摘要：背景：大多数肩袖损伤发生于冈上肌腱，由于肌腱组织缺少血管以及肩袖复杂的解剖结构，临床治疗效果非常有限。组织工程技术和干细胞生物学的快速发展为提高肌腱修复质量带来了新的希望。目的：通过生物3D打印技术制备人脐带间充质干细胞/甲基丙烯酸酐化明胶复合支架，观察该支架修复肩袖损伤的效果。方法：(1)体外细胞实验：制备明胶微载体，将人脐带间充质干细胞接种于明胶微载体表面构建组织工程化干细胞。制备甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶打印墨水，使用甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶打印墨水重悬组织工程化干细胞，放入3D打印机的生物墨水容器中进行打印，蓝光照射固化5 min后即得人脐带间充质干细胞/甲基丙烯酸酐化明胶复合支架。通过死活染色、CCK-8实验检测支架内人脐带间充质干细胞的活性。(2)动物体内实验：采用随机区组设计方法将24只SD大鼠随机4组，每组6只：正常组不进行任何处理，肩袖损伤组、单纯支架组、细胞支架组建立冈上肌腱撕裂的肩袖损伤模型，单纯支架组、细胞支架组造模后分别将甲基丙烯酸酐化明胶支架、人脐带间充质干细胞/甲基丙烯酸酐化明胶复合支架植入肌腱损伤处。术后4周，分别进行大鼠行为学测试及肩袖冈上肌腱组织学病理组织形态观察。结果与结论：(1)体外细胞实验：死活染色结果显示，明胶微载体可减轻3D打印过程对人脐带间充质干细胞造成的损伤，随着培养时间的延长，支架内的人脐带间充质干细胞存活率升高；CCK-8实验结果显示，随着培养时间的延长，支架内的人脐带间充质干细胞活性无明显变化。(2)动物体内实验：行为学测试结果显示，相较于肩袖损伤组、单纯支架组，细胞支架组大鼠四肢运动功能明显改善；肩袖冈上肌腱苏木精-伊红与Masson染色结果显示，相较于肩袖损伤组、单纯支架组，细胞支架组肌纤维排列较规律，无明显的炎性细胞浸润，胶原容积百分比降低；免疫荧光染色结果显示，相较于肩袖损伤组、单纯支架组，细胞支架组肩袖冈上肌腱内白细胞介素6、肿瘤坏死因子α蛋白表达明显降低。(3)结果表明，生物3D打印的人脐带间充质干细胞/甲基丙烯酸酐化明胶复合支架可促进肩袖损伤组织修复再生。

摘要：背景:自体骨髓间充质干细胞及骨膜移植等方法可促进关节软骨缺损的修复,但其各自的成软骨能力有限,治疗效果欠佳。目的:观察自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植修复软骨缺损的疗效。设计、时间及地点:随机分组对照动物实验,于2005-08/2007-03在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料:6～8月龄新西兰白兔18只,按随机数字表法分为3组,即骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组及空白对照组,每组6只12个膝关节标本。方法:骨膜复合骨髓间充质干细胞组采用胰酶消化法采集骨髓间充质干细胞进行贴壁培养,加入转化生长因子β1向软骨细胞进行诱导分化,同时进行PKH-26细胞膜免疫荧光标记。在全部兔双侧股骨内侧髁造成直径3mm,深度3mm的全层软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组取同侧胫骨上段内侧骨膜,骨膜生发层朝向骨髓腔覆盖软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组先期缝合3针,向缺损区注入1×109L-1骨髓间充质干细胞细胞悬液20μL,植入细胞后缝合最后1针。单纯骨膜组只进行单纯骨膜覆盖缺损处理;空白对照组只钻孔不作任何处理。主要观察指标:术后6,12周时,对缺损部位进行大体观察、组织学观察、Wakitani评分以及Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交检测。结果:所有缝合骨膜未发现脱落,骨膜复合骨髓间充质干细胞组6周时,软骨缺损已由透明软骨样修复组织填充,12周时修复组织进一步改建,且修复组织中细胞主要为带有PKH-26荧光标记的植入细胞。单纯骨膜组缺损区修复组织为乳白色,表面光滑稍微凹陷,与周围正常软骨组织之间界限清晰;空白对照组缺损区多数比较凹陷,或缺损部位形状不规则,周围软骨组织断裂。术后6,12周时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组Wakitani组织学评分均优于单纯骨膜组和空白对照组(P<0.05),单纯骨膜组的评分优于空白对照组(P<0.05)。同时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组修复组织内细胞周围基质Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交染色阳性,证实修复组织内的细胞为植入细胞。结论:自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植可形成透明软骨样修复组织修复关节软骨缺损。

