD197蛋白的定量数据,尽管这一技术还有待优化,但其应用前景广阔,可以使多色流式获得跨平台可比较的单细胞多重蛋白表达数据,可以为单细胞多组学研究提供蛋白质指标间的量化关系数据,并且可用于自动荧光补偿计算、荧光溢漏扩散计算、抗体质量监测、多色荧光方案设计等。

摘要：背景:检测血中的神经元特异性烯醇化酶水平可以评估脑损伤的程度。目的:应用血浆神经元特异性烯醇化酶活性的动态变化来评估脑缺血后高压氧治疗效果的最佳时间窗。设计:析因设计。单位:首都医科大学生物化学与分子生物学系。材料:实验于2002-06在首都医科大学附属北京朝阳医院高压氧科实验室进行。取成年雌性SD大鼠54只,随机分成3组:假手术组(n=6),缺血再灌注组(n=24),高压氧组(n=24),后2组又分再灌注6,24,48及96h4个时相点,每个时相点6只大鼠。方法:①造模:以四动脉阻断法建立脑缺血再灌注动物模型,缺血20min后再灌注;假手术组同样手术,但不阻断动脉。②治疗:高压氧组大鼠行高压氧治疗(0.2MPa,吸纯氧45min),6h组在再灌注3h后行高压氧处理1次,其余3个时间点组大鼠在每天同一时间行高压氧处理,直至相应时间点取血。再灌注组和假手术组处于常压空气环境中。主要观察指标:高压氧组及再灌注组分别于再灌注6,24,48及96h取血,假手术组于再灌注24h取血。用酶联免疫吸附法测定血浆中的神经元特异性烯醇化酶活性。结果:经补充后54只大鼠进入结果分析。血浆神经元特异性烯醇化酶水平:假手术组为(1.97±0.09)μg/L;缺血再灌注组6,96h组高于假手术组[(2.80±0.26),(2.40±0.19)μg/L,P0.05)。结论:缺血再灌注损伤导致血浆神经元特异性烯醇化酶水平升高,缺血再灌注组神经元特异性烯醇化酶水平出现6h和96h两次升高,可能与脑缺血过程中出现的急性神经元坏死及其后的迟发性神经元凋亡相关。高压氧治疗作用表现为神经元特异性烯醇化酶水平的恢复比同时相点缺血再灌注组快,以再灌注6h为高压氧最佳治疗时窗。

摘要：目的探讨应用PCR技术检测肝硬化患者腹水细菌移位(BT)的可行性,并通过为期半年的随访了解影响自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者预后的主要因素。方法在细菌16S核糖体RNA(16S rRNA)基因保守区设计1对细菌通用引物,分别对14株标准细菌菌株、白色念珠菌DNA、人基因组DNA、HBV DNA、21例肝硬化合并SBP患者的腹水和血清进行PCR扩增,对腹水和血清细菌DNA阳性者进一步通过核苷酸序列测定鉴别细菌的种属。半年后对入组患者进行随访,了解临床转归,对患者的临床和实验室资料进行分析,了解影响SBP患者预后的主要因素。结果所有14株标准细菌菌株均可见预期370bp左右长度的细菌通用引物DNA条带,而白色念珠菌DNA、人基因组DNA及HBV DNA未见该条带。21例SBP患者腹水细菌DNA阳性19例(90.48%),血清细菌DNA阳性14例(66.67%)。经基因序列鉴定,腹水和血清中的细菌均以大肠埃希氏菌为主,同一患者腹水和血清中的细菌鉴定结果均为同一菌种且序列同源性达99%以上。与SBP患者预后相关的独立预测指标为肝功能Child-Pugh评分。结论应用PCR技术检测细菌DNA具有较高的特异性和敏感性,可用于BT的临床研究。肝硬化患者腹水和血清中移位的细菌来源于肠道,单个细菌克隆参与BT和全身循环过程,且极有可能细菌从肠道直接经肠壁进入腹腔。SBP患者的预后主要取决于基础肝病的严重程度。

摘要：目的:基于新版实验室信息系统(LIS)建设,探讨多院区检验标本流转的安全管理。方法:升级客户机与服务器(C/S)架构的旧版本LIS,采用升级后的新版LIS,结合医院多院区间标本流转实际,设计多院区检验标本流转方案,以标本流程为主线,以全面质量管理为基本要求,对标本全过程管理方式方法调整改造,利用对标本流转的实时监控和可追溯性,保证多院区标本流转的安全。结果:多院区检验标本流转方案的实施,实现了对每个标本各流转环节的全程节点控制和检验标本的闭环管理,规范了标本的交接和接收,避免了标本遗失,从根本上保障了患者权益,标本运送时间由实施前的94 min缩短为73 min,标本损坏率由5%降至2.3%。结论:基于新版LIS的多院区检验标本流转方案可优化实验室检验流程,缩短标本流转时间,完善标本全流程监控,可实现标本的溯源和数字化管理,保障检验标本的流转安全和检验质量。