摘要：基于玉米胚乳中母本和父本DNA的2∶1的剂量关系,利用20个InDel标记在荧光毛细管电泳平台上对玉米进行亲子鉴定并得到玉米杂交种三联体的指纹数据。研究利用8个玉米杂交种单株的胚及胚乳DNA得到在11个杂和位点上每个基因型的峰面积,并计算得出胚和胚乳各自的等位基因扩增比(左峰面积/右峰面积)。通过比较发现,胚及胚乳之间的等位基因扩增比具有显著差异。在其中4个标记上(IDP054、IDP151、IDP161、IDP238),胚乳DNA等位基因扩增比较胚DNA低,胚乳的右峰面积较大,说明右峰代表基因型的DNA含量较高,判断该位点右峰代表的基因型为母本基因型。依此判断另外7个标记的左峰代表基因型为母本基因型,最终得到玉米杂交种三联体的指纹数据,通过与杂交种双亲的指纹进行比对验证判断结果的正确性。

摘要：采用响应面法研究副干酪乳杆菌冻干菌粉制备过程中保护剂及冻干厚度对菌体细胞存活率的影响。首先,以脱脂乳为基础保护剂研究其添加量及冻干厚度;然后,通过Plackett-Burman设计筛选保护剂的复合成分;最后,通过响应面分析确定保护剂各组分及冻干厚度的最佳配比。结果表明:当脱脂乳质量浓度为10.49%、葡萄糖质量浓度为4.22%、冻干厚度为0.30cm时,菌体细胞存活率达到了最大值94.9%,副干酪乳杆菌在冷冻干燥过程中得到了很好的保护。

摘要：以14个加拿大早熟玉米群体获得的45个改良系为材料,与黑龙江省部分早熟玉米种质的5个自交系按照NCⅡ设计组配测交组合,经多点鉴定研究加拿大早熟群体改良系的配合力及杂种优势关系。结果表明,群体EP6、EP7、EP8、EP14和EP15的改良系SW1030、SW1052、SW1271、SW1274、SW1183、SW1072、SW1054、SW1069单株产量等综合性状一般配合力(GCA)效应表现较好;45个改良系分属于兰卡斯特、瑞德、塘四平头、PA和大黄种质群;群体改良系多与Lancaster类群、Reid类群具有较好的杂种优势。

摘要：在多种仪器分析中,人们在作定量分析之前,首先要检查检测系统对所测组分的线性范围,以免误在线性范围以外定量而得出错误结果,并且目前大多数的国产分析仪器不带有数据处理系统,因此,绘制标准曲线,确定曲线参数十分重要,但这项工作既麻烦又费时,为此。

摘要：采用响应面法优化副干酪乳杆菌增菌培养基。首先利用Plackett-Burman设计法研究了培养基各组分对响应值的影响程度,分析表明蔗糖,酵母膏和硫酸镁对菌体密度的影响显著。然后利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。最后在上升最高点处由中心组合试验和响应面分析确定就其最佳含量。结果表明优化后的菌体密度为5.16×109,与预测值5.18×109非常接近,同优化前相比菌体密度提高了一个数量级,副干酪乳杆菌的产量得到显著提高。

摘要：盐分对植物的伤害主要是Na＋引起的，而Na＋／H＋逆向运输蛋白催化Na＋／H＋逆向跨膜运输，从而使质膜上Na＋运出细胞和液泡膜中的Na＋区隔化。这是植物尤其是盐生植物抵御盐胁迫的主要方式之一。根据不同植物编码液泡膜逆向运输蛋白基因的保守序列，设计简并引物，采用RT—PCR和RACE技术，首次从新疆盐生植物车前（Plantagomaritima）中克隆到Na＋／H＋逆向运输蛋白基因的cDNA全长2464bp，命名为PmNHXl（GenBank登录号：EU233808），该基因编码区长为l662bp，编码553个氨基酸，理论分子量为61．16kDa，等电点为7．22。数据分析结果显示，该蛋白质主要定位于液泡膜上，由12个序列保守的跨膜结构域组成，其中TM3跨膜结构域上存在“LFFIYLLPPI”一氨氯吡嗪咪结合域，并且该位点与Na＋有竞争作用。PmNHX1逆向运输蛋白与其他植物逆向运输蛋白的氨基酸同源性为64％～80％。通过生物信息学方法对其理化性质和功能分析进行预测，这为进一步研究转耐盐基因PmNHX1及其功能鉴定奠定了基础。

