摘要：目的探究沉默乙酰肝素酶(Heparanase)基因对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响及机制。方法选取60只SD大鼠,随机分为Control组、I/R组、I/R+shRNA-NC组和I/R+Heparanase-shRNA组各15只。除Control组外,其余各组制备I/R模型;设计Heparanase靶向RNA干扰序列合成靶序列的双链DNA,转染至大鼠体内;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Heparanase mRNA及蛋白表达,确定干扰成功;分别检测各组胱天蛋白酶心脏功能及心肌损伤标志物、氧化应激物质及炎症因子指标;采用苏木素-伊红(HE)和TUNEL染色观察各组心肌病理变化;采用Western检测凋亡蛋白胱天蛋白酶(Caspsae)-3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果Control组心肌组织、心肌纤维及其肌外膜均结构完整且形态正常;I/R组和I/R+shRNA-NC组心肌纤维呈现弯曲状态,肌红蛋白出现溶解,同时心肌肌细胞核固缩、溶解,肌束膜出现明显破裂;I/R+Heparanase-shRNA组心肌组肌外膜较为完整、心肌纤维弯曲显著改善。相比Control组,I/R组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白(cTn)I、心肌细胞凋亡指数、切割后Caspase-3/Caspase-3(cleaved cas3/cas3)、Bax/Bcl-2比值、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著升高,心率(HR)、左心室射血分数(LVEF)、左室壁厚度(LVWT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.05);相比I/R+shRNA-NC组,I/R+Heparanase-shRNA组CK-MB、Mb、cTnI心肌细胞凋亡指数、cleaved cas3/cas3、Bax/Bcl-2比值、MDA、IL-6、TNF-α水平显著降低,HR、LVEF、LVWT、SOD水平明显升高(P<0.05)。结论沉默Heparanase基因可缓解I/R大鼠心肌细胞凋亡情况,其作用机制可能是通过抑制氧化应激及炎症反应,下调Caspase-3、Bax表达,上调Bcl-2表达,从而减轻心肌细胞凋亡。

摘要：采用正交实验设计优化了槲皮素自乳化微丸的制备工艺。以圆整度、收率、载药量为考察指标对槲皮素自乳化微丸进行了固体化考察,结果为滚圆速度为600rpm,滚圆时间为4分钟,MCC用量为50%,得到圆整度好、收率高、载药量大的自乳化微丸。