摘要：目的 :系统评价髌骨骨折内固定术中应用金属与非金属材料的临床疗效。方法 :计算机搜索PubMed、EMBASE、Web of science、中国知网(CNKI)和万方数据期刊全文数据库(Wanfang data)发表的对于金属和非金属材料在髌骨骨折术中应用进行比较的病例对照研究,检索时间从建库至2018年6月。由2名研究员按照纳入和排除标准独立筛选文献,提取资料,采用非随机干预性试验偏倚风险评估工具(risk of bias in non-randomised studies of interventions,ROBINS-I)进行文献质量评价。采用RevMan 5.3软件对两种方法术后再手术率、术后临床康复优良率、术后并发症发生率进行Meta分析。结果:最终纳入9个符合条件的回顾性队列研究,共493例。Meta分析结果显示:非金属植入物和金属植入物之间内固定失败再手术率无显著差异[OR=0.52,95%CI(0.25,1.08),P=0.08]。接受非金属植入物后,患者术后临床康复优良率高于接受金属植入物[OR=3.34,95%CI(1.67,6.71),P=0.000 7],总并发症发生率低于接受金属植入物[OR=0.21,95%CI(0.07,0.60),P=0.003]。当去除钢丝克氏针断裂及其产生的皮肤刺激症状并发症后,非金属相关并发症发生率比较,差异无统计学意义[OR=1.08,95%CI(0.45,2.56),P=0.86]。结论:非金属植物可提供与金属植物相同的内固定成功率,且可通过降低金属植物相关并发症的产生,提高患者术后康复优良率。

摘要：目的:构建小鼠S0X9基因干扰的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质干细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质干细胞中的表达影响。方法:针对小鼠SOX9基因序列,设计RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的双链DNAoligo连入酶切后的RNA干扰载体上,构建Lenti-SOX9-siRNA-EGFP载体,鉴定扩增。利用SOX9基因沉默载体体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率。同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达。结果:成功构建了Lenti-SOX9-siRNA-EGFP,SOX9基因沉默慢病毒载体,能高效转染小鼠骨髓间充质细胞。RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞基因表达沉默。结论:利用慢病毒结合RNA干扰技术敲减小鼠SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质干细胞,且SOX9基因在小鼠骨髓间充质干细胞中发生了沉默,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础。

摘要：软骨细胞凋亡在骨关节炎的病理进程中起着重要的作用,对软骨细胞凋亡的研究近年来也成为研究的热点。在实验研究中,往往需要通过一定的途径来诱导软骨细胞的凋亡,以此建立体外软骨细胞凋亡模型,并进行凋亡检测。本文综述了常用的细胞形态学、流式细胞术、DNA断裂的分子生物学检测以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase-3)检测方法的原理,并阐述各方法的灵敏性、特异性以及局限性。软骨细胞凋亡受多方面因素的影响,体外常用于诱导软骨细胞凋亡的方法有多种,原理各异,实验研究中应结合各自的实验目的、实验设计及实验条件等综合考虑。在凋亡检测中,由于各种检测方法作用机制的不同及各自的灵敏性、特异性和局限性,需结合多项定量、定性的指标反复加以验证才能得出更为客观、可靠。

