摘要：谷氨酸是中枢神经系统一种重要的兴奋性神经递质，它与相应受体分子相互作用，通过细胞膜对阳离子通透性的改变或与Ｇ蛋白和第二信使系统相偶联，从而引起一系列复杂的信号转导反应。近年有关谷氨酸受体分子及其基因的研究表明：由于多基因家族、选择性剪接、ＲＮＡ编辑以及异聚体形成等分子机理，使谷氨酸受体分子的结构和功能具有多样性，这种多样性是生物多样性的分子基础，也在微观水平上证明了生物多样性的原理。这方面的深入探索必将为中枢神经系统该受体表达及调控以及相关神经精神疾病发病的分子机理和治疗性药物设计提供新的线索。

摘要：广告市场的快速发展和媒体在载体上的革新化，对广告媒体的品牌意识提升起着极大的推动作用。在传统媒体的领域里，品牌的建立显得格外重要。也更具挑战性。《上海日报》就是一个典型，它急需建立自身的品牌形象和差异优势。当《上海日报》找我为该报进行品牌策划与广告执行时，我们首先对产品进行了剖析。

摘要：目的:建立针对真菌类中药材茯苓的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)鉴定技术,从分子生物学角度出发,对茯苓的真伪进行鉴定。方法:对经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法进行改良,提取样品基因组dna,以茯苓内转录间隔区(internal transcribed space, ITS)为目的序列,设计特异性引物,优化PCR反应体系,建立茯苓PCR鉴定方法,同时克隆特异性扩增的目的条带,测序鉴定其准确性,最后进行方法学验证。结果:提取的基因组dna浓度较高、纯度较好、完整度良好。琼脂糖凝胶电泳结果表明正品茯苓可以在199 bp处出现单一明亮的特异性扩增条带,而伪品不出现扩增条带,引物的特异性为100%,克隆后的目的片段电泳图谱清晰明亮,克隆片段与Genbank数据库中已登记的茯苓物种序列相似性高达100%。在操作人员不知样品真伪的情况对样本检测,目标条带出现位置与预期一致;灵敏度检测结果表明,dna检测下限可达1 ng·μL^(-1);挑选3位实验室人员进行茯苓真伪检测,结果相同且和预期一致,建立的茯苓PCR鉴定方法特异性良好,准确性高,重复性好。结论:PCR鉴定技术为茯苓的真伪鉴别提供了简便可靠、特异性良好,并且准确性高的鉴别方法。采用分子克隆技术可以成功保存茯苓标准对照品,测序结果准确可靠。

摘要：我们按照 h BDNF基因全长编码序列设计合成引物 ,从人基因组 dna中扩增出 76 0 bp的片段 ,反向插入到 p GEM- 3Zf(+ )载体上 ,获得 p GEMBF18克隆 ,限制性酶分析和 dna序列测定均证实该克隆插入片段为h BDNF基因全长编码序列。从 p GEMBF18克隆中获取 h BDNF全长编码片段 ,与原核表达载体 p GEX- 5 T连接 ,构建了 p5 TBF34原核表达重组质粒。重组质粒转化大肠杆菌 JM10 9,经 IPTG诱导表达 ,SDS- PAGE特异区带分子量为 43k Da,此重组蛋白占菌体可溶性蛋白总量的 7.5 3% ,Western杂交证实该特异区带具 h

摘要：氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺修饰(O-GlcNAc修饰)是一种发生在蛋白质丝氨酸、苏氨酸羟基上的一种动态、可逆的翻译后修饰。O-GlcNAc修饰在细胞的许多关键过程中发挥重要作用,也是研究阿尔茨海默病和糖尿病等的重要途径,但是常用于O-GlcNAc蛋白检测的抗体特异性或者检测分子量范围仍存在问题且耗时(~36 h)过长,对后续研究造成困扰。在本研究中,我们设计构建了产气荚膜梭菌OGA(O-GlcNAcase)突变体(CpOGA^(D298N))与核心链霉亲和素Stv13融合表达质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13。将质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,获得了融合蛋白质CpOGA^(D298N)-Stv13。通过CpOGA^(D298N)特异性结合O-GlcNAc的能力及生物素-亲和素特异性亲和作用,设计了Far-Western blot(Far-WB)用于检测蛋白质O-GlcNAc修饰,利用sOGT(short form O-GlcNAc transferase)、去O-GlcNAc修饰sOGT、细胞裂解液样本及人肝细胞核因子1A(hepatocyte fuclear factor 1A,HNF1A)对该方法进行验证。本研究成功构建了一种蛋白质O-GlcNAc修饰检测方法,耗时相对O-GlcNAc特异性抗体缩短至5~7 h,丰富了蛋白质O-GlcNAc修饰的检测方法,为其后续研究奠定了基础。

