摘要：研究生培养方案既是质量保证体系,也是培养研究生的基本教学文件。研究生人才培养对于生命科学领域的发展具有重要意义,它既是高校研究生培养质量的必要前提,也是研究生教育改革创新的必然要求。该文以黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院生物学一级学科研究生培养方案建设现状为例,对当前研究生培养方案所存在的问题进行了深入剖析,并提出了针对性的解决对策。

摘要：为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM基因序列设计和筛选了ERA检测引物和探针,分别建立ERA显色法、荧光法、试纸条法3种可视化快速检测方法,并评估其特异性和灵敏度,以及在市售样品检测适用性和准确性。结果显示,建立的方法对3株唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病型菌株均有扩增,其他常见的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍尔德氏菌均无扩增,说明检测方法的特异性良好。3种方法的检出限均为10^(-2)ng/μL,灵敏度较好。采用建立的3种可视化快速检测方法对15份市售样品进行检测,检出阳性2份,检出率为13.3%。该结果与国标方法的检测结果一致,说明方法具有较好的适用性和准确性。本研究建立的基于体温扩增技术的显色法、荧光法和试纸条法具有较高的特异性及灵敏度,37℃体温扩增15 min左右即可获取检测结果,且裸眼可视,可为食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种的现场可视化快速筛查提供新型简便的策略。

摘要：“细胞生物学”作为生物类专业的主干课程,具有学科广泛、应用性强的特点,课程具备辐射广泛的独特优势,便于在课程中完善思想政治教育系相关内容。文章以OBE(成果导向教育)的教育理念为基础,对细胞生物学课程的特点和课程思政的内容进行了梳理分析,并进一步挖掘和提炼前沿知识和思政教育的新思路,旨在为细胞生物学课程的知识传播和思想引领提供有益的借鉴和参考。

摘要：课程思政作为立德树人的根本遵循,对于提升人才培养品质具有至关重要的意义。发酵工程原理与技术是一门研究生学位课程,其目的是运用生物学知识和工程概念,解决生物技术产业化过程中涉及发酵和生产的关键问题。文章通过有效地挖掘该课程中的思政元素并融于教学当中,形成“融教书育人、知识传授、能力培养、素质教育于一体”的教学理念,以期提高课程教学吸引力和思政育人效果。

摘要：NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。

摘要：种子包衣可以预防大豆根系病虫害发生,促进幼苗生长和增加大豆产量。生物种衣剂的应用符合国家农药减施增效的政策,生物种衣剂替代化学种衣剂是今后发展的方向。利用筛选获得的解淀粉芽孢杆菌HJ-1、放线菌M1-4与成膜剂复配制成生物种衣剂,对大豆绥农28种子进行包衣处理,以成膜剂处理为对照,并与化学种衣剂处理比较,采用随机区组试验设计,研究微生物包衣处理对大豆株高、叶绿素等主要生长性状及产量性状的影响。结果表明:化学种衣剂和HJ-1种衣剂显著提高大豆出苗率,处理间无显著差异;M1-4显著提高了大豆苗期根冠比;HJ-1显著提高花期和鼓粒期大豆株高,M1-4显著提高鼓粒期大豆株高;化学种衣剂显著提高花期大豆叶面积指数,HJ-1种衣剂显著提高荚期大豆叶面积指数;田间试验表明HJ-1和M1-4可以显著提高单株荚数对其他产量性状无显著影响,化学种衣剂和HJ-1、M1-4两种生物种衣剂均能提高大豆产量,第一年产量分别提高47.39%、34.16%和40.60%,第二年,化学种衣剂、HJ-1和M1-4处理后大豆产量与成膜剂处理相比提高26.92%,13.86%和32.81%,生物种衣剂处理与化学种衣剂处理相比对产量的影响并无显著差异。在大豆生产中,生物种衣剂更符合国家农药减施增效的政策。

