摘要：目前,我国高校大学生大多是按照课本设定的内容进行验证性实验,这样培养的学生很少积极主动地思考问题,甚至很少向老师提出问题,缺乏探究真谛的热情,其结果表现为学生知识面狭窄,缺乏想象力和创造力,开展医学形态学综合性、开放设计性实验教学,在一定程度上可以弥补这种不足。原先形态学科的实验是由解剖、组胚、病理、

摘要：目的设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,构建能有效下调CDCA3蛋白表达的shRNA真核表达载体,研究其对CDCA3表达的影响,以便进一步研究CDCA3的功能。方法根据文献获得CDCA3的siRNA靶序列,依据RNA干扰机制和shRNA靶序列的设计原则,以CDCA3基因为靶基因,合成一对编码shRNA的两条DNA序列,经退火后合成DNA双链,再克隆至shRNA表达载体pSIREN-DNRDsRed质粒中,连接产物转化***109感受态细胞,然后挑取克隆提质粒,进行酶切鉴定和DNA序列测定。将构建成功的载体通过脂质体介导转染导入人胚肾HEK293细胞,采用Western blot法和Realtime RT-PCR,检测特异性shRNA对CDCA3蛋白在mRNA及蛋白表达水平的抑制效果。结果成功构建靶向CDCA3蛋白的特异shRNA的真核表达载体;转染HEK293细胞后,可显著下调CDCA3在细胞内的mRNA水平及蛋白表达水平。结论 CDCA3蛋白的特异shRNA的真核表达载体能显著下调HEK293细胞内的CDCA3蛋白表达。成功构建CDCA3 shRNA表达载体,为进一步研究CDCA3基因的功能提供了实验基础。

摘要：复杂疾病的遗传流行病学研究是近年来研究的热点,通过全基因组扫描获得了大量复杂疾病的易感区域,下一步重点是通过候选基因的方法对该区域的基因进行关联性的分析,传统的关联性分析是通过病例对照研究设计,但不能避免人口混杂造成的虚假关联.

摘要：目的使用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除人类肝癌细胞HepG2中的甲状腺激素受体相关蛋白3(THRAP3)基因,构建THRAP3基因敲除细胞系。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性靶向THRAP3基因第3个外显子相关序列的多条小向导RNA,通过T7核酸内切酶筛选出切割效率最高的载体,构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒。测序鉴定后,将重组质粒转染至HepG2细胞中,用嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选细胞株,挑取单克隆,再用PCR、测序等方法鉴定细胞基因型,免疫印迹方法鉴定细胞THRAP3敲除效果。使用高通量测序的方法进行基因表达分析。用流式细胞仪检测基因敲除对细胞周期的影响,CCK-8试剂盒检测细胞增殖。结果成功构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒,筛选出特异性敲除THRAP3基因的细胞系,验证了THRAP3敲除对细胞周期以及细胞增殖的影响。结论利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建并获得了THRAP3基因敲除细胞系并初步探究了THRAP3基因功能。

摘要：红杉林在湿地景观中应用具有重要的生态价值,同时也极大丰富了湿地的景观色彩。该文介绍了我国红杉林常见树种和常用的配置方式,探讨了增加树种配置的方式方法,分析了其在湿地生态景观中的应用前景,以期为湿地景观设计提供参考。

摘要：文章利用PHOENICS软件对天棚辐射、置换通风等技术在合肥市"当代花园"住宅小区项目中的实际应用效果进行分析,得出室内温度、风速的分布情况。为保证模型的可靠性,通过现场实测数据,对模型及边界条件进行优化,再在优化后的模型上针对送风风速和天棚管供水温度进行分析,找出最合理的设计参数,为今后工程设计提供参考依据,起到一定的指导作用。

摘要：目的 设计浓缩版社会认知交互训练(social cognition interaction training, SCIT)干预程序并探讨其对精神分裂症患者社会认知和社会功能的影响。方法 选取2018年6月—2020年3月在杭州市第七人民医院住院治疗的70例精神分裂症患者,采用随机数字表法分为干预组(浓缩版SCIT干预+药物治疗)和等待组(仅药物治疗),干预组31例和等待组32例完成干预后评估。干预前后采用阳性和阴性症状量表(PANSS)、个人和社会功能量表(PSP)、面部情绪识别任务(FEIT)及眼区心理阅读任务(ET)评估2组患者的精神病性症状、社会功能及社会认知水平。结果 实施干预后,2组患者PANSS总分及各因子分较干预前显著降低(均P0.05);干预后2组患者个人与社会功能量表、面部情绪识别任务及眼区心理阅读任务评分均较干预前有所提高,且干预组评分[(70.23±6.39)分,(25.35±1.52)分,(29.48±2.67)分]显著高于等待组[(62.69±9.24)分,(22.19±2.24)分,(26.72±2.57)分],差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论 浓缩版SCIT干预可用于我国住院精神分裂症患者的临床干预,对该人群社会认知和社会功能有一定的康复疗效。

摘要：目的构建携带FRET体系(YFP-CFP对)的一组原核表达工程质粒,在大肠杆菌(E. coli)中高效表达后,验证该体系FRET信号作为细胞内监测蛋白相互作用指标的可行性。方法分别构建N端、C端以及两端分别编码YFP和(或) CFP的6个原核表达工程质粒:pNYFP、pCYFP、pNCFP、pCCFP、pYFP-CFP、pCFP-YFP。设计YFP-CFP和CFP-YFP作为阳性对照,而等量的YFP与CFP混合的体系(YFP+CFP)作为阴性对照。将过表达的工程蛋白通过镍柱、分子筛层析柱进行初步纯化后使用酶标仪检测相同摩尔浓度纯化蛋白的FRET信号。在此基础上,进一步用酶标仪检测表达工程蛋白的菌液中的FRET信号。结果通过测序验证,成功构建了6个原核表达的工程质粒。酶标仪检测的结果显示在体外纯化蛋白条件和菌液条件下均可产生明确的FRET信号。结论成功构建了FRET体系的原核表达工程质粒,不仅验证了蛋白条件下的可行性,而且验证了菌液条件下的可行性,为在活细胞条件下对蛋白-蛋白相互作用进行实时的动态研究,提供一个非常便利的实验方法。

摘要：目的:检测中国汉族色素失禁症一家系NEMO基因突变。方法:收集该家系内2例患者及1名正常人外周静脉血和临床资料,提取家系及100名健康对照全基因组DNA,针对NEMO基因外显子区及其侧翼序列设计引物,PCR产物扩增后进行Sanger测序,同时MLPA检测该基因是否存在大片段缺失。结果:该家系2例患者均检测出NEMO基因第5号外显子存在一移码突变c.723_c.724insCAGG,但该家系正常人和100名健康对照个体均未检出此突变。家系内三位被检测者均不存在NEMO基因大片段缺失。结论:该色素失禁症家系内NEMO基因c.723_c.724insCAGG突变可能是其发病的原因。

摘要：该文结合基于问题的学习(PBL)的教学特点对传统泌尿外科教学方式进行改革。在临床医学系泌尿外科教学中,选择泌尿系统结合教学作为试点,在采用授课为主的学习(LBL)方法的同时,结合PBL的教学特点,综合基础医学和临床医学的知识点,设计泌尿系结核PBL病例。采用多媒体授课,缩短教师讲授时间,增加PBL病例讨论内容。该教学方式明显提高了学生的学习兴趣,活跃了课堂气氛,增加了学生学习的积极性和主动性,增强学生分析临床问题的能力。LBL+PBL教学是一种有益的教学新模式。