摘要：为了解人类 ＬＤＬ受体基因内含子 １５的遗传背景，利用长链 ＰＣＲ和锚定 ＰＣＲ分离了 ＬＤＬ受体基因外显子１５－内含子１５－外显子１６和内含于１５的３’末端片段。利用Ｄｙｎａｌｂｅａｄｓ 固相单链分离ＰＣＲ产物直接测序法测定了内含子１５ ３’末端１２２２个碱基序列。序列显示：３’ 末端含有由１６个碱基组成的典型３’末端剪接位点；３’端上游第３１个碱基处含有经典分支位 点。除了经典分支位点外，在３’末端上游第２０个碱基处，还含有一个可能的隐蔽分支位点。 序列还显示了被认为与血清胆固醇水平相关的ＰｖｕⅡ酶切多态性的碱基变异性质，即碱基由 Ｃ－Ｔ的改变同时利用所测的序列，设计了相应的引物，建立了ＰＣＲ检测ＬＤＬ受体基因内含 子 １５ ＰｖｕⅡ多态性技术，并证实此技术可以快速、简便地应用到家族性高胆固醇血症的基因 诊断上。

摘要：综述了三碘苯环尿排型造影剂的研究进展和非离子型单体等渗研究的新突破。分子设计趋于减少分子量、提高碘含量、减少羟基数、分子非对称的方向进行;分子集结(molecularaggregation)现象的解释观点更新。

摘要：背景:成纤维细胞生长因子生物蛋白海绵对创伤性溃疡修复的作用已经受到关注。目的:观察成纤维细胞生长因子生物蛋白海绵对创伤性溃疡的修复作用及可能发生的不良反应。设计:分组对比观察。单位:暨南大学医学院生理教研室。对象:选择2004-03/05暨南大学第一附属医院收治的皮肤创伤性溃疡患者40例,排除糖尿病及全身感染者,创伤性溃疡均位于小腿。随机分为试验组20例,对照组20例。干预措施:试验组20例用无菌成纤维细胞生长因子生物蛋白海绵,对照组20例用无菌凡士林油纱布。更换敷料1次/d,至创面愈合止。全身和局部均不使用影响创面生长的药品。于换药1,2,3周对创面愈合情况进行评估(创面分泌物分为:无、少量、中量及多量;创面边缘反应分为:无、轻度、中度及重度)记录创面愈合后的色素沉着及瘢痕情况。主要观察指标:两组患者溃疡愈合时间、创面愈合过程及不良反应。结果:两组共40例患者均进入结果分析。①两组患者治疗后创面愈合情况:试验组3周内愈合率显著高于对照组[95%(19/20),55%(11/20),χ2=8.533,P<0.05]试验组创面分泌物及创周炎性反应明显轻于对照组创面V两组创面均未发现明显不良反应及瘢痕。结论:成纤维细胞生长因子生物蛋白海绵可促进创伤性溃疡面愈合,缩短愈合时间,且无瘢痕及明显不良反应,是一种安全、方便、无刺激的理想敷料。

摘要：目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、8例B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和8例正常人的外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1的表达情况。实时定量PCR分析各组样本的MALT1 mRNA表达水平。结果:所有样本中均能得到所预期的PCR产物,其中第1对引物可以扩增出2条片段,分别为MALT1转录本1(包含第5、6、7、8、9外显子)和MALT1转录本2(包含第5、6、8、9外显子),第2对引物只能扩增出1条包含转录本1的片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。MALT1 2种转录本均在外周血中有表达,并且MALT1转录本2表达水平高于转录本1。通过灰度分析发现,在B-ALL中,MALT1转录本1的灰度与正常人相比显著增高(P0.05)。此外,B-ALL中,MALT1 mRNA表达水平(中位数:1.253)低于正常人(中位数:1.976)(P=0.05);而B-CLL中,MALT1 mRNA的表达水平与正常人相比无显著差异(P>0.05)。结论:MALT1 2种转录本均表达于正常和B细胞白血病样本中,但B-ALL中两者的表达水平有所差异,同时,B-ALL的MALT1 mRNA表达水平也有所降低。B-ALL中MALT1基因表达的异常可能影响MALT1信号通路而与疾病的发生发展相关。

