摘要：目的:构建刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)及棒状体蛋白18(rhoptry protein 18,ROP18)的真核表达重组质粒,并在真核细胞中表达目的蛋白。方法:设计SAG1、ROP18的特异引物,采用RCR技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码SAG1、ROP18基因片段,经克隆至p TG19-T载体后,亚克隆至真核表达载体p3×FLAG-Myc-CMVTM-24,构建真核表达重组质粒p3×FLAG-Myc-CMVTM-24-SAG1和p3×FLAG-MycCMVTM-24-ROP18。将构建好的真核表达重组质粒转染人肾上皮细胞系293-T细胞,分析转染细胞的表达情况。结果:PCR扩增弓形虫SAG1和ROP18基因片段分别为1 011 bp和1 665 bp,与预期大小相符。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定结果均正确,通过RT-PCR和蛋白质印迹技术鉴定出重组质粒p3×FLAG-Myc-CMVTM-24-SAG1和p3×FLAG-Myc-CMVTM-24-ROP18在293-T细胞中表达。结论:成功构建了真核表达质粒p3×FLAG-Myc-CMVTM-24-SAG1和p3×FLAG-Myc-CMVTM-24-ROP18,该重组质粒能够在真核细胞中表达目的蛋白。

摘要：目的观察两种不同治疗参数下气压弹道式体外冲击波对脑卒中后下肢痉挛的疗效及差异,为今后气压弹道式体外冲击波治疗脑卒中后肌肉痉挛提供临床试验参考。方法采用二阶段交叉设计的试验方法,选择12例脑卒中后下肢肌肉痉挛患者,随机平均分为两组(A组和B组,每组各6例患者),在常规治疗的基础上,接受冲击波治疗1次,A组参数为(参数设置为压力强度1.0 bar,频率8 Hz),B组参数为(参数设置为压力强度1.6 bar,频率20 Hz),冲击次数均为3000次,在经过10天的清洗期后,两组交换,原A组的患者接受B组参数冲击,原B组的患者接受A组参数冲击。比较治疗前、治疗结束后即刻两组患者踝关节被动活动度(positive range of motion,PROM)、改良Tardieu量表(modified Tardieu scale,MTS)。结果两组的PROM和MTS中R1较治疗前均有所增加(P0.05),两组比较PROM和R1,虽A组均数略低于B组,但两组比较差异无显著性。两组患者在整个试验过程中均未观察到任何不良反应。结论单次气压弹道式冲击波对脑卒中后腓肠肌痉挛有即时的缓解作用,但其最佳治疗参数仍有待进一步研究。

摘要：目的用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫。方法提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA。根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术的原理，设计4条隐孢子虫特异引物，利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA，以正常牛粪DNA为阴性对照。LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果，绿色判为阳性，棕色判为阴性，对LAMP产物进行电泳分析，观察其特征条带的情况。结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后呈绿色，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色。隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物。结论LAMP方法敏感、特异、简便，可用于检测牛粪中的隐孢子虫。

摘要：提高生物医学研究结果的可重复性是一项重大挑战,研究人员透明且准确地报告其研究过程有利于读者对该研究结果的可靠性进行评估,进而重复该实验或在该成果的基础上进一步探索。ARRIVE 2.0指南是2019年英国国家3Rs中心(NC3Rs)组织发布的一份适用于任何与活体动物研究报告相关的指导性清单,用以提高动物体内实验设计、实验实施和实验报告的规范性,以及动物实验结果的可靠性、可重复性和临床转化率。ARRIVE 2.0指南的使用不仅可以丰富动物实验研究报告的细节,确保动物实验结果信息被充分评估和利用,还可以使读者准确且清晰地了解作者所表述的内容,促进基础研究评审过程的透明化和完整性。目前,ARRIVE 2.0指南已经被国际生物医学期刊广泛采纳。本文是在国际期刊遵循ARRIVE 2.0指南的最佳实践基础上,对2020年发表于PLoS Biology期刊上的ARRIVE 2.0指南完整解读版(原文请见https://***)进行中文编译(第一部分包括前言和“关键10条”里的“研究设计”“样本量”“纳入和排除标准”),以期促进国内研究人员充分理解并使用ARRIVE 2.0指南,提高实验动物研究及报告的规范性,助推我国实验动物科技与比较医学研究的高质量发展。

