摘要：对猪瘟RT PCR诊断方法与兔体交叉试验诊断方法的相关性进行了研究。通过计算机软件设计了猪瘟病毒E2基因保守区的 1对引物 ,建立了猪瘟病毒RT PCR检测方法 ,同时应用兔体交叉试验进行对比 ,对 7份临床送检病例进行了检测。结果表明 ,二者的符合率为 10 0 % ,但RT PCR可大大降低检测所用的时间 ,更便于猪瘟的快速诊断。

摘要：目的应用RED同源重组技术构建表面展示链球菌Gap C1-150 aa(Gap C1)的大肠埃希菌,为进一步构建大肠埃希菌表面展示重组菌株奠定基础。方法根据Gen Bank中登录的gap C基因序列(GI:30348860)设计引物,以质粒p KD3、p QE30/lpp-omp A-gap C为模板进行PCR扩增、融合,获得融合片段,转化入含p KD46质粒的大肠埃希菌HB101中,利用p KD46编码的RED系统将融合片段重组入基因组中,经氨苄西林(Amp)和氯霉素(Cm)抗性筛选,获得去除p KD46质粒的重组菌(HB101LOG)。对重组菌株进行PCR、Western blot、流式细胞术、荧光显微镜及生物学特性检测。结果 PCR结果显示,重组菌株构建正确;重组大肠埃希菌HB101LOG在菌体表面表达了外源蛋白Gap C1-150 aa;激光共聚焦显微镜观察到HB101LOG可见明显的绿色荧光,HB101未见绿色荧光;重组菌株HB101LOG和HB101的生长曲线符合大肠埃希菌的生长规律。结论应用RED系统成功构建了能展示链球菌Gap C1-150 aa的大肠埃希菌重组菌株。

摘要：金黄色葡萄球菌(***)表达的菌体表面纤连蛋白结合蛋白A(FnbpA)在感染早期与宿主细胞粘附过程中起关键作用,将其免疫小鼠后能够诱导机体产生强烈的Th1和Th17反应。但FnbpA诱导Th1和Th17反应的CD4^+ T细胞表位尚不清楚。本研究根据FnbpA二级结构及其与MHCⅡ分子的结合能力对CD4^+ T细胞表位进行预测与分析,选择并合成7个候选CD4^+ T细胞表位肽。将每个表位肽分别对FnbpA免疫的C57BL/6小鼠CD4^+ T细胞进行体外刺激,通过检测CD4^+ T细胞增殖及其分泌的细胞因子水平对免疫优势表位进行初步鉴定。再以初步鉴定的优势表位肽段免疫小鼠,并检测其诱导的特异性细胞免疫应答水平。结果表明,表位肽F5(FnbpA488-505)能够显著诱导CD4^+ T细胞增殖并分泌高水平IFN-γ和IL-17A,而且F5在不同***菌株中高度保守。表明FnbpA_(488-505)是诱导CD4^+ T细胞分化为Th1/Th17的T细胞表位。本研究为***的FnbpA表位肽疫苗的进一步设计提供了实验依据。

摘要：根据GenBank上发表的牛肌生成抑制素(MSTN)基因编码序列设计引物,扩增牛的MSTN基因,将其与pET32a(+)质粒连接,构建pET-MSTN重组质粒,重组菌经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达,表达的重组蛋白分子量大小约为60.4ku,表达蛋白经纯化、复性后接种小鼠,结果复性高剂量组小鼠体重的增长与其他各试验组及对照组之间差异显著,而其他各试验组与对照组之间体重增加差异不显著。

摘要：羊传染性脓疱皮炎(Contagious ecthyma)俗称羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)引起的一种人畜共患传染病。ORFV是痘病毒科副痘病毒属的代表性成员之一,具有鲜明而独特的种属特征。在进化过程中,病毒捕获一系列免疫调节/致病性相关基因,通过各种表达产物协同性地限制宿主的免疫清除效应,以庇护种群的增殖和病毒粒子成熟。本文综述了ORFV的分子特征,着重分析了病毒主动干预宿主免疫应答、设计免疫逃逸的分子机制。明确病毒的免疫调节/致病性元件及其效应途径,有利于加深对ORFV生物学特性的理解,同时有利于针对Orf建立有效的防制。