摘要：诺如病毒(NoV)是引起全球急性肠胃炎疾病的主要病原体之一,极易爆发传播,增加医疗与经济负担。目的:通过重组酶介导等温扩增技术(RAA)开发一种新型的NoV检测方法。方法:根据ISO TS 15216-2-2013、GB 4789.42规定的GⅠ和GⅡ NoV检测靶标所对应的cDNA序列,设计并筛选最佳RAA引物及探针,确定其对其它常见食源性腹泻病毒的特异性。通过优化确定最短检测时间、反应程序以及反应体系,分析该检测体系下对NoV参考质粒和真实样本检测的灵敏度,从而建立GⅠ和GⅡ NoV RAA可视化快速检测方法。结果:所建立的RAA检测方法特异性好,与其它食源性病毒无交叉反应。在保证扩增效率的前提下,优化后的反应程序可将检测时间缩短为10 min左右,反应成本可减少三分之二。对参考质粒和真实样本检测的灵敏度分别达10^(-2)ng/μL和1 ng/μL。结论:本试验建立的两种NoV检测方法特异性强、灵敏度高,且简单、快速、可视,为今后NoV快速检测奠定良好的基础。

摘要：以桑黄为试材,利用粗木屑、细木屑、小麦秸秆、花生秸秆、玉米秸秆、油菜秸秆和大豆秸秆7种主料对桑黄进行培养,采用单纯型格子法进行混料设计,筛选以粗木屑、油菜秸秆和大豆秸秆为主料的配方,对菌丝生长速率、漆酶、多酚氧化酶、纤维素酶、半纤维素酶以及酸性蛋白酶活性进行了测定,分析胞外酶活性与菌丝生长速率之间的相关性,优化适合桑黄生长的配方,以期为桑黄培养配方的筛选提供参考依据。结果表明:不同基质对各胞外酶活性大小有不同的影响,且酶活性大小与菌丝生长速率之间的偶联性较差。优化得出适合桑黄生长的配方为粗木屑41.5%、油菜秸秆41.9%、大豆秸秆16.6%、麦麸20%、蔗糖1%、碳酸钙1%。

摘要：羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)是副痘病毒属(Parapoxvirus,PPV)典型的代表成员,具有鲜明的种属特征。ORFV具有高度的上皮嗜性,并不侵入真皮层,通常导致皮肤或黏膜上皮严重的病理性损伤;并且容易造成继发性感染。近年来,随着ORFV与宿主细胞“互作”机制研究的不断深入,病毒进化的细胞策略初露端倪。为了揭示其较为完整的细胞策略,我们借助“ORFV⁃HOST”(O⁃H)系统全方位阐述病毒与宿主建立的互作关系。本综述旨在挖掘病毒感染期间维持O⁃H系统稳态的目的、意义及其分子机制,为丰富ORFV分子病毒学理论和羊口疮抗病毒设计提供了参考。

摘要：为了制备产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)987P和K88的二价重组乳杆菌,并检测其免疫效果,试验根据ETEC C83916株(GenBank登录号M35257.1)987P基因序列和ETEC C83902株(GenBank登录号M29375.1)K88基因序列设计合成特异性引物,将PCR扩增的987P、K88基因连接至穿梭载体pHCE1LB-pgsA(简称pLA),热激法转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经PCR、双酶切鉴定为阳性的重组质粒电转化入干酪乳杆菌中,通过Western-blot、间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。将50头健康的初生仔猪分为试验组和对照组,试验组初生仔猪通过口服免疫重组干酪乳杆菌菌液(浓度为1×10^(9) cfu/mL),对照组口服等体积生理盐水,连用5 d,在免疫前称量体重,并于免疫前(第0天)及免疫后第5,10,15,20,25天采集血液和粪便,采用ELISA检测血清IgG抗体和粪便中sIgA抗体水平;免疫后10天试验组和对照组分别随机选取20头仔猪用ETEC C83916株和C83902株进行攻毒,计算攻毒保护率,试验结束后称量仔猪体重。结果表明:成功构建了重组菌pLA-987P-K88/***,Western-blot检测显示pLA-987P-K88/***在85 ku处出现明显条带,在荧光显微镜下pLA-987P-K88/***可观察到明显的绿色荧光。初生仔猪免疫重组菌pLA-987P-K88/***后5~25 d,IgG抗体和sIgA抗体水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。重组菌对ETEC C83916的攻毒保护率为90%,对ETEC C83902的攻毒保护率为80%。说明ETEC 987P、K88二价重组干酪乳酸菌可以有效抑制仔猪感染ETEC,大大降低新生仔猪腹泻率。