摘要：目的 探讨2型糖尿病病人（type 2 diabetes mellitus,T2DM）合并大血管病变的危险因素以及危险因素之间的交互作用。方法 设计调查问卷,收集1999年1月~2010年12月期间在广州市某医院住院的2型糖尿病患者的病历资料,包括年龄、性别、病程等19个变量。采用分类树对危险因素进行定性的交互作用分析,采用非条件Logistic回归模型定量分析危险因素的交互作用效应。结果 单纯T2DM无并发症的患者595例,T2DM合并大血管病变754例。建立分类树模型,包括3层,7个结点,4个终末节点,筛选出年龄、总胆固醇（total cholesterol,TC）、病程、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）、TC/HDL、三酰甘油（triacylglycerol,TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）、体重指数（body mass index,BMI）共8个危险因素。而与2型糖尿病大血管病变关联最密切的是年龄、病程和BMI。非条件Logistic回归分析结果显示：年龄与病程（OR=6.215,95%CI：2.867~13.476,P〈0.001）、年龄与BMI（OR=2.484,95%CI：1.465~4.212,P=0.001）在2型糖尿病进展大血管病变中存在交互作用。结论 年龄、病程和BMI相互作用是T2DM合并大血管病变的重要危险因素,年龄超过56岁,病程超过10年的患者应重点监测和干预,以防止大血管病变的发生。

摘要：肾极段切除术是根据肾段血等分布规律而设计的一种手术方法。手术要点是先阻断上极段或下极段动脉,显示肾极段缺血区,然后再予切除。具有不阻断肾蒂,肾极段切除范围较准确,术中和术后出血少等优点。

摘要：目的:探讨Rho激酶对大鼠海马神经元突起生长和骨架相关蛋白mRNA表达的影响。方法:用Rho激酶的抑制剂Y-27632和激动剂溶血磷脂酸(LPA)干预海马神经元,观察突起的生长并用RT-PCR检测大鼠海马神经元神经丝结合蛋白(Dbn1)、微丝肌动蛋白(F-actin)、微管相关蛋白(Tau)、α-微管蛋白(α-tubulin)mRNA的表达。结果:用LPA干预2 h后突起从远端逐渐退缩,长度缩短,细小突起退缩明显;Y-27632干预2 h后细胞胞体和突起的远侧端新生出细小突起。RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合。内参照β-actin电泳条带在不同分组灰度较均一,呈高表达。Dbn1呈较高水平表达,激动剂LPA组表达下降(P<0.05),抑制剂Y-27632组表达量增多(P<0.05);F-actin和Tau表达呈低水平,激动剂作用后均使表达量相应的减少(P<0.05),抑制剂组表达增多(P<0.05);α-tubulin表达量最高,激动剂组表达量出现明显下降(P<0.05),抑制剂组表达增加(P<0.05)。结论:激活Rho激酶下调Dbn、F-actin、Tau、α-tubulin mRNA的表达并诱导突起缩短,抑制则增加其表达并促进突起生长。

摘要：[目的]系统评价计算机导航辅助人工全膝关节置换(CASTKA)与传统TKA技术临床效果的差异。[方法]计算机检索MEDLINE、Cochrane、EMbase、CNKI数字图书馆等数据库,并手工检索查找有关比较CASTKA与传统术式的临床试验研究报道。由2名评价员独立筛查试验、提取资料和评估方法学质量,采用Cochrane协作网提供的RevMan5.0软件进行Meta分析。[结果]共纳入符合本研究设计标准的临床随机对照试验16篇,计算机导航组1003膝,传统方法组917膝。导航组下肢力线内翻或外翻3°以内的发生率高于传统组;胫骨和股骨假体冠状位对线内翻或外翻角在3°以内的发生率,导航组亦优于传统组。导航组在胫骨假体后倾角、股骨假体外旋角和深静脉血栓发生率与传统组比较差异无统计学意义。[结论]与传统技术相比计算机辅助系统能带来更佳的下肢力线和假体位置,但长期的临床疗效和CAS系统的临床效价比尚需更多研究。

摘要：目的:探讨大鼠海马发育过程中坍塌反应调节蛋白(CRMPs)家族mRNA的表达规律。方法:用RT-PCR方法检测大鼠发育不同阶段CRMPs家族mRNA的表达。结果:RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合。内参照β-actin电泳条带在发育各时期灰度无明显差异。CRMP-1 mRNA以新生鼠和幼年鼠表达最多,成年大鼠弱表达(P<0.05)。CRMP-2从胚胎鼠至幼年鼠呈现逐渐增加的趋势,成年鼠相对较低(P<0.05)。CRMP-3以幼鼠和成年大鼠表达较多,其中幼鼠表达最多(P<0.05),新生鼠表达最少(P<0.05)。CRMP-4在胎鼠、新生鼠和幼年鼠表达量接近,成年鼠表达相对较低(P<0.05)。CRMP-5在各个阶段均呈较高表达,以新生鼠和成年鼠表达较多,其中成年大鼠表达最多(P<0.05),胎鼠表达最弱(P<0.05)。结论:从胚胎期至幼年期,CRMPs家族除CRMP-4稳定于高表达水平外,其余成员表达量均逐渐增多,其中CRMP-3和CRMP-5区别于其他成员,在成年期表达量继续增高。