摘要：目的 :观察平面诱导培养条件下,等轴周期性牵张应变刺激对小鼠BMSCs成软骨分化早期的影响,探讨等轴周期性牵张应变刺激在软骨分化过程中早期的作用机制。方法:选取4周龄KM小鼠16只,雌雄不限,平均体重19.5 g(17~21 g),提取骨髓间充质干细胞,体外培养至第3代,种植于Bio Flex细胞培养板,根据实验设计分6组:空白组,普通培养液培养8 d,不给予等轴周期性牵张应变刺激;对照组,成软骨诱导分化培养液培养8 d,不给予等轴周期性牵张应变刺激;实验组,实验组又分4组,均使用成软骨诱导分化培养液培养8 d,期间分别给与1、3、5、7 d等轴周期性牵张应变刺激。于培养第8天收集各组细胞,采用RT-PCR分析SOX9、Col-Ⅱ及ROCK1 m RNA的相对表达量,采用CCK-8法对各组细胞行增殖率检测,使用糖胺聚糖Elisa试剂盒检测上清液糖胺聚糖含量,行番红O及阿利新蓝染色观察细胞外基质(ECM)变化,正态计量资料采用均数±标准偏差表示,对照组与空白组比较采用配对样本t检验,实验组与对照组比较采用单因素方差分析。结果:(1)培养8 d后,对比对照组,实验组中随加载时间延长,SOX9、Col-Ⅱm RNA相对表达量呈逐渐增高趋势(P<0.05),而ROCK1 m RNA相对表达量呈下降趋势(P<0.05);对比空白组,实验组及对照组的ROCK1 m RNA相对表达量均增加(P<0.05)。(2)随加载时间延长,实验组出现先降后升趋势,但是对比空白组及对照组均增高,对照组较空白组明显下降。(3)通过对最后1次换掉的培养基做糖胺聚糖浓度的Elisa检测,实验组内糖胺多糖的分泌量逐渐增加,加载7 d组含量变化较其他组差异有统计学意义(P<0.05);与空白组比较,实验组及对照组糖胺多糖的分泌量明显增加(P<0.05)。(4)番红O及阿尔新兰染色显示,实验组有成软骨分化趋势,形状随时间加载均逐渐变长,均较对照组明显;实验组内PCM、Col-Ⅱ、GAG含量随力学刺激天数增加逐渐增多均较对照组明显。结论:平面诱导培养条件下,在BMSCs成软骨分化早期,等轴周期性牵张应变刺激可以促进骨髓间充质干细胞增殖以及向软骨细胞分化,等轴周期性牵张应变刺激可能是通过抑制Rho/ROCK1信号通路来促进成软骨分化。

摘要：单间室膝关节置换术（UKA）是指单纯置换膝关节内侧或外侧胫股关节面的手术。针对单间室膝骨性关节炎它是有效治疗方法，同时也是全膝关节置换术（TKA）或高位胫股截骨术（HT0）的有效替代方法。随着手术指征的认识、假体设计的完善、手术技巧的改进．UKA取得满意的临床效果，中远期假体生存率与TKA相近。微创概念、计算机导航、机器人辅助等新技术的应用，使UKA的优越性得到明显体现，受到越来越多的关注。本文就目前UKA适应证、禁忌证、手术新进展及与TKA、HTO相比的优缺点进行综述。

摘要：全髋关节置换术（totalhip arthroplasty，THA）是目前缓解髋关节疼痛、改善功能、矫正畸形最常用的手术。尽管随着假体设计理念的不断完善和制造工艺的不断改良，患者的满意度和假体的生存率逐渐提高，但仍有一定比例的患者由于假体无菌性松动、感染、脱位、磨损等并发症而行翻修手术。据瑞典关节登记系统统计，2008年瑞典共收治1．6万余例THA，其中10．6％为翻修手术，回顾1999年至2008年的翻修病例，数量增加了约20％。

摘要：目的基于一种新型髋关节假体柄设计,分析其在站立、行走、跑步和坐姿工况下的应力分布差异。方法基于人体CT数据,建立7组不同柄植入后的髋关节模型,利用有限元分析方法计算不同工况下假体柄和股骨应力情况。结果与植入传统假体柄相比,站立时新型假体柄植入后假体柄应力峰值降低23%、股骨应力降低72%。7种假体柄结果显示,假体柄高度为86.5 mm的新型设计最符合患者需求。多工况结果显示,患者处于坐姿,柄承受应力最小,使用寿命更长。结论新型假体柄有助于延长假体使用寿命,减小骨损伤风险。髋关节假体模型为后期柄的设计及患者术后康复提供科学理论支撑。