摘要：大麦谷粒是受多个数量性状基因(QTL)控制的复杂性状,而RINGE3泛素连接酶在决定大麦产量和蛋白质降解途径中起到极为重要的作用。本研究按照同源克隆的方法,依据水稻、拟南芥、玉米、小麦和酵母等E3泛素连接酶保守区域设计引物,采用RT-PCR方法从西藏大麦中克隆出产量相关基因HvYrg1全长cDNA序列,包括完整的开放阅读框架(ORF)1275bp,编码蛋白为424个氨基酸(GenBank ***333863)。同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的水稻GW2基因同源性最高为86%。以植物表达载体pCAMBIA2300-35s-OCS质粒为基础,构建由35s启动子调控的HvYrg1基因的RNA干扰载体pCAM-RNAi-HvYrg1。这一载体的成功构建为研究该基因在作物产量的功能鉴定打下了很好的基础。

摘要：黑麦草中木质素的结构、含量是决定其饲用品质的主要因素。漆酶是木质素生物合成中的关键酶之一,属于多铜氧化酶基因家族。根据报道的植物漆酶编码基因的氨基酸序列中铜离子结合域及N-端糖基化位点两个保守区设计4对引物,以黑麦草总DNA为模板,经PCR扩增、克隆、测序后得到3个有效序列,分别命名为Lac10-1、Lac8-1和Lac11-1。序列分析表明,3个基因片段的编码蛋白不仅含有保守的蓝铜氧化酶结合区域HAH和N-末端糖基化位点,而且分别与黄杨、黑麦草中分离的漆酶编码蛋白的氨基酸序列具有较高的同源性。因而,推断克隆到的3个基因片段是黑麦草漆酶基因家族的成员。

摘要：漆酶是木质素生物合成途径的关键酶,其高度保守的铜离子结合区以及N末端糖基化位点使利用同源克隆技术成为可能。本研究利用GeneBank中公布的黑麦草漆酶基因全长cDNA序列及在玉米数据库中的比对结果设计特异引物,以8份AS系列玉米自交系为模板进行PCR筛选。经过提取质粒、测序及对推导的氨基酸序列进行比对,发现所克隆基因片段中含有保守的H-A-H基元和N末端糖基化位点,为以后玉米漆酶基因全长的克隆以及饲用玉米改良打下了基础。

摘要：昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利用RT-PCR扩增出了玉米螟细胞色素P450基因cDNA片段,将其克隆到pMD19-T载体进行序列测定.测序获得了编码213个氨基酸残基的641 bp的DNA片段,命名为OfP450(GenBank登录号:EU807990);与已公布的棉铃虫、家蚕、欧洲防风草结网毛虫、小菜蛾和黑腹果蝇等的细胞色素P450氨基酸序列进行比较,其一致性分别为55%、50%、49%、44%和31%.将植物次生物质棉酚、丁布添加入人工饲料中,对玉米螟进行了饲喂实验,采用优化半定量RT-PCR,以18SrRNA为内标,RT-PCR检测进食棉酚、丁布植物化合物的玉米螟中肠P450基因的转录.结果表明,其转录水平能被棉酚、丁布显著诱导.提示本实验克隆的玉米螟细胞色素P450对植物次生物质的代谢作用与P450表达量呈正相关.该研究为下一步将植物介导的RNA干扰技术应用于害虫生物防治提供坚实的基础.