摘要：目的探讨基于空间分析基础上的湖北钉螺群体遗传变异,构建湖北钉螺空间分布和遗传信息数据库及其管理系统,为相关研究、信息管理和开发利用提供先进的方法和手段。方法采集现场钉螺样本,以逸蚴法鉴定阴性钉螺。利用Microsoft SQL2000建立采集点空间分布数据库、样本数据库和遗传信息数据库,用Visual Basic 6.0建立相应管理系统。结果完成现场钉螺收集,初步建立了10个省73个采集点的数据库,676个记录的样本数据库和部分遗传信息数据库,管理系统实现添加、查询、删除、统计和数据导出导入等功能,界面清晰,操作简便。结论建立的湖北钉螺空间遗传信息管理系统对湖北钉螺空间分布和群体遗传研究具有一定的应用价值,但还需进一步补充和完善相关数据。

摘要：目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。方法:根据HerpUD1基因序列设计shRNA片段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。结果:成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组(阴性对照组)相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[(0.15±0.05)vs(1.00±0.08),P0.05)。结论:HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。

摘要：目的探讨环介导等温扩增技术用于检测临床标本乳头瘤病毒HPV18亚型的应用价值。方法设计针对HPV18-L1基因序列中6个区段的4条特异引物，在等温条件下（65℃）进行核酸扩增反应1h，在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂；利用建立的环介导等温扩增方法进行敏感型检测以及检测正常体检妇女和患者子宫颈分泌物的HPV18亚型。结果LAMP检测HPV18L1基因的敏感度为1000拷贝每微升；阴道炎患者HPV18阳性检出率为5．26％（1／19）；慢性子宫颈炎组HPV18亚型检出率为10％（2／20）；宫颈上皮内瘤变（CINI～Ⅱ级）阳性检出率33．3％（3／9）；子宫颈癌I级阳性检出率为64％（16／25）。结论基于目视的环介导等温扩增方法是一种具有经济、快速筛查临床标本中HPV18亚型的诊断工具，可具有在基层医院推广应用的潜能。

摘要：针对突发性疾病预防及常见慢性疾病规范管理对远程医疗的实际需求,设计了一套基于物联网技术的远程医疗系统。本着安全性、稳定性、智能化及实时性的设计原则,基于物联网技术设计了系统的整体架构。并进一步优化系统的物理架构和功能架构。为了提高系统的实用性,基于蓝牙传输技术设计信息采集模块,细化系统工作流程。测试诊断数据的统计和分析结果表明,文中所设计的远程智能医疗系统对于多类常见疾病的误诊率及漏诊率均较低,具有良好的鲁棒性。

摘要：目的对常用的尿蛋白定性检测方法进行评价,分析干化学法检测尿蛋白出现假阳性的影响因素。方法对2 500份随机尿标本分别采用干化学法及磺基水杨酸法定性检测尿蛋白,对2种方法检测结果不一致的标本采用Modular P800全自动生化分析仪进行尿蛋白定量测定,确定阴、阳性结果,针对其主要影响因素(潜血、尿pH值)设计模拟实验,分析干化学法出现假阴性或假阳性的原因。结果采用干化学法与磺基水杨酸法同时检测2 500份随机尿标本,2种方法结果一致(包括相差一级)的有2 391份(95.64%),结果不一致的有109份(4.36%),2种方法检测结果之间差异有统计学意义(P<0.05)。检测结果之间差异有统计学意义(P<0.05)。当尿液中红细胞≥1×10~5时,干化学法会出现假阳性;当尿液pH值在7.0～8.5之间时干化学法易出现假阳性,而当pH值≥8.5时则可能出现假阴性。结论尿液中红细胞及尿液pH值会干扰干化学法定性检测尿蛋白,使其出现假阳性或假阴性,临床实验室应给予足够的重视和关注。

摘要：为借鉴参考国外高校继续教育的先进治理经验,采用文献研究方法,总结和梳理研究英美两个国家高校继续教育治理体系和治理机制的发展经验。研究发现,英国和美国两个国家的继续教育具有较长的办学历史,积累了丰富的治理经验,形成了自身独特的治理体系和治理机制。从历史发展的视角来看,主要经验体现在:制定法律政策强化顶层设计、根据发展需要完善治理体系、动态优化多元成本分摊机制、强化高校主体面向市场自主办学、发挥行业组织作为第三方质量监督作用。从中得到的启示是:我国高校继续教育治理要结合自身特点,要建立以终身教育法为核心的政策体系、构建并完善中国特色的继续教育治理体系、构建多元化的成本分摊机制、推动高校面向市场自主办学、充分发挥行业组织的质量保障机制等,从而推动服务于全民终身学习体系建设。