摘要：为了制备产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)987P和K88的二价重组乳杆菌,并检测其免疫效果,试验根据ETEC C83916株(GenBank登录号M35257.1)987P基因序列和ETEC C83902株(GenBank登录号M29375.1)K88基因序列设计合成特异性引物,将PCR扩增的987P、K88基因连接至穿梭载体pHCE1LB-pgsA(简称pLA),热激法转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经PCR、双酶切鉴定为阳性的重组质粒电转化入干酪乳杆菌中,通过Western-blot、间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。将50头健康的初生仔猪分为试验组和对照组,试验组初生仔猪通过口服免疫重组干酪乳杆菌菌液(浓度为1×10^(9) cfu/mL),对照组口服等体积生理盐水,连用5 d,在免疫前称量体重,并于免疫前(第0天)及免疫后第5,10,15,20,25天采集血液和粪便,采用ELISA检测血清IgG抗体和粪便中sIgA抗体水平;免疫后10天试验组和对照组分别随机选取20头仔猪用ETEC C83916株和C83902株进行攻毒,计算攻毒保护率,试验结束后称量仔猪体重。结果表明:成功构建了重组菌pLA-987P-K88/***,Western-blot检测显示pLA-987P-K88/***在85 ku处出现明显条带,在荧光显微镜下pLA-987P-K88/***可观察到明显的绿色荧光。初生仔猪免疫重组菌pLA-987P-K88/***后5~25 d,IgG抗体和sIgA抗体水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。重组菌对ETEC C83916的攻毒保护率为90%,对ETEC C83902的攻毒保护率为80%。说明ETEC 987P、K88二价重组干酪乳酸菌可以有效抑制仔猪感染ETEC,大大降低新生仔猪腹泻率。

摘要：Mcpherron等在研究转化生长因子-β(TGF-β)超家族时,用该家族的蛋白质同源保守序列设计引物,以小鼠基因组DNA为模板,应用PCR扩增得到一种新的生长因子,命名为生长分化因子-8(GDF-8).

摘要：金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜致病菌,IsdD属于金黄色葡萄球菌Isd系统中的重要成员。本研究根据Gen-Bank报道的金黄色葡萄球菌IsdD基因序列设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板扩增出目的片段Is-dD,将其用NcoⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET32a(+-)IsdD。序列分析结果显示,目的基因序列与网上的IsdD序列相比核苷酸序列和氨基酸序列同源性均在98%以上。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌*** BL21中并成功诱导表达出大小为61.3ku的蛋白,这为下一步研究IsdD蛋白的结构和功能奠定了良好基础。

摘要：选用平均体重(21.11±3.5)kg的陶赛特(公)和萨福克(公)与东北半细毛羊的杂交后代公羊各12只,按单因素随机区组设计,随机分为4组,每组设6个重复,分别饲喂快速负压氨化罐处理、负压袋装处理、常压袋装处理和未氨化稻草的对照组,测定每一种处理的表观消化率和羔羊的生产性能;选用4只体重40 kg左右的健康瘘管公羊,按4×4拉丁方设计,测定稻秸各养分瘤胃48 h消失率。结果表明:各氨化组稻草的DM、CP、DNF和ADF的表观消化率的变化趋势相同,由高到低顺序为负压袋装处理组>快速负压氨化罐处理组>常压袋装处理组>对照组。各氨化组稻秸在瘤胃内DM、CP、NDF和ADF的48 h消失率均极显著高于未处理稻秸(P<0.01)。各氨化组的粗饲料采食量和平均日增重显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,快速负压氨化罐处理可以代替传统的氨化方式,不仅处理效果较理想,且氨化时间短,适合各类秸秆氨化的工业化生产。

摘要：运输是猪宰前最易受到应激的阶段。与运输应激相关的问题有猪的皮肤擦伤、死亡、脱水疲劳和宰后肉质的下降等。论文重点阐述和分析装载密度、运输时间、极端温度、驱赶方式和卡车设计等因素对猪福利和宰后肉质的影响,并提出运输过程中改善猪福利和宰后肉质的措施。