摘要：自身免疫性溶血性贫血(AIHA)是机体免疫功能紊乱所引起的溶血性贫血，主要由于体内存在自身抗体而诱发。近年有研究发现AIHA病人的T细胞激活有异常[1,2]，但有关资料甚少。本文利用RT-PCR和基因扫描(Genescan)等方法分析T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因互补决定区3(CDR3)的长度，从而了解2例AIHA病人TCR Vβ各亚家族T细胞的分布和克隆性特点。1 材料与方法1.1 标本 经溶血性贫血有关检查等确诊的AIHA和Evans综合征各1例，正常人10例，T细胞株Molt-4和Jurkat作为对照。外周血单个核细胞分离、RNA提取及cDNA合成均按常规方法进行。1.2 反转录-多聚酶链反应(RT-PCR) 据Vβ24个亚家族基因设计相应的24个Vβ特异性上游引物，并在Cβ区设一Cβ下游引物[3]。每一标本分别以一Vβ(1～24)与Cβ引物共进行24次PCR检测。PCR操作按已报道方法进行[4,5]。1.3 基因扫描分析(T细胞克隆性分析)1.3.1 标记PCR产物(runoff reaction) 采用一荧光素标记引物Cβ-Fam(位于Cβ内侧)进行不对称半巢式PCR扩增，将首次PCR产物标上荧光素(fam)。总反应体积为10μl，其中包括2μl首次PCR产物，0．1μmol/L Cβ-Fam，3 mmol／L MgCl2，0．2 mmol/LdNTP,0．25U Taq聚合酶，PCR操作按已报道方法进行[4,5]。1.3.2 基因扫描(Genescan)分析 由于Vβ和Cβ引物是固定的，故Vβ/Cβ所扩增的PCR产物的大小决定于Vβ区和Dβ区之间以及Dβ区和Jβ区之间重排时的连接片段N区，即VβNDβNJβ(CDR3)，不同的T细胞克隆的PCR产物长度和浓度不同，通过PCR产物的状况，便可了解体内T细胞克隆存在的情况。经荧光素(fam)标记的产物通过自动序列分析仪(373A DNA序列仪，ABI，PE公司)中的分析软件672即基因扫描分析，通过电泳过程中所收集的不同位置和高度的峰表示产物的大小和含量；峰的形态提示产物的均一性即克隆性，当PCR产物中所含的DNA扩增片段大小一致时，在电泳过程中，其迁移率完全相同，故在同一时间点通过扫描探头，所显示的结果为一单峰图象，即提示为PCR产物来自于CDR3长度完全相同的T细胞，即单克隆的细胞；而一主峰和少数小峰图象提示产物主要来自同一克隆即为寡克隆性；而多峰图象提示多克隆性。有关操作步骤按使用指南进行。取标记的PCR产物1μl，加入2．5 μl甲酰胺，0．5μl标准品[ABI，GENESCAN,500-TAMRA，其中含有不同大小的用荧光素Tamra标记的DNA片段作为产物大小的参照物]及0．5μl加样缓冲液(葡聚糖兰50mg／ml，EDTA25mmol／L)，于94℃，4 min变性后于6％聚丙酰胺凝胶，373ADNA序列分析仪中电泳及分析结果[4,5]。2 结果2.1 RT-PCR扩增结果 正常人T细胞包含几乎全部的Vβ亚家族T细胞；Molt-4仅表达Vβ2、Jurkat仅表达Vβ8的T细胞[4,5]，AHA病人的T细胞中仅存在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ13、Vβ16和Vβ24等6个亚家族的T细胞；而Evans综合征病人的T细胞中则存在Vβ3、Vβ13和Vβ16等3个亚家族T细胞。2.2 基因扫描分析结果 正常人所有PCR产物均呈多峰图象，提示为多克隆性[5]；T细胞株的产物则为单克隆性；而所检测的2例病人中的Vβ3PCR产物均呈寡克隆性，Vβ16的PCR产物均呈双克隆性，其它的产物均提示为多克隆性(图1)。