摘要：SSR标记在真实性检测、纯度鉴定、以及指纹库构建中起着至关重要的作用。在其筛选过程中会遇到许多具有N+1峰等异常峰型、非特异性峰、多态性低、不适于软件自动分析等非优异SSR引物。为了解并掌握非优异SSR引物表现以及形成原因,本研究以22份初筛材料、27套三联体材料及95份自交系对新型SSR引物进行评估筛选,从中选取有代表性的11对SSR引物,现在已对10种非优异SSR引物表现进行描述,分析形成原因,通过测序对一对引物进行重新设计,并获得较好效果。

摘要：本研究针对平贝母的ITS2序列设计特异性鉴别引物,优化反应体系及条件,构建PCR-核酸试纸条实现可视化检测平贝母。通过分子克隆及测序技术,构建平贝母dna阳性对照品,制定质量标准。对建立的方法进行性能评价,检测其灵敏度、特异性和重复性,对市售样品进行真伪鉴定。结果显示,基于ITS2序列可对平贝母及其混伪品进行区分。正品平贝母PCR产物滴定于试纸条上显示T、C线两条带,伪品与阴性对照只显示C线一条带,与琼脂糖凝胶电泳结果吻合。特异性为100%,PCR-核酸试纸条灵敏度可达0.1 ng·μL^(-1),高于凝胶电泳检测10倍。16个平贝母市售样品中11个合格,5个不合格。综上,本研究建立的平贝母PCR-核酸试纸条检测方法特异、快速、精准、可视化,可为平贝母检测提供新的技术思路。

摘要：江源水岸会所位于鄂尔多斯市考考什那文化旅游区南端，面向考考什那水库。五个居住单元像花蕊般向上．向光和空气生长。公共功能同花瓣在地面延伸交织，花瓣的形式决定了结构形态．功能分区，空间围合．景观朝向，光影塑形。间断的花蕊构成花瓣水平空间中的竖向韵律与分流。

摘要：目的　探讨 per基因与阿片类成瘾的相关性 ,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法。方法　设计并合成特异性 per锤头状核酶基因和 per核酶靶 m RNA组分基因 ,并分别重组入体外转录质粒 ,而后将经体外转录反应得到 per核酶 RNA和地高辛标记的 per核酶靶 m RNA组分。将转录产物混合 ,在不同条件下进行体外切割反应后 ,采用地高辛化学发光法检测 per核酶的体外切割效率。小鼠脑室注射直接导入脂质体包裹的重组质粒 pc dna3.1- per RZ dna,按剂量递增法建立吗啡依赖动物模型 ,用纳洛酮催瘾 ,观察戒断反应的变化。结果per核酶对 per核酶靶 m RNA组分的体外切割效率达到 6 0 %。重组质粒组小鼠的刻板跳跃、“湿狗”样抖动和打洞次数与空质粒组、生理盐水组相比明显减少 ,但并不抑制小鼠的体重下降。结论　 per核酶具有体外定点切割 per基因 m RNA组分的活性。经小鼠吗啡成瘾模型检测 ,该重组质粒能成功转染活体小鼠脑细胞并在脑组织内稳定表达 per核酶 ,发挥阻断 per基因表达的作用 ,有效地减轻吗啡成瘾的戒断症状。

摘要：目的探索开放式实验教学在法医毒物分析实验中的应用效果。方法设血液中乙醇浓度检测为开放式实验内容,由学员自行设计实验内容、自己动手操作、结果分析、并最终提交实验报告,由指导教师进行讲评。结果通过对血液中乙醇浓度检测的自行实验设计,学员更好地掌握了实验原理、步骤和开发实验的设计等相关理论知识。结论该学习方式能有效培养学员的动手能力和分析解决问题能力,是提高学员综合素